Pannexin-1参与三叉神经痛的调控

发布时间：2020-10-26 04:14

　　 目的通过对大鼠行眶下神经结扎术构建三叉神经痛动物模型,注射缝隙连接蛋白1(Pannexin-1,Panx 1)特异性si RNA阻断三叉神经节中Panx 1的表达,采用Von Frey hairs测痛法,Western blot和q RT-PCR检测Panx 1在三叉神经节中的表达及其在三叉神经痛中的作用。方法对雄性SD大鼠行左侧眶下神经慢性缩窄术(ION-CCI)建立三叉神经痛大鼠模型(ION-CCI组),并建立假手术组,即仅暴露眶下神经但不行结扎术。用Von Frey hairs纤维丝对两组大鼠左侧触须垫的机械刺激阈值进行检测,验证三叉神经痛大鼠模型是否建立成功。然后将ION-CCI大鼠随机分为两组,CCI+Panx1-si RNA组:对ION-CCI大鼠术侧经眶下孔达三叉神经节区域局部注射Panx 1特异性si RNA;CCI+Ctl-si RNA组:对ION-CCI大鼠术侧经眶下孔达三叉神经节区域局部注射阴性对照si RNA。采用q RT-PCR比较两组大鼠术侧三叉神经节中Panx 1m RNA的表达量,采用Western blot比较两组大鼠术侧三叉神经节中Panx 1蛋白质的表达量。通过Von Frey hairs行为学检测比较两组大鼠机械刺激疼痛阈值。结果1.Von Frey hairs行为学检测显示ION-CCI大鼠术侧触须垫区域的机械刺激疼痛阈值明显低于假手术组,表明三叉神经痛大鼠模型构建成功。2.q RT-PCR和Western blot的结果均表明CCI+Panx 1-si RNA组大鼠术侧三叉神经节中Panx 1表达量明显低于CCI+Ctl-si RNA组。表明Panx特异性si RNA有效抑制了三叉神经节中Panx 1的表达。3.Von Frey hairs行为学检测显示CCI+Panx 1-si RNA组大鼠机械刺激阈值显著高于CCI+Ctl-si RNA组大鼠。结论通过眶下神经慢性压迫损失建立三叉神经痛大鼠模型,抑制三叉神经节中Panx 1表达可以缓解三叉神经痛的痛敏反应。
【学位单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R745.11
【部分图文】：

值达到最低（sham组：1.38 g± 0.18 g，ION-CCI组：0.22 g ± 0.14 g，n =8，P < 0.001）。ION-CCI组大鼠术侧机械刺激疼痛超敏反应一直持续到术后第7周。Sham组大鼠从术后第1天至第7周内的术侧机械刺激疼痛阈值无明显变化（P > 0.05）。见图1。

安徽医科大学硕士学位论文23图2：CCI + Ctl-siRNA组和CCI + Panx 1-siRNA组大鼠三叉神经节内Panx 1 mRNA的相对表达（n = 4，与CCI + Ctl-siRNA组大鼠相比，**P < 0.01）Fig 2: Relative expression of Panx 1 mRNA in the trigeminal ganglion in CCI + Ctl-siRNA and CCI +Panx 1-siRNA rats（n = 4，**P < 0.01 vs the CCI + Ctl-siRNA group）3.3 大鼠三叉神经节中Panx 1蛋白表达量持续注射 siRNA 后第 4 天将各组大鼠麻醉并处死，取出左侧三叉神经节通过Western blot 检测 Panx 1 的蛋白表达水平。Western blot 结果显示，CCI + Panx1-siRNA 组大鼠三叉神经节中 Panx 1 蛋白表达量低于 CCI + Ctl-siRNA 组（n = 4， P <0.05）。通过 qRT-PCR 和 Western blot 实验结果表明 Panx 1 特异性 siRNA 降低了ION-CCI 大鼠三叉神经节中的 Panx 1 的表达。见图 3。

安徽医科大学硕士学位论文24图3：CCI + Ctl-siRNA组和CCI + Panx 1-siRNA组大鼠三叉神经节内Panx 1蛋白的相对表达量（n =4，与CCI + Ctl-siRNA组大鼠相比，* P < 0.05）Fig 3: Relative expression of Panx 1 protein in the trigeminal ganglion in CCI + Ctl-siRNA and CCI +Panx 1-siRNA rats.（n = 4，*P < 0.05 vs the CCI + Ctl-siRNA group）3.4 三叉神经节中Panx 1对大鼠机械疼痛超敏反应的影响通过 Von Frey hairs 纤维丝检测 ION-CCI 大鼠注射 siRNA 后的机械刺激疼痛阈值。结果显示，与 CCI + Ctl-siRNA 组相比，CCI + Panx 1-siRNA 组大鼠的机械刺激疼痛阈值显著增加，第四日差异最明显，CCI + Ctl-siRNA 组为 0.25 g± 0.18 g，CCI + Panx1-siRNA 为 1.05 g ± 0.26 g（n =8
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本文编号：2856474