雷帕霉素对幼年期皮质发育畸形大鼠脑发育的保护作用

发布时间：2020-10-27 08:16

　　 目的:探讨mTOR信号通路与X射线照射孕鼠后诱导的皮质发育畸形(malformation of cortical development,MCD)大鼠模型之间的相关性,以及其抑制剂雷帕霉素对MCD大鼠脑发育的保护作用及其可能机制。方法:1、将怀孕后SD大鼠随机分为正常组、模型组、溶剂组及雷帕霉素组,并于怀孕第16天开始连续每天既定时间按以上分组分别给予不同的相应预处理。其中,模型组、溶剂组及雷帕霉素组大鼠于怀孕第17天时使用195cGy剂量X射线照射孕鼠。然后待上述怀孕母鼠自然生产,其生产的第一代仔鼠(F1代)成为此次的实验对象,即为建立的MCD大鼠动物模型。2、随后每组子一代鼠分别于出生后当天、第一天、第二天、第三天、第十天(即P0、P1、P2、P3、P10)共5个时间点每天分别随机选取18只实验幼鼠,随即断头取出脑组织。3、每组每个时间点将其中6只脑组织立即予以4%多聚甲醛PBS液固定,固定完全后使用游标卡尺测量每只脑组织前后径、上下径、左右径大小并记录,根据测量结果分析脑组织体积大小的差异,随后将上述脑组织按一定比例进行病理切片,最后行HE染色及Nissl染色分析脑组织病理改变。4、将每组每个时间点剩下12只脑组织立即冻于﹣80℃冰箱,分别后续进行qPCR、Western blotting法检测幼鼠皮层组织S6蛋白表达变化。结果:1、脑组织大体标本经肉眼观察及游标卡尺测量结果可见,正常组幼鼠于各个观察时间点脑组织前后径以及除P0外其余时间点脑组织上下径均大于使用X射线照射后所产幼鼠(模型组、溶剂组、雷帕霉素组)径线,差异有统计学意义(均p0.05);而使用X射线照射后所产幼鼠脑组织各组之间差异无统计学意义(均p0.05)。但总体来说:模型组脑体积较正常组小,溶剂组与模型组相似,而雷帕霉素组较模型组体积大、趋于正常组。2、光学显微镜观察到正常组幼鼠脑组织皮层及皮层下分层清楚,海马结构清晰,神经元排列整齐,无异常大小及形状神经元,胼胝体正常存在;模型组幼鼠脑组织皮层结构紊乱,胼胝体缺失,皮层、海马区出现异常神经元结节,神经元排列不均、极性紊乱等;溶剂组与模型组病理改变无明显变化;雷帕霉素组仍可见到上述改变,但较模型组及溶剂组病变少,趋向于正常组病理表现。3、qPCR结果提示模型组幼鼠检测的5个时间点S6 mRNA水平均高于正常组,差异有统计学意义(均p0.05);溶剂组与模型组幼鼠各个时间点S6 mRNA水平差异无统计学意义(均p0.05);而雷帕霉素组幼鼠S6 mRNA水平均低于模型组,仍稍高于正常组。4、Western blotting提示模型组幼鼠S6蛋白表达水平自P0开始即显示出明显高于正常组,差异有统计学意义(均p0.05);溶剂组与模型组S6蛋白表达水平差异无统计学意义(均p0.05);雷帕霉素组S6蛋白表达量均低于模型组,且高于正常组,差异有统计学意义(均p0.05)。结论:在实验条件下,1、195cGy剂量X射线照射孕17天母鼠后所产子一代可成功建立MCD模型结果,此方法操作简单,成功率高。2、该动物模型证实了mTOR信号通路与X射线照射孕鼠后诱导的MCD鼠之间具有密切相关性。3、雷帕霉素对幼年期MCD大鼠脑组织发育有一定程度的保护作用,其机制可能与雷帕霉素能抑制mTOR信号通路的异常激活,使MCD脑组织发育得到改善有关。
【学位单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R741
【部分图文】：

图 1. X 射线照射后孕鼠（模型组、溶剂组、雷帕霉素组）所产子一代脑组织在各个时间点各径线均小于正常组脑组织，模型组幼鼠脑组织在各个时间点各径线与溶剂组大小相差不大，雷帕霉素组幼鼠脑组织在各个时间点各径线均大于模型组及溶剂组，倾向于正常组。Figure 1. After X-ray irradiation, the brain tissue of the first generation of pregnant rats(model group, DMSO group, rapamycin group) at each time point diameter lines weresmaller than normal brain tissue, brain tissue of the model group of young rats at varioustime points the diameter of each line size is similar as the DMSO group, brain tissue ofrapamycin group at various time points of each diameter line is larger than the model groupand DMSO group, tend to the normal group.

