PTEN-Long对胶质瘤细胞生物学活性的影响

发布时间：2020-12-04 00:26

　　目的:PTEN-Long是第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因（phosohatase and tensin homolgue deleted on chromosome 10,PTEN）的翻译变体,探索PTEN-Long对胶质瘤细胞U251增殖、迁移、侵袭的影响及相关分子机制,并分析PTEN-Long在体内水平对胶质细胞瘤的影响。方法:1.将携带PTEN-Long基因的重组慢病毒载体转染人胶质瘤细胞U251,未感染慢病毒的细胞为对照组（U251）;感染LV-EGFP的细胞为空载组（U251-EGFP）;感染LV-PTEN-Long-EGFP的细胞为过表达组（U251-PTEN-Long-EGFP）。通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达情况,并应用RT-PCR、Western blot法检测转染效率。2.应用CCK8法检测PTEN-Long过表达后对各组细胞增殖能力的影响。通过流式细胞分析术检测各组的细胞周期差异。3.通过划痕实验检测PTEN-Long过表达后对各组细胞迁移能力的影响,并通过Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力。4.通过RT-PCR、Western bl... 

【文章来源】：河北大学河北省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

（A）U251细胞系光镜表达

（a）Western blot 法检测转染前后 PTEN-Long 蛋白表达情况，高于对照组。（b）统计分析各组目的蛋白/β-Actin，过表达组蛋对照组。（c）通过 2 △△Ct法分析细胞中 PTEN-Long 的 mRNA 达量明显高于对照组。n=3，**P﹤0.01，***P﹤0.001。EN-Long 抑制人胶质瘤细胞 U251 增殖能力CK-8 法检测不同时间点（0H、24H、48H、72H）的 OD 值，与过表达组细胞增殖能力降低（F=18.42，P﹤0.01；F=79.92，P﹤0.0见图 1-3、表 1-2）。通过流式细胞仪检测各组细胞周期情况，周期被阻滞在 G0/G1 期（F=26.32，P﹤0.01）（见图 1-4）。

法检测 PTEN-Long 过表达后对细胞增殖的抑制作用。n=表 1-2 PTEN-Long 对 U251 细胞增殖的影响roups nOD0h 24h 48h 72hU251 3 0.58 1.59±0.09 2.29±0.08 2.76±0.1EFP 3 0.58 1.60±0.11 2.14±0.09 2.61±0.1TEN-L 3 0.58 1.21±0.14**1.58±0.11**1.08±0.0﹤0.01


本文编号：2896710