下调CENP-E基因表达对泛素蛋白酶抑制剂lactacystin诱导PC12细胞凋亡影响

发布时间：2021-01-14 13:10

　　第一部分RNA干扰技术对PC12细胞CENP-E基因表达影响观察1、目的：建立干扰CENP-E基因表达的质粒载体，转染PC12细胞，观察CENP-E的表达。2、方法：人工合成PShRNA-CENP-E质粒1、2、3，将3种质粒，与对照组空载体质粒以脂质体转染法共同转染PC12细胞，在转染24小时后用荧光显微镜评价转染的效率。然后用Western bloting、免疫组化评价细胞内CENP-E表达变化。3、结果：成功合成的3种PShRNA-CENP-E质粒，转染PC12细胞的成功率约为72.5%，Western Bloting和免疫组化示：质粒3转染后，细胞内CENP-E的表达水平下降。4、结论：PShRNA-CENP-E质粒3能特异性降低PC12细胞中CENP-E表达。第二部分NGF诱导PC12细胞神经元样分化及lactacystin诱导下建立帕金森细胞模型1、目的：诱导PC12长出突触呈神经元样化，观察不同浓度lactacystin诱导PC12细胞凋亡情况，选择最适合浓度构建PD细胞模型。2、方法：培养PC12细胞，传代后，加入终浓度为50μg/L的神经生长因子（NGF）培养24小时... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中英文缩略词对照表
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第二部分
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
第三部分
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
参考文献
综述
    参考文献
在读硕士期间发表论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]CENP-E变异体在不同肿瘤细胞株及癌组织中的表达差异[J]. 闫琛,凌康,刘子杰,翁亚光.  中国生物制品学杂志. 2010(07)
[2]CENP-E基因表达下调可增强宫颈癌细胞对紫杉醇的敏感性[J]. 李素彦,翁亚光,蔡燕.  肿瘤. 2009(02)
[3]蛋白酶体抑制剂诱导多巴胺能神经元重启细胞周期的作用及机制[J]. 张振涛,曹学兵,孙圣刚,王岚,徐丽,徐岩.  卒中与神经疾病. 2006(03)
[4]Progress and perspective of the kinetochore-associated motor proteins[J]. LIU Dan, JIN Changjiang & YAO Xuebiao Institute of Cell Dynamics, University of Science and Technology of China, Hefei 230027, China Correspondence should be addressed to Yao Xuebiao (e-mail: yaoxb@ustc.edu.cn).  Chinese Science Bulletin. 2003(02)



本文编号：2976919