大肠杆菌胞外囊泡对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖凋亡、迁移影响的实验研究

发布时间：2020-08-02 16:57

【摘要】：目的:研究大肠杆菌胞外囊泡(E.coli-OMVs)对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖、凋亡和迁移的影响,为神经母细胞瘤寻找新的治疗药物。方法:采用差速离心法提取大肠杆菌胞外囊泡,观察囊泡形态并测定囊泡粒径范围。随机分为4组:正常对照组、胞外囊泡低剂量组(100μg/mL E.coli-OMVs)、胞外囊泡中剂量组(500μg/mL E.coli-OMVs)和胞外囊泡高剂量组(1000μg/mL E.coli-OMVs)。MTT检测各组细胞增殖能力;TUNEL和Western Blot分别检测各组细胞凋亡情况及凋亡相关蛋白cleaved-caspase3的表达;Transwell检测各组细胞迁移能力。结果:透射电镜下E.coli-OMVs呈双层膜、中空、圆形或椭圆形,其内含低密度或高密度物质,具有明显的异质性,粒径分析结果表明其直径分布在30-450nm。与对照组相比,经E.coli-OMVs干预后,SK-N-SH细胞增殖能力显著降低;细胞凋亡增加,cleaved-caspase3蛋白表达水平明显上调;而迁移能力显著降低(P0.05)。结论:E.coli-OMVs对SK-N-SH细胞具有直接杀伤作用,有望成为神经母细胞瘤的治疗药物。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R739.4
【图文】：

重庆医科大学硕士研究生学位论文凋亡[6, 20]，亦有研究表明，G-菌释放的 OMVs 在小鼠结肠癌模型体内可以显制肿瘤的生长[21]，但其是否直接对肿瘤组织进行杀伤，目前尚未可知。因此，验拟研究 E.coli-OMVs 对人神经母细胞瘤 SK-N-SH 细胞增殖、凋亡以及迁移的影响，明确 G-菌 OMVs 是否对 SK-N-SH 细胞具有杀伤作用，以期为难治经母细胞瘤及其它肿瘤的治疗提供新的思路及研究基础。

coli-OMVs提取及鉴定Figure1ExtractionandidentificationofwildtypeE.coli-OMVs.A:Transmissionelectron

重庆医科大学硕士研究生学位论文表 1 各组不同时间点细胞的增殖活性Table 1 proliferation of human SK-N-SH cell at different time point0.05,**P＜0.01 vs control, # P＜0.05, ## P＜0.01 vs 100μg/mLE.coli-OMVsvs 500μg/mL E.coli-OMVsControl 100μg/mlE.coli-OMVs500μg/mlE.coli-OMVs1000μg/mlE.coli-OMVs 0.756±0.032 0.585±0.044*0.535±0.035**0.453±0.01 0.932±0.094 0.640±0.024**0.594±0.036**0.505±0.0 1.322±0.053 0.824±0.053**0.683±0.028**0.515±0.02

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本文编号：2778803