神经危重症患者感染的肺炎克雷伯杆菌基因学特征及其环境定植状态研究

发布时间：2017-03-31 00:21

  本文关键词：神经危重症患者感染的肺炎克雷伯杆菌基因学特征及其环境定植状态研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的分析神经危重症患者感染的肺炎克雷伯杆菌(Klebsiella pneumoniae,KP)基因学特征及其环境定植传播状态,分析KP携带的耐药基因与耐药表型的关系,指导临床抗菌药物的应用和神经重症加强治疗病房(Neurological intensive care unit,NICU)环境的消毒灭菌,从而降低NICU的KP感染率。方法2015年1月~10月,记录所有入住NICU患者一般情况及临床治疗情况,对感染患者及时采集各种相应感染部位的标本,并在感染发生24小时之内对其所居住的病房环境(包括空气、枕头、棉被、床头柜表面)进行采样,并检测标本的病原学及药物敏感性,同时保留KP。常规监测NICU大小房间(大房间6张床、小房间2张床)环境的微生物学分布特点,保留KP。采用煮沸法提取KP的DNA,利用多聚酶链反应(PCR)扩增KP耐药基因,对扩增的目的基因用琼脂糖凝胶电泳,若出现与目的基因片段大小相同的条带即判为阳性。利用脉冲场凝胶电泳相关技术(PFGE)检测患者感染及环境中的KP菌株之间的相似性。结果2015年1月~10月NICU住院总人数为221例,感染患者共154例,其中医院感染41例,感染率18.55%,148例进行了病原学检查,送检率为96.10%;检出非重复病原菌共99株,其中KP 25株,铜绿假单胞杆菌21株,大肠埃希杆菌11株。感染环境监测中,于大房间的空气及床头柜表面各发现1株KP(记为A’、T’),于小房间的空气中发现1株KP(记为A1);常规环境监测中未检出KP。非重复KP 25株,均分离于患者的痰标本中,所有的菌株对氨苄西林及哌拉西林完全耐药,对磺胺甲恶唑/甲氧苄啶完全敏感,对哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、亚胺培南、头孢替坦、阿米卡星等抗菌药物均很敏感。从环境中检出的3株KP的耐药率较高。25株患者感染KP检出耐药基因:β-内酰胺类:SHV 24株,TEM及CTX-M-9各2株,KPC、CTX-M-1、CTX-M-2及IMP各1株;氨基糖苷类:rmt B及npm A各1株;喹诺酮类:qnr B 4株,qnr A 3株,qnr S 2株,acc-(6’)-Ib-cr 1株。3株环境中KP检出耐药基因:SHV 2株,CTX-M-9、IMP、rmt B及acc(6')-ib-cr各1株。对29株KP(同时包含一名KP感染患者咽拭子中的菌株)进行酶切后电泳,有27株成功分型,按照相似度100%视为相同PFGE型别,将27株菌分为了23种型别。其中,1521Y和1521T为同一型(同一名患者的咽拭子与痰中的2株KP),1520和1525为同一型,A’和T’为同一型,且与1503菌株相似度在86.7%,1501和1513为同一型。结论KP是NICU患者感染的最主要致病菌,患者年龄、住院时间、抗菌药物的使用以及侵入性操作治疗是患者发生感染,病情加重的重要因素。KP携带耐药基因以SHV阳性率最高,可能是KP对氨苄西林及哌拉西林耐药的主要基因型,KP多药耐药的菌株多携带多种耐药基因,是其产生多药耐药的基因学基础。KP对氨苄西林及哌拉西林完全耐药,应避免临床应用,可选择磺胺甲恶唑/甲氧苄啶、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、亚胺培南、环丙沙星、头孢替坦、阿米卡星等抗菌药物;产ESBLs菌株耐药性明显高于非产ESBLs菌株,应加强产ESBLs菌株的检测。KP可以在患者与患者之间传播,也可以定植在环境中,引起患者的感染,并可以长期定植,是引起暴发流行的潜在危险因素,应加强环境的监测,及时消毒灭菌,有效降低患者的感染率。
【关键词】：神经危重症 肺炎克雷伯杆菌 基因学特征 环境定植
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R741
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-13
• 第1章 NICU患者感染监测及环境监测13-26
• 1.1 实验材料和仪器13
• 1.1.1 实验试剂13
• 1.1.2 实验仪器13
• 1.2 实验方法13-17
• 1.2.1 研究对象13
• 1.2.2 NICU感染监测13-16
• 1.2.3 NICU常规环境监测16-17
• 1.2.4 病原菌鉴定及药敏实验17
• 1.2.5 资料整理与分析17
• 1.3 结果17-21
• 1.3.1 感染监测结果17-20
• 1.3.2 常规环境监测结果20-21
• 1.4 讨论21-22
• 1.5 结论22-23
• 参考文献23-26
• 第2章 KP耐药基因及同源性检测26-50
• 2.1 实验试剂和仪器26-27
• 2.1.1 实验试剂26
• 2.1.2 实验仪器26-27
• 2.2 实验方法27-33
• 2.2.1 KP耐药性检测27
• 2.2.2 KP耐药基因检测27-29
• 2.2.3 KP菌株同源性检测29-33
• 2.3 结果33-45
• 2.3.1 KP的耐药性检测结果33-34
• 2.3.2 KP的耐药基因检测结果34-43
• 2.3.3 KP同源性检测结果43-45
• 2.4 讨论45-48
• 2.5 结论48
• 参考文献48-50
• 第3章 综述 肺炎克雷伯杆菌的耐药性及耐药基因研究进展50-58
• 3.1 KP流行现状及耐药性51-52
• 3.2 KP耐药基因研究52-54
• 3.2.1 β-内酰胺类耐药基因52-53
• 3.2.2 氨基糖苷类修饰酶和 16SrRNA耐药基因53-54
• 3.2.3 喹诺酮类耐药基因54
• 参考文献54-58
• 结论58-59
• 附录A NICU患者感染部位和类型研究样本登记表59-60
• 附录B 病房环境监测表60-61
• 致谢61-62
• 导师简介62-63
• 作者简介63-64
• 学位论文数据集64

  本文关键词：神经危重症患者感染的肺炎克雷伯杆菌基因学特征及其环境定植状态研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：278460