普罗布考预处理对高脂血症大鼠脑缺血再灌注后NF-κB和ICAM-1表达影响的实验研究

发布时间：2020-09-29 22:33

　　目的:通过普罗布考预处理给药方式,观察高脂血症大鼠脑缺血再灌注后,缺血脑组织核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和细胞间粘附分子-1(cellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表达的情况,探讨普罗布考对高脂血症大鼠脑缺血再灌注后脑组织的神经保护作用及可能的机制。方法:1.高脂血症大鼠模型的建立:选取130只雄性SD大鼠,随机分为普通组(10只)、高脂组(120只),将高脂血症造模成功的大鼠随机分为4组,每组30只:假手术组,缺血再灌注组,低剂量普罗布考组,高剂量普罗布考组。每组以缺血2h后根据再灌注6h、12h、24h、48h、72h分为五个亚组,各亚组5只大鼠,各组增加5只大鼠用于缺血2h后再灌注24h时间点行TTC染色计算脑梗死体积比。低、高剂量普罗布考组连续2周每天灌胃普罗布考混悬液100mg/kg、500mg/kg,假手术组及缺血再灌注组则予以相同剂量0.5%CMC,用改良Longa法制作大脑中动脉阻断(MCAO)模型。3.检测指标:大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C,HE染色法观察大鼠脑组织病理变化,TTC染色法计算脑梗死体积比,免疫组织化学法检测NF-κB和ICAM-1阳性细胞的表达,TUNEL法检测凋亡细胞表达。结果:1.高脂血症模型:与普通组比较,高脂组TC、TG及LDL-C含量增高,HDL-C含量减低,差异均具有统计学意义(P0.05)。2.神经功能评分情况:与假手术组比较,其余各组术后6h-72h的神经功能缺损评分显著降低(P0.05),其中在24h-48h达最低;与缺血再灌注组比较,低、高剂量普罗布考组在术后12h-72h神经功能缺损评分增高(P0.05);与低剂量普罗布考组比较,高剂量普罗布考组在术后12h-72h神经功能缺损评分增高(P0.05)。3.缺血脑组织病理变化:假手术组未见病理改变,低、高剂量普罗布考组病理改变较缺血再灌注组减轻,其中高剂量组更显著。4.脑梗死体积比测定:假手术组未见梗死灶,缺血再灌注组可见明显的梗死灶,与缺血再灌注组相比,低、高剂量普罗布考组梗死体积比减小(P0.05),与低剂量普罗布考组相比,高剂量普罗布考组梗死体积减小(P0.05)。5.NF-κB表达:假手术组仅见少量NF-κB阳性细胞,其余各组NF-κB阳性细胞从再灌注6h开始增多,12h小时持续增高,24h达高峰,48h-72h下降,与假手术组相比,差异均具有统计学意义(P0.05);与缺血再灌注组相比,低、高剂量普罗布考组在12h-72h的脑组织NF-κB表达减少(P0.05);与低剂量普罗布考组相比,高剂量普罗布考组在12h-72h的脑组织NF-κB表达减少(P0.05)。6.ICAM-1表达:假手术组仅见少量ICAM-1阳性细胞,其余各组中ICAM-1阳性细胞从再灌注6h开始增多,12h-24h小时持续增高,48h达高峰,72h下降,与假手术组相比,差异均具有统计学意义(P0.05);与缺血再灌注组相比,低、高剂量普罗布考组在6h-72h的脑组织ICAM-1表达减少(P0.05);与低剂量普罗布考组相比,高剂量普罗布考组在6h-72h的脑组织ICAM-1表达减少(P0.05)。7.凋亡细胞表达:假手术组凋亡阳性细胞表达极少,其余各组凋亡细胞从再灌注6h开始增多,12h-24h小时持续增高,48h达高峰,72h下降,与假手术组相比,差异均具有统计学意义(P0.05);与缺血再灌注组相比,低、高剂量普罗布考组在12h-72h凋亡细胞表达减少(P0.05);与低剂量普罗布考组相比,高剂量普罗布考组在12h-72h的脑组织凋亡细胞表达减少(P0.05)。结论:1.通过在高脂血症大鼠模型基础上制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,更能符合人类脑缺血再灌注的病理生理机制。2.普罗布考预处理可改善高脂血症大鼠脑缺血再灌注后的神经功能缺损、减少脑梗死体积比及细胞凋亡,进而减轻脑损伤,以高剂量更显著。3.脑缺血再灌注后,缺血区NF-κB大量表达,在促进细胞凋亡中发挥重要作用,普罗布考预处理发挥脑保护作用机制可能是通过降低NF-κB的表达,从而抑制神经细胞的凋亡。4.脑缺血再灌注后,缺血区NF-κB、ICAM-1大量表达,在促进炎症反应中发挥重要作用,普罗布考预处理发挥脑保护作用机制可能是通过抑制NF-κB和ICAM-1的表达,从而减少脑缺血再灌注后的炎症反应。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R743.3;R589.2
【部分图文】：

指标比较,高脂,血脂,统计学意义

高脂血症大鼠造模.1 检测普通组和高脂组大鼠血清中 TC、TG、LDL-C、HDL-C 的含量组比较差异具有统计学意义(P<0.05)(表 4，图 1)。表 4 普通组与高脂组血脂比较( x ±s，mmol/L)Table 4 Comparison of blood lipid in general group and high-fat group (x ±s，mmol/分组 n TC TG LDL-C HDL-C普通组 10 1.57±0.08 0.50±0.06 0.47±0.07 1.41±0.07高脂组 120 2.85±0.23▲1.05±0.11▲0.70±0.07▲1.20±0.08▲t -40.13 -15.42 -9.72 8.53P值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001：与普通饲料组比较，▲P＜0.01

普罗布考,功能评分,缺血再灌注,低剂量

西南医科大学硕士学位论文注组 30 12.00±0.76▲6.70±1.09▲4.70±1.03▲5.10±0.95▲布考组 30 12.10±1.41▲8.40±0.55▲●6.40±1.20▲●6.95±1.05▲●9布考组 30 12.60±1.30▲10.10±0.95▲●≠8.40±0.86▲●≠9.00±1.38▲●≠11F 18.70 97.72 104.15 102.34 值 <0.001 <0.001 <0.001 <0.001 ：与假手术组比较，▲P<0.05;与缺血再灌注组比较，●P<0.05; 与低剂量普罗布考较，≠P<0.05;

普罗布考,缺血再灌注,低剂量,脑损伤

图 3 各组大鼠脑缺血再灌注术后 24h 脑梗死体积比(%)(x ±s)Figure 3 Cerebral infarction volume ratio after 24h ischemia reperfusion in each grouprats(%)( x ±s)表 7 图 3 表示：假手术组在大鼠脑缺血再灌注术后 24h 未见脑梗死(0.000±0.000)，缺血再灌注组、低剂量普罗布考组及高剂量普罗布考该时间点出现了不同程度的梗死灶，与假手术组相比较，缺血再灌注见明显的脑梗死体积比(34.230±10.060)%(P＜0.05)，表示脑缺血再灌可导致脑损伤。与缺血再灌注组相比，低剂量普罗布考组脑梗死体积8.040±4.724)%和高剂量普罗布考组脑梗死体积比(15.720±2.869)%减小异均有统计学意义(P＜0.05)；与低剂量普罗布考组相比，高剂量普罗

【相似文献】