胶质瘤中miRNA-147启动子区甲基化及甲基化逆转研究
发布时间：2020-12-20 21:37
目的:1、收集临床45例WHO分级不同的脑胶质瘤患者肿瘤标本并使用甲基化特异性PCR法（MSP法）检测miR-147启动子区是否发生甲基化及其与临床病理特征的关系。2、使用不同浓度的5’aza-dC培养液培养胶质瘤细胞U87细胞,通过亚硫酸氢盐修饰后PCR法（BSP法）明确各组中miR-147启动子区甲基化程度及细胞增殖状态。3、明确miR-147启动子区甲基化程度是否与细胞增殖有关。方法:第一部分:使用MSP法检测收集到的胶质瘤患者标本中miR-147启动子区甲基化水平,并进行统计学分析。第二部分:配制不同浓度5’aza-dC（0umol/L、4umol/L及16umol/L）培养液培养U87细胞,将0umol/L组作为空白组,其余2组为实验组。培养24h后使用BSP法检测各组中miR-147启动子区甲基化水平并计算每组甲基化率,培养72h后观察细胞增殖状态,并记录细胞数目。第三部分:计算实验组的细胞受抑制程度。结果:1、使用MSP法对45例不同分级的胶质瘤标本进行miR-147启动子区甲基化检测,发现共有30例胶质瘤组织标本miR-147启动子区存在甲基化,甲基化与胶质瘤患者的性别...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因序列B:修饰后模式序列
图 4 测序结果7 测序后不同分组中 miR-147 启动子区甲基化率（见图 5）本次检测序列长度为 198bp，共发现 9 个 CG 位点，以下为每个 CG 位点甲基化果。其中空白组发生甲基化的位点有 5 个，第 1、2、4、5 以及第 9 位点，甲基化分别为 100%、40%、40%、20%、60%；4umol/L 组发生甲基化的位点有 3 个，分别第 1、2、4 位点，甲 基化率分别为 100%、40%、20%；16umol 组发生甲基化的位有 2 个，分别是第 1、4 位点，甲基化率分别为 40%、20%。总甲基化率为：空白为 14.6%，4umol/L 组为 8.9%，16umol/L 组为 3.4%。
图 3 电泳结果2.6 测序结果（见图 4）发生甲基化的 CG 位点保持不变，未发生甲基化的 CG 位点 C 碱基则变为 T 图 4 测序结果2.7 测序后不同分组中 miR-147 启动子区甲基化率（见图 5）本次检测序列长度为 198bp，共发现 9 个 CG 位点，以下为每个 CG 位点甲结果。其中空白组发生甲基化的位点有 5 个，第 1、2、4、5 以及第 9 位点，甲率分别为 100%、40%、40%、20%、60%；4umol/L 组发生甲基化的位点有 3 个，
【参考文献】：
期刊论文
[1]p53和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能影响实验研究[J]. 卞春安,蒋琰华,陆世民,许林,李忠佑. 中华肿瘤防治杂志. 2018(05)
[2]p16基因甲基化与胃黏膜异型增生恶性转化的关系[J]. 高哈尔,张阳,周静,李哲轩,马峻岭,刘卫东,邓大君,游伟程,潘凯枫. 中华肿瘤防治杂志. 2017(07)
[3]DNA去甲基化药物作用机制的研究进展[J]. 许嵘,张文州,陈琳琳,丁小明,谢志新,林阳君,辛军. 现代药物与临床. 2017(01)
[4]50余种miRNA在神经胶质瘤中的表达水平及作用靶点[J]. 刘太奇,陈思羽,李文德,黄韧. 中国比较医学杂志. 2016(07)
[5]MicroRNA与神经胶质瘤血管生成及替莫唑胺化疗耐药关系的研究进展[J]. 毛小元,周宏灏,刘昭前. 中国生化药物杂志. 2016(03)
[6]TET家族蛋白在神经胶质瘤中的研究进展[J]. 何光旭,李仙锋. 医学综述. 2016(05)
[7]胶质瘤中甲基化沉默肿瘤抑制因子的研究进展[J]. 涂艳阳,徐晓珊,张永生,成迎端. 转化医学电子杂志. 2016(02)
[8]慢性髓系白血病miR-378甲基化研究[J]. 吴得红,杨静,杨磊,闻向梅,郭竑,姚冬明,林江,张盈盈,张铭,邓兆群,钱军. 中国实验血液学杂志. 2016(01)
[9]脑胶质瘤相关基因的DNA甲基化及其意义[J]. 闫晓光,化定超,郭庚,鲁晨阳. 国际肿瘤学杂志. 2015 (10)
