抗氧化系统和FGF9在瓦勒氏变性中的作用

发布时间：2020-07-08 12:13

【摘要】：第一部分瓦勒氏变性动物模型探索目的:寻找研究瓦勒氏变性的稳定的实验动物模型。方法:对急性周围神经损伤和运动神经元病(SOD1G93A小鼠)的周围神经进行形态学观察。结果:1.急性坐骨神经挤压伤后的形态学表现,前7天以变性为主,后期以再生为主。2.急性坐骨神经挤压伤模型可以复制瓦勒氏变性中巨噬细胞招募,血-神经屏障受损,髓鞘被吞噬等基本病理变化。3.运动神经元病周围神经的类瓦勒氏变性呈现区域性分布,具体表现为:轴突和施旺细胞变性,巨噬细胞招募,髓鞘结构分解,未见明显再生轴突萌芽。4.NF-E2相关因子2(Nrf2)和成纤维细胞生长因子9(FGF9)在急性挤压伤模型中表达量降低,第二部分和第三部分分别对其进行调控、观察,进而加深对NRF2和FGF9在急性挤压伤模型中的生理病理作用的认知。结论:急性周围神经挤压伤可以更好的重复瓦勒氏变性的过程,是研究瓦勒氏变性的理想模型。第二部分减弱的内源性的抗氧化系统调节急性周围神经损伤中施旺细胞的可塑性目的:研究转录Nrf2在急性周围神经损伤中的生理作用。方法:在急性周围神经挤压伤模型下,以Nrf2基因敲除鼠和Nrf2激动剂体内实验为实验手段,研究Nrf2对瓦勒氏变性和再生的影响。结果:1.在急性周围神经损伤中,抗氧化系统被迅速的关闭,这一过程部分依赖于Nrf2,这一变化诱导了一个短暂的氧化应激,然后抗氧化系统在再生过程中缓慢的部分恢复。2.Nrf2基因敲除促进了施旺细胞分子表型转变和增殖,抑制了修复性施旺细胞的髓鞘形成和再分化。3.Nrf2激动剂-富马酸二甲酯,虽然成功的上调了抗氧化系统,但是对再生神经的髓鞘化没有影响。4.Nrf2功能的调节能够导致氧化应激水平的改变,但是它使靶向的抗氧化基因和活性氧的水平同时升高或降低。结论:Nrf2抗氧化系统在受伤的神经中被短暂的关闭,促进了施旺细胞分子表型改变和增殖,它们功能的恢复对施旺细胞再分化和髓鞘形成是至关重要的。第三部分FGF9通过抑制施旺细胞去分化和促进巨噬细胞招募改变了瓦勒氏变性和再生过程目的:为了研究FGF9在瓦勒氏变性和神经再生中的作用。方法:采用措施在周围神经急性挤压伤模型中调控FGF9的含量,进而研究FGF9对瓦勒氏变性和再生的影响,包括:培育FGF9在施旺细胞中特异性敲除的小鼠品系;神经内注射外源性FGF9蛋白,细胞外调节激酶ERK1/2的抑制剂-PD0325901也被用来进一步阐明FGF9激活通过ER K1/2产生的作用。结果:1.在未损伤神经中FGF9在轴突和施旺细胞中都有表达,在急性挤压伤时表达量降低。2.在施旺细胞中特异性敲除FGF9损害了损伤神经的碎片清除能力,最终阻碍神经纤维再生。3.施旺细胞中特异性敲除FGF9促进了施旺细胞去分化,通过减少Mc p1,Tnfα,Il1β基因的表达量和血-神经屏障的渗漏而延缓巨噬细胞招募。4.外源性FGF9蛋白神经内注射减缓神经纤维变性,抑制施旺细胞去分化,加速巨噬细胞侵入。5.外源性FGF9蛋白能增加ERK1/2磷酸化水平,PD0325901能够部分逆转外源性FGF9蛋白神经内注射所引起的P75,Cyclin D1,Mcp1,Tn fα,Il1β,c-Jun改变。结论:FGF9抑制了施旺细胞去分化,加速了巨噬细胞的招募,外源性FGF9蛋白发挥作用部分依赖于ERK1/2。
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R745
【图文】：

图 1 损伤后不同时间点坐骨神经形态学变化Fig. 1 Morphology of sciatic nerves at different time-points after injury. (A-D)TEM images of sciatic nerves while uncrushed (A), and at Day 3 (B), Day 7(C), Day 28 (D) after nerve crush. (E-H) TB images of sciatic nerves whileuncrushed (E), and at Day 3 (F), Day 7 (G), Day 28 (H) after nerve crush(bars=20μm).

图 2 坐骨神经损伤前后基本病理观察thological observation of sciatic nerves before a) MBP immnostaing, and (C) EB staining of uncm distal end on Day 7 of crushed nerves (bars=

21萎缩侧索硬化症小鼠坐骨神经类瓦勒氏变性形orphology observation of nerves from amyotroph- Wallerian-like degeneraiton. (A-B) TB staining otermate and SOD1G93Amice (bar=50μm). (C-D) mages of nerves from end-stage littermate and SOared representative nerve fibers of (F) (for E-J, ba

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本文编号：2746525