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RNA结合基序蛋白3对急性脑损伤的保护作用研究

发布时间:2020-07-12 10:09
【摘要】:目的:了解外源性RBM3对急性脑损伤大鼠是否具有保护作用,及其保护作用与亚低温对急性脑损伤的保护作用是否有相似效应方法:40只清洁级雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成4组,每组10只,即正常对照组(NC组),脑损伤组(CI组),脑损伤+RBM3组(CR组),脑损伤+亚低温组(CM组)。其中(CI组,CR组,CM组)均为缺氧方法构建的急性脑损伤模型,其中CM组通过亚低温处理,使大鼠肛温维持在32℃。观察比较各组大鼠24小时后神经行为学表现。各组大鼠分别于实验处理后24小时通过采血进行肝肾功能(CK、AST、Cr)、血气分析水平的检测。用HE染色法观察各组大鼠脑、肺、肝、肾组织的病理损伤情况。所得数据均经统计学软件分析。结果:1.通过缺氧方式成功构建大鼠急性脑损伤模型,大鼠在缺氧过程中出现青紫、躁动甚至昏迷、死亡等脑组织缺氧、神经功能障碍、机体严重损伤的表现。缺氧刺激24小时后,与正常对照组比较,脑损伤模型组大鼠出现行为学改变,在学习、记忆以及空间定向能力方面减退。2.采血进行血气分析(PH、PO_2、PCO_2、SaO_2),(1)各组大鼠的PH值比较差异均无统计学意义。(2)脑损伤组PO_2、PCO_2、SaO_2结果与正常对照组差异均有统计学意义。经过RBM3或者亚低温处理后:(3)PO_2和SaO_2结果均有所升高且与脑损伤组比较,以及两组之间比较,P0.05,差异有意义。(4)PCO_2值结果RBM3组与脑损伤组比较,P0.05,差异无意义。亚低温组结果明显降低,与脑损伤组比较P0.05,差异有意义。3.采血进行生化指标(CK、AST、Cr)分析,脑损伤组CK、AST、Cr明显高于正常对照组,且经过RBM3或者亚低温处理后:(1)CK值与脑损伤组比较均有所降低,P0.05。两组之间比较差异无意义,P0.05。(2)AST结果与脑损伤组比较同样均降低,P0.05,且两组之间比较P0.05,差异有意义。(3)Cr值结果与脑损伤组比较,RBM3组差异无意义P0.05,亚低温组结果明显降低P0.05。4.重要器官保护作用比较:HE染色结果显示:经缺氧处理的脑损伤组的大鼠在脑、肝、肺、肾的病理图片显示均有明显损伤,而经过RBM3或亚低温处理后,脑、肝、肺病理损伤程度均明显减轻。结论:1.外源性RBM3对急性脑损伤大鼠具有一定的保护作用。2.外源性RBM3对急性脑损伤大鼠的保护作用与亚低温对急性脑损伤大鼠的保护作用具有相似效应。
【学位授予单位】:安徽医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2019
【分类号】:R743
【图文】:

序列,离心管,维持液,实验组


图 1 RBM3 溶液的序列稀释Fig 1 Serial dilution of RBM3 solution注:选择 8 个离心管,第一个对照组中加入 1.8 ml 维持液,在实验组的一系列的离心管中同样加入 1.8 ml 的维持液,在第一个实验组离心管中加入 0.2 ml 的RBM3 溶液,充分吹打、混匀此时该管中的 RBM3 浓度为 10-1mg/ml,然后在第一个离心管中取混合后的 RBM3 溶液 0.2 ml 加入到第二只离心管中,再次进行吹打、混匀则该管 RBM3 的浓度为 10-2mg/ml,再次取混合后的 RBM3 溶液 0.2 ml加入第三只离心管中该管 RBM3 的浓度为 10-3mg/ml,依此类推,作系列稀释,则得到的列续为 RBM3 进行 10 倍稀释。3)弃去培养板上各孔细胞的培养液,用 PBS 轻轻洗涤三次后,每孔加入相应稀释度 RBM3 溶液,每个稀释度重复 3 个孔,置于 37℃、50%CO2培养箱中培养,培养期间每隔 2 个小时摇动培养板数下,以保证所有细胞都能充分接触。

状态图,小胶质细胞,神经,状态


10ug/ml 作用于神经小胶质细胞。不同浓度的 RBM3(0、0.01、0.1、1.0、10ug/ml 作用下的小胶质细胞 24h 后,细胞活性和细胞状态如下。表 1 小胶质细胞活性及状态Tab 1 Microglia cell activity and statusRBM3 浓度(ug/ml) 细胞活性 细胞状态空白对照 0.847±0.063 静息状态0.01 0.847±0.078 静息状态0.1 0.862±0.064 部分活化1 0.861±0.069 部分活化10 0.883±0.075 大部分活化100 0.868±0.071 活化状态1000 0.697±0.083 部分细胞死亡

脑组织


图 3 脑组织 HE 病理染色(×200)Fig 3 Hematoxylin and eosin(HE)staining of the brain tissues(×200)

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本文编号:2751793

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