电针调控OTULIN表达对局灶脑缺血/再灌注大鼠神经炎症的影响及机制研究

发布时间：2020-12-04 22:40

　　第一部分OTULIN对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内小胶质细胞活化和神经炎症的影响及机制研究目的1.研究OTULIN在局灶脑缺血/再灌注大鼠大脑皮质缺血旁组织内表达的时间规律;2.探索OTULIN过表达对局灶脑缺血/再灌注大鼠是否具有神经保护作用;3.探索OTULIN对局灶脑缺血/再灌注大鼠神经炎症反应的调控作用及机制;4.探索OTULIN对小胶质细胞介导的神经炎症反应的影响及机制。方法1.SD大鼠随机分为假手术（Sham）组和模型（tMCAO）组,再灌注后6 h至72 h,采用实时定量多聚酶联反应（RT-qPCR）和免疫印迹（Western Blot）分别检测大鼠大脑皮质缺血旁组织内OTULIN mRNA和蛋白质含量。再灌注后72 h,免疫荧光观察Sham组和tMCAO组大鼠大脑皮质缺血旁组织内小胶质细胞标记物Iba-1与OTULIN蛋白共染情况。2.侧脑室转染OTULIN过表达慢病毒（LV-OTULIN）,空载慢病毒（LV-Scramble）作为对照。大鼠随机分为假手术（Sham）组、模型（tMCAO）组、模型+LV-Scramble（tMCAO+LV-Scramble）组和模型+LV... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

局灶脑缺血/再灌注损伤诱导SD大鼠脑内OTULINmRNA和蛋白表达增多Fig.1.1Focalcerebralischemia/reperfusioninducedOTULINmRNAandproteinexpression.（A）脑冠状位切片（TTC染色）：*代表梗死区，□代表大脑皮质缺血旁组织

结果提示 LV-OTULIN 可有效促进大鼠大脑皮质 OTULIN mRNA（图 1.2A）和蛋白（图1.2B-C）表达（P<0.001）。接下来，我们进一步验证侧脑室转染 LV-OTULIN 对 tMCAO 大鼠大脑皮质OTULIN 表达的影响。LV-OTULIN 及 LV-Scramble 侧脑室转染后第 7 d，大鼠随机分 为 假 手 术 （ Sham ） 组 、 模 型 （ tMCAO ） 组 、 模 型 +LV-Scramble（tMCAO+LV-Scramble）组和模型+LV-OTULIN（tMCAO+LV-OTULIN）组，于再灌注后 72 h 采用 RT-qPCR 和 Western Blot 检测 OTULIN mRNA 及蛋白含量。结果表明tMCAO +LV-OTULIN组大脑皮质OTULIN mRNA和蛋白表达较tMCAO组及tMCAO+LV-Scramble 组 均 显 著 上 调 （ P<0.001 ）， 而 tMCAO 组 和tMCAO+LV-Scramble 组 OTULIN mRNA 和蛋白含量无明显差异（P>0.05）。

54图 1.3 OTULIN 过表达对局灶脑缺血/再灌注大鼠具有神经保护作用Fig. 1.3 OTULIN overexpression exerted neuroprotective effects in focal cerebralischemia/reperfusion rats.（A）各组大鼠 Longa 评分（n=6）。（B）各组大鼠 Garcia 评分（n=6）。（C）各组大鼠 Bederson评分（n=6）。（D）TTC 染色检测各组大鼠脑梗死体积。（E）柱状图显示各组大鼠脑梗死体积统计分析结果（n=5）。（E）免疫荧光共聚焦显示各组大鼠大脑皮质缺血旁组织内 NueN+和


本文编号：2898353