、B、C、D 分别为正常组、模型组、溶剂组及雷帕霉素组幼鼠脑组织及溶剂组可见脑组织体积较正常组明显缩小，以大脑半球为主，四叠），模型组和溶剂组大小差异不明显，雷帕霉素组趋于正常组。 2A, B, C, D, respectively were the normal group, model group, DMSOycin group brain tissue gross specimen. Model group and DMSO group lume of brain tissue was significantly reduced compared with the no to the cerebral hemispheres, quad stack was significantly prominent (nce between the model group and DMSO solvent group was not obvious tends to normal group.ISSL 染色组各个时间点通过 NISSL 染色后于显微镜下可观察到正常

图 3 A1、B1、C1、D1 分别为正常组、模型组、溶剂组及雷帕霉素组幼鼠脑组织 Nissl染色（×40），箭头所示为胼胝体，模型组及溶剂组可见明显胼胝体缺失。Figure 3 A1, B1, C1, D1 were the Nissl staining of brain tissue of normal group, modelgroup, DMSO group and rapamycin group(×40), the arrow showed the corpus callosum,model group and DMSO group showed the callosum corpus obvious loss.图 3 A2、B2、C2、D2 分别为正常组、模型组、溶剂组及雷帕霉素组幼鼠脑组织皮层Nissl 染色（×100），可见正常组及雷帕霉素组幼鼠脑组织皮层各层神经元分布规律、分层清楚、灰白质分界清晰、无神经元异常聚集；模型组及溶剂组幼鼠脑组织皮层各层分布不均、灰白质分界不清、且有异常结节形成（箭头所示）。
【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 徐华丽;;抑郁模型大鼠海马与脑血管变化的动态研究[J];影像视觉;2016年Z3期

2 邹海峰;赵春玲;陈燕;王西霞;竹梅;;慢性阻塞性肺疾病大鼠肺牵张反射对心率的影响[J];西部医学;2007年01期

3 任继山;;模型组转换算法在机动目标跟踪中的应用[J];上海航天;2007年05期

4 张文杰;龙飞;刘霞;王韶;;基于最小模型组最优模型扩展的机动目标跟踪方法[J];现代雷达;2015年03期

5 任继山;;模型组转换算法在工程应用中的改进研究[J];现代雷达;2007年03期

6 王华;陈锐;周全红;江伟;;背根神经节8型代谢型谷氨酸受体对神经病理性疼痛的影响[J];上海医学;2013年06期

7 田光晶;马丛丛;许继取;;动脉粥样硬化动物模型筛选[J];中国食品卫生杂志;2017年01期

8 贲莹;张凤华;梁文杰;张冬;方倩;;丙戊酸抑制大鼠实验性自身免疫性神经炎机制研究[J];解放军医药杂志;2013年02期

9 张玉明;孙君军;刘伟峰;戚世芳;常永超;;内脏大神经切断对犬急性坏死性胰腺炎的治疗作用[J];中国普通外科杂志;2013年03期

10 王海明;;参与教学:编外学员的追梦[J];新课程(综合版);2015年05期

相关博士学位论文 前10条

1 张清仲;补肾解毒方治疗猴艾滋病模型疗效及对胃肠道粘膜天然免疫影响的研究[D];广州中医药大学;2013年

2 王长江;培元固本健脑法对元气亏虚大鼠肾、脑的影响及机制研究[D];湖北中医药大学;2019年

3 石咏梅;基于内质网应激探讨脑泰方对局灶性脑缺血的干预作用及其可能机制[D];湖南中医药大学;2017年

4 魏大能;针灸对UC模型小鼠焦虑情绪的改善作用及其与肠道菌群的关系研究[D];成都中医药大学;2017年

5 景伟超;抗支糖浆对CVA豚鼠模型Th17/Treg失衡的免疫调节机制研究[D];黑龙江中医药大学;2018年

6 卢战军;IL-35在DSS诱导IBD小鼠模型中的表达和分子机制的研究[D];南京医科大学;2018年

7 伊丽萦;效阈浓度下中药多成分的生物效应模式[D];北京中医药大学;2005年

8 马鲁波;气血并治方干预周围动脉粥样硬化介入术后血流灌注的研究[D];中国中医科学院;2006年

9 乌日图那顺;蒙药“伊赫汤”对酒精性脂肪肝作用机理的实验研究[D];北京中医药大学;2015年

10 孟达理;麻黄多糖治疗自身免疫性甲状腺炎的实验研究[D];南京中医药大学;2007年

相关硕士学位论文 前10条

1 刘宁;胆炎康片对于胆囊炎、胆石症模型动物的实验研究[D];吉林大学;2019年

2 关宁宁;牡丹花蕊醇提物的生物活性研究[D];河南科技大学;2019年

3 张海虹;基于黄疸和TK-TD模型的栀子肝毒性“量—时—毒”关系及体内毒性物质基础研究[D];山西中医药大学;2019年

4 马丙钧;灵芝酸A对急性酒精性肝损伤小鼠的保护作用及机制研究[D];郑州大学;2019年

5 王丹丹;P2X7嘌呤受体在肥大细胞依赖性结肠炎中的作用及机制研究[D];郑州大学;2019年

6 骆雍阳;电针对SAMP8小鼠Reelin信号影响的研究[D];福建中医药大学;2019年

7 杨静;栀子醒酒饮品醒酒、护肝及对记忆影响研究[D];西南医科大学;2019年

8 韦云妮;藿夏胶囊体内外抗肿瘤的作用研究[D];广西医科大学;2018年

9 侯荔桉;失荅剌知丸对大鼠局灶性脑缺血再灌注模型海马区ERK2表达的影响[D];宁夏医科大学;2019年

10 阿合尔扎马尼·麦麦提;干寒环境及饮食对大鼠体内代谢的影响[D];新疆医科大学;2019年

本文编号：2858293