CD4 + CD25 + Treg在大鼠EAE免疫耐受机制中作用的研究

发布时间：2021-01-17 22:35

　　目的：本研究观察经鼻腔连续多次给予大鼠小剂量髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein, MBP）多肽段MBP68-86,对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）发生发展的影响,通过检测脾脏CD4+CD25+调节性T细胞（Regulatory T cell,Treg）在CD4+T细胞中的比例、螺旋转录因子Foxp3mRNA表达水平、细胞因子白介素（IL）-17A、转化生长因子（TGF）-β1含量,探讨Treg在MBP68-86经鼻黏膜诱导的大鼠EAE免疫耐受机制中的作用。为探索多发性硬化（Multiple sclerosis, MS）新的治疗方法提供有意义的基础实验依据。方法：将30只6-8周龄雌性Wistar大鼠随机分为3组,设耐受组、免疫对照组、空白对照组,每组10只。耐受组大鼠经鼻腔给予0.5mg/ml浓度的MBP68₈660ul,免疫对照组予等量的PBS,每日1次,连续10天,空白对照组未予任何处理,末次给予MBP68-86后第2天,两组大鼠均足垫注射200μgM... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
符号说明
1 前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料和仪器
        2.1.1 实验动物的喂养
        2.1.2 免疫原制作
        2.1.3 仪器
        2.1.4 主要试剂与药品
    2.2 实验方法
        2.2.1 制作免疫抗原
        2.2.2 MBP68-86免疫耐受模型的诱导
        2.2.3 免疫刺激
        2.2.4 动物模型评价
        2.2.5 组织取材与病变观察
        2.2.6 脾淋巴细胞悬液制备
+CD25⁺Tregs水平">        2.2.7 流式细胞仪检测脾淋巴细胞中CD4⁺CD25⁺Tregs水平
        2.2.8 脾细胞悬液中Treg标志物Foxp3mRNA水平检测
        2.2.9 ELISA法检测三组大鼠脾淋巴细胞上清液TGF-β1、IL-17A水平
    2.3 统计学分析
3 结果
    3.1 症状观察及神经功能评分
    3.2 病理学改变
    3.3 CD4+CD25+Treg/CD4+T比例
    3.4 Foxp3 mRNA表达量
    3.5 IL-17A、TGF-β1 含量
4 讨论
    4.1 黏膜耐受模型评价
    4.2 调节性T细胞数量及功能变化
    4.3 调节性T细胞临床应用前景
    4.4 不足与展望
5 结论
参考文献
附图
综述
    参考文献
在读期间发表论文
致谢



本文编号：2983717