[10]脑胶质瘤癌组织与外周血中p16甲基化检测及临床意义[J]. 邓鹏程,徐培坤,朱立新,王斌,杨成子. 安徽医科大学学报. 2015(02)
硕士论文
[1]MGMT基因启动子甲基化在脑胶质瘤发生中的作用[D]. 艾嗣锦.南昌大学医学院 2015
[2]胶质瘤中p16基因甲基化及甲基化逆转研究[D]. 邓鹏程.安徽医科大学 2015
[3]小鼠体外受精胚与体内胚Oct4基因启动子区DNA甲基化差异的研究[D]. 储成风.安徽农业大学 2007
本文编号：2928590
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：40 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因序列B:修饰后模式序列
图 4 测序结果7 测序后不同分组中 miR-147 启动子区甲基化率（见图 5）本次检测序列长度为 198bp，共发现 9 个 CG 位点，以下为每个 CG 位点甲基化果。其中空白组发生甲基化的位点有 5 个，第 1、2、4、5 以及第 9 位点，甲基化分别为 100%、40%、40%、20%、60%；4umol/L 组发生甲基化的位点有 3 个，分别第 1、2、4 位点，甲 基化率分别为 100%、40%、20%；16umol 组发生甲基化的位有 2 个，分别是第 1、4 位点，甲基化率分别为 40%、20%。总甲基化率为：空白为 14.6%，4umol/L 组为 8.9%，16umol/L 组为 3.4%。
图 3 电泳结果2.6 测序结果（见图 4）发生甲基化的 CG 位点保持不变，未发生甲基化的 CG 位点 C 碱基则变为 T 图 4 测序结果2.7 测序后不同分组中 miR-147 启动子区甲基化率（见图 5）本次检测序列长度为 198bp，共发现 9 个 CG 位点，以下为每个 CG 位点甲结果。其中空白组发生甲基化的位点有 5 个，第 1、2、4、5 以及第 9 位点，甲率分别为 100%、40%、40%、20%、60%；4umol/L 组发生甲基化的位点有 3 个，
【参考文献】：
期刊论文
[1]p53和p16基因过表达对人肺腺癌细胞株H1299生物学功能影响实验研究[J]. 卞春安,蒋琰华,陆世民,许林,李忠佑. 中华肿瘤防治杂志. 2018(05)
[2]p16基因甲基化与胃黏膜异型增生恶性转化的关系[J]. 高哈尔,张阳,周静,李哲轩,马峻岭,刘卫东,邓大君,游伟程,潘凯枫. 中华肿瘤防治杂志. 2017(07)
[3]DNA去甲基化药物作用机制的研究进展[J]. 许嵘,张文州,陈琳琳,丁小明,谢志新,林阳君,辛军. 现代药物与临床. 2017(01)
[4]50余种miRNA在神经胶质瘤中的表达水平及作用靶点[J]. 刘太奇,陈思羽,李文德,黄韧. 中国比较医学杂志. 2016(07)
[5]MicroRNA与神经胶质瘤血管生成及替莫唑胺化疗耐药关系的研究进展[J]. 毛小元,周宏灏,刘昭前. 中国生化药物杂志. 2016(03)
[6]TET家族蛋白在神经胶质瘤中的研究进展[J]. 何光旭,李仙锋. 医学综述. 2016(05)
[7]胶质瘤中甲基化沉默肿瘤抑制因子的研究进展[J]. 涂艳阳,徐晓珊,张永生,成迎端. 转化医学电子杂志. 2016(02)
[8]慢性髓系白血病miR-378甲基化研究[J]. 吴得红,杨静,杨磊,闻向梅,郭竑,姚冬明,林江,张盈盈,张铭,邓兆群,钱军. 中国实验血液学杂志. 2016(01)
[9]脑胶质瘤相关基因的DNA甲基化及其意义[J]. 闫晓光,化定超,郭庚,鲁晨阳. 国际肿瘤学杂志. 2015 (10)
[10]脑胶质瘤癌组织与外周血中p16甲基化检测及临床意义[J]. 邓鹏程,徐培坤,朱立新,王斌,杨成子. 安徽医科大学学报. 2015(02)
硕士论文
[1]MGMT基因启动子甲基化在脑胶质瘤发生中的作用[D]. 艾嗣锦.南昌大学医学院 2015
[2]胶质瘤中p16基因甲基化及甲基化逆转研究[D]. 邓鹏程.安徽医科大学 2015
[3]小鼠体外受精胚与体内胚Oct4基因启动子区DNA甲基化差异的研究[D]. 储成风.安徽农业大学 2007
本文编号：2928590
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