过表达cathepsin L在人脑胶质瘤细胞U251侵袭迁移中的作用

发布时间：2017-03-30 05:05

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【摘要】：目的：研究过表达溶酶体组织蛋白酶L (cathepsin L)在人脑胶质瘤细胞U251侵袭迁移中的作用及探讨其调控机制。方法：以X射线照射U251细胞,采用过表达cathepsin L慢病毒感染的方式增加U251细胞中cathepsin L的表达,通过细胞划痕实验及transwell侵袭实验检测U251细胞的迁移、侵袭能力的改变,通过集落形成实验检测U251细胞的增殖能力；Western blotting和免疫荧光法检测U251细胞中cathepsin L的变化及上皮间质转化标志物(E-cadherin、vimentin、N-cadherin)的表达；G-LISA RhoA/CDC42 Activation Assay的方法测定细胞骨架蛋白RhoA及CDC42的活性；鬼笔环肽染色法观察细胞骨架结构的改变。通过western blotting方法检测临床人脑胶质瘤标本中的cathepsin L和EMT标志物表达情况。结果：X射线和过表达cathepsin L慢病毒均能增加U251细胞中cathepsin L的表达进而加强细胞的迁移侵袭能力,过表达cathepsin L能促进U251细胞的增殖并使RhoA 和 CDC42的活性升高、降低E-cadherin以及增加N-cadherin, vimentin 和 snail的表达。鬼笔环肽实验结果显示过表达cathepsin L引起了U251细胞的骨架重构。在13例临床人脑胶质瘤标本中,有9例标本的cathepsin L 和 E-cadherin的表达量呈反比关系,与间质型标志物(N-cadherin, vimentin)和 snail呈正比关系。结论：过表达cathepsin L对胶质瘤U251细胞的侵袭能力具有一定的作用,其分子机制可能涉及细胞骨架蛋白以及上皮问质转化相关蛋白表达的调控。
【关键词】：cathepsin L 脑胶质瘤 上皮间质转化 细胞骨架
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 序言8-11
• 一、组织蛋白酶cathepsin L与肿瘤侵袭迁移8
• 二、电离辐射与肿瘤侵袭迁移8-9
• 三、上皮间质转化与肿瘤侵袭迁移9
• 四、Rho GTPase与肿瘤侵袭迁移9-11
• 实验部分11-22
• 材料与方法11-22
• 一、材料11
• 二、实验方法11-22
• 实验结果22-29
• 1、X射线对人脑胶质瘤细胞U251的侵袭迁移能力的影响22-23
• 2、过表达cathepsin L对U251细胞的侵袭迁移能力的影响23-24
• 3、过表达cathepsin L对U251细胞增殖能力的影响24
• 4、X射线对EMT标志物的影响24-25
• 5、过表达cathepsin L对U251细胞中EMT相关蛋白表达的影响25-26
• 6、过表达cathepsin L对U251细胞中RhoA及CDC42活性和细胞骨架的影响26-28
• 7、临床脑胶质瘤患者样本分析28-29
• 讨论29-31
• 结论31-32
• 参考文献32-36
• 英文缩略词表36-37
• 综述37-46
• 参考文献41-46
• 致谢46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 苗旺;刘晓东;范益民;赵和千;王宏勤;郝解贺;;人脑胶质瘤中RhoA的表达及其临床意义[J];中华临床医师杂志(电子版);2011年09期

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本文编号：276268