大鼠脑缺血再灌注早期microRNA-124表达变化与细胞凋亡的关系

发布时间：2020-10-10 11:28

　　 目的研究大鼠脑缺血再灌注早期脑组织中microRNA-124的动态变化与细胞凋亡的关系。方法8周龄SPF级雄性SD大鼠54只,随机分为对照组、假手术组及再灌注3、6、12及24小时实验组。Zea-Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型。逆转录荧光实时定量PCR分析大鼠脑组织中microRNA-124表达的变化。苏木精-伊红染色观察脑组织形态变化。免疫组化及Western blot分析脑组织中Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白的表达变化。Western blot分析STAT3及其活性形式p-STAT3的表达变化。结果1大鼠脑缺血再灌注早期,microRNA-124的表达水平明显增加,于再灌注12小时后达到最高峰。2脑缺血再灌注早期大鼠脑组织中存在细胞凋亡,下游的凋亡执行蛋白Caspase-3和上游的促凋亡蛋白Bax的表达持续增加,而上游抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及Bcl-2/Bax的比例发生动态变化,在增加的同时,于再灌注后12小时达到高峰。3 STAT3的磷酸化形式p-STAT3在大鼠脑缺血再灌注早期脑组织中的表达上调并呈现动态变化,在再灌注12小时达到高峰;而STAT3的表达下调,在再灌注12小时达到最低点。结论大鼠脑缺血再灌注早期,脑组织中microRNA-124的表达动态增加并与上调的抗凋亡蛋白Bcl-2及p-STAT3的表达水平正向相关,表现出相同的变化趋势。microRNA-124表达的动态变化作为对脑缺血再灌注损伤的应激,可通过活化STAT3调节Bcl-2抑制凋亡。
【学位单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R743.3
【部分图文】：

图 1 模型组大鼠大脑组织 TTC 染色.2 TTC staining of rat brain tissue in model脑组织区 microRNA-124 的动态表量 PCR 的检测结果表明，同对照组4 的相对表达量并无明显变化。而模达水平即明显增加。随再灌注时间达量不断增加，于再灌注 12 小时的相对表达量大约为对照组的 6 倍在再灌注 24 小时组相对表达量较小时组。结果见图 2、表 1。

图 1 模型组大鼠大脑组织 TTC 染色Fig.2 TTC staining of rat brain tissue in model group再灌注大鼠脑组织区 microRNA-124 的动态表达时荧光定量 PCR 的检测结果表明，同对照组相比较，croRNA-124 的相对表达量并无明显变化。而模型组中，-124 的表达水平即明显增加。随再灌注时间的延长，24 的相对表达量不断增加，于再灌注 12 小时组表达量oRNA-124 的相对表达量大约为对照组的 6 倍。随后，现下降，在再灌注 24 小时组相对表达量较再灌注 12 再灌注 6 小时组。结果见图 2、表 1。

对照组 1.00±0.10假手术组 1.27±0.323 h 2.74±0.32a6 h 4.70±0.62a12 h 6.77±0.67a24 h 5.30±0.76a注：a：与对照组比，P<0.001。1.2.3 苏木精-伊红染色观察脑组织形态学变化采用苏木精-伊红染色观察大鼠脑组织的形态变化。同对照组比较，假手术组经苏木精-伊红染色未见明显神经元病理性损伤。模型组可见神经元细胞的胞体缩小，细胞核固缩，且染色质颜色加深，其结构不够清析，核仁消失，病变部位与周围组织界线清楚，中心区域神经细胞数量也明显减少。具体结果见图 3。
【参考文献】

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本文编号：2835121