骨髓间充质干细胞联合人参皂苷Rb1治疗脑出血小鼠的实验研究
本文关键词：骨髓间充质干细胞联合人参皂苷Rb1治疗脑出血小鼠的实验研究，，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的观察骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植联合人参皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1,GRb1)治疗的脑出血小鼠的神经行为学和脑出血灶及周边区细胞凋亡的变化,并探讨GRb1对脑外源性BMSCs分化的影响。方法以雄性C57BL/6小鼠注射胶原酶建立脑出血模型,将神经功能缺损评分(Neurological Severity Scores,NSS)高于8分者纳入后续实验,并将其随机分为BMSCs移植联合GRb1治疗组(BMSCs+GRb1组)、BMSCs移植组(BMSCs组)、GRb1治疗组(GRb1组)和模型对照组(MC组),每组12只。术后第三天分别给予BMSCs脑内移植联合GRb1腹腔注射、BMSCs脑内移植、GRb1腹腔注射,MC组小鼠不作处理;又根据处死时间的不同,每组小鼠又分成14d和28d两个亚组,每个亚组6只。采用NSS评分观察各组小鼠治疗后1d、3d、7d、14d和28d时的神经功能缺损情况,并将评分作统计学分析。各组在相应时间点取脑制成冰冻切片,HE染色观察各组脑组织的形态学变化,Hoechest33258染色观察出血灶周边细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测外源性BMSCs表达MAP2、GFAP及NESTIN的情况,将统计结果进行分析。结果1.神经行为学评分:BMSCs+GRb1组和BMSCs组均比mc组在1d、3d、7d和14d时评分降低(p㩳0.05),grb1组仅比mc组在1d和3d时评分降低(p㩳0.05);bmscs+grb1组比bmscs组和grb1组在1d、3d、7d和14d时评分更低(p㩳0.05),bmscs组比grb1组在3d、7d和14d时评分降低(p㩳0.05)。2.he染色:各治疗组在相同时间点对比出血灶组织结构修复程度均优于mc组,其中bmscs+grb1组的组织结构修复程度最好。各组内比较,28d组组织修复程度优于14d组。3.hoechest33258染色:bmscs+grb1组和bmscs组的出血灶周边细胞凋亡数目在14d和28d时均比mc组降低(p㩳0.05),grb1组比mc组在14d时降低(p㩳0.05);bmscs+grb1组比bmscs组在14d和28d时降低(p㩳0.05),bmscs组比grb1组仅在28d时降低(p㩳0.05)。4.免疫荧光:1.出血灶周边外源性bmscs表达gfap情况:bmscs+grb1组bmscs表达gfap的阳性率在14d和28d时高于bmscs组(p㩳0.05),bmscs+grb1组和bmscs的gfap阳性率在28d时均高于14d。2.出血灶周边外源性bmscs表达map2情况:bmscs+grb1组和bmscs组表达map2阳性细胞率随时间延长呈上升趋势,bmscs+grb1组比bmscs组在14d和28d时增多(p㩳0.05)。3.出血灶周边外源性bmscs表达nestin情况:bmscs+grb1组和bmscs组表达nestin阳性率随时间延长呈下降趋势,bmscs+grb1组比bmscs组在14d和28d时增多(p㩳0.05)。4.结论1.bmscs移植联合人参皂苷rb1比单纯bmscs移植和人参皂苷rb1治疗更能够促进脑出血后神经功能恢复。2.bmscs移植和人参皂苷Rb1治疗均有利于受损脑组织的结构修复和抑制出血灶周边细胞凋亡,两者联合治疗效果更佳。3.人参皂苷Rb1可以促进BMSCs在脑内向神经胶质细胞和神经元分化,同时有利于BMSCs向神经干细胞转化。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 人参皂苷Rb1 脑出血 胶质纤维酸性蛋白 微管相关蛋白-2 巢蛋白 小鼠
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.34
【目录】：
- 摘要4-7
- Abstract7-11
- 前言11-14
- 材料和方法14-25
- 结果25-42
- 讨论42-53
- 结论53-54
- 参考文献54-59
- 英汉缩略词对照表59-60
- 致谢60-61
- 综述（神经干细胞移植治疗脑出血的现状研究）61-71
- 参考文献68-71
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