大鼠脑缺血再灌注损伤中自噬的作用及丁苯酞干预对自噬的影响
发布时间：2021-01-18 06:50
目的:通过建立大鼠脑缺血再灌注模型,研究自噬在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用;探讨自噬在不同时间点的动态变化;探讨丁苯酞注射液（butyphthalide injection,NBP）对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响。方法:选取清洁级别雄性SD（Sprague Dawley）大鼠64只,体重250-300g,随机分为4组,分别为假手术组（sham组）、模型组（I/R组）、丁苯酞组（NBP组）、自噬抑制剂组（3-MA组）,每组16只大鼠,将每组分成2个时间段,即缺血再灌注后24h组及72h组（每组8只）,除sham组外,I/R组、NBP组及3-MA组采用改良线栓法制作大脑中动脉阻塞2h模型,NBP组于缺血同时予以腹腔注射丁苯酞注射液（6mg/kg/天,每天2次）,其中72h组连续注射三天;3-MA组于术前半小时腹腔注射3-MA（10mg/kg）;取3个时间点即再灌注后2h、再灌注后24h和再灌注后72h,进行神经功能评分;取2个时间点,即缺血再灌注后24h和72h后取材,采用TTC（2,3,5-triphenyltetrazolium chloride）染色法检测各组大鼠各时间点...
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脑梗死模型制作
造模成功后出现honer征
硕士学位论文10图2-3：提尾悬挂时不能完全伸展图2-4:心脏灌注后取出的脑组织左侧前肢2.2.5TTC染色测脑梗死体积每组于再灌注后24h和再灌注后72h分别取3只大鼠处死，断头，小心剥出完整的脑组织置于-20℃冰箱中冰冻20分钟，随即取出，在冰块上切除额极，自视交叉水平处行冠状位切片，每片厚度约2mm，共切成5片。立即放入2%TTC染液中，37℃恒温箱避光孵育30分钟，期间使用镊子轻柔翻动，使脑组织染色均匀。将已染色好的脑组织置入固定液中（4%多聚甲醛），24小时后数码相机拍照。染色呈红色为正常脑组织，染色呈白色为梗死脑组织。将图像导入ImageProPlus6.0计算脑梗死体积比。2.2.6HE染色观察脑组织神经细胞形态（1）新鲜标本取材每组大鼠分别于缺血再灌注后24h和72h大鼠处死取新鲜脑组织，用已消毒刀片切病灶侧脑组织标本，置入固定液中（4%多聚甲醛）固定。（2）水洗、脱水、透明固定后水洗15min。进行酒精梯度脱水，浓度及时间分别为75%50min、85%50min、95%20min、95%20min、100%20min、100%20min。用二甲苯透明，2道，各30min。（3）浸蜡、包埋
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy: novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Ya-Guang Huang,Wei Tao,Song-Bai Yang,Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2019(06)
[2]黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响[J]. 李媛,靳晓飞,周晓红,高维娟. 中国病理生理杂志. 2018(11)
[3]我国脑卒中流行现状及危险因素研究进展[J]. 张冬月,韩薇. 世界最新医学信息文摘. 2018(80)
[4]Puerarin protects rat brain against ischemia/reperfusion injury by suppressing autophagy via the AMPK-mT OR-ULK1 signaling pathway[J]. Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Yang Fu,Song-Bai Yang,Shi-Zhong Zhang,Wei-Feng Huang,Li Xiong,Hua-Jun Zhou,Wei Tao,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2018(06)
[5]脑缺血和缺血再灌注大鼠皮层神经元自噬的动态变化[J]. 陶红苗,单小云,李旭升,陈浩浩,毛宇飞,何忠平. 中国应用生理学杂志. 2018(03)
[6]中国60万人群脑血管病流行病学抽样调查报告[J]. 孙海欣,王文志. 中国现代神经疾病杂志. 2018(02)
[7]丁苯酞注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及机制[J]. 赵秀芹,毛文静,李世英,张晋霞,贺永贵,余红,刘斌. 中国康复理论与实践. 2016(01)
[8]大鼠脑缺血再灌注后自噬的变化及灯盏生脉胶囊干预的影响[J]. 陈兴泳,汪银洲,雷惠新,张旭. 中国康复理论与实践. 2015(07)
[9]制作线栓法大鼠脑缺血再灌注模型的要点及体会[J]. 何芳雁,韩春妮,李艳,林青. 实验动物科学. 2013(04)
[10]脑卒中动物模型的建立与比较[J]. 陈茉弦,敖丽娟,李琦,潘芳. 中国康复医学杂志. 2011(08)
本文编号：2984492
【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校
【文章页数】：62 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脑梗死模型制作
造模成功后出现honer征
硕士学位论文10图2-3：提尾悬挂时不能完全伸展图2-4:心脏灌注后取出的脑组织左侧前肢2.2.5TTC染色测脑梗死体积每组于再灌注后24h和再灌注后72h分别取3只大鼠处死，断头，小心剥出完整的脑组织置于-20℃冰箱中冰冻20分钟，随即取出，在冰块上切除额极，自视交叉水平处行冠状位切片，每片厚度约2mm，共切成5片。立即放入2%TTC染液中，37℃恒温箱避光孵育30分钟，期间使用镊子轻柔翻动，使脑组织染色均匀。将已染色好的脑组织置入固定液中（4%多聚甲醛），24小时后数码相机拍照。染色呈红色为正常脑组织，染色呈白色为梗死脑组织。将图像导入ImageProPlus6.0计算脑梗死体积比。2.2.6HE染色观察脑组织神经细胞形态（1）新鲜标本取材每组大鼠分别于缺血再灌注后24h和72h大鼠处死取新鲜脑组织，用已消毒刀片切病灶侧脑组织标本，置入固定液中（4%多聚甲醛）固定。（2）水洗、脱水、透明固定后水洗15min。进行酒精梯度脱水，浓度及时间分别为75%50min、85%50min、95%20min、95%20min、100%20min、100%20min。用二甲苯透明，2道，各30min。（3）浸蜡、包埋
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy: novel insights into therapeutic target of electroacupuncture against cerebral ischemia/reperfusion injury[J]. Ya-Guang Huang,Wei Tao,Song-Bai Yang,Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2019(06)
[2]黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响[J]. 李媛,靳晓飞,周晓红,高维娟. 中国病理生理杂志. 2018(11)
[3]我国脑卒中流行现状及危险因素研究进展[J]. 张冬月,韩薇. 世界最新医学信息文摘. 2018(80)
[4]Puerarin protects rat brain against ischemia/reperfusion injury by suppressing autophagy via the AMPK-mT OR-ULK1 signaling pathway[J]. Jin-Feng Wang,Zhi-Gang Mei,Yang Fu,Song-Bai Yang,Shi-Zhong Zhang,Wei-Feng Huang,Li Xiong,Hua-Jun Zhou,Wei Tao,Zhi-Tao Feng. Neural Regeneration Research. 2018(06)
[5]脑缺血和缺血再灌注大鼠皮层神经元自噬的动态变化[J]. 陶红苗,单小云,李旭升,陈浩浩,毛宇飞,何忠平. 中国应用生理学杂志. 2018(03)
[6]中国60万人群脑血管病流行病学抽样调查报告[J]. 孙海欣,王文志. 中国现代神经疾病杂志. 2018(02)
[7]丁苯酞注射液对局灶性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及机制[J]. 赵秀芹,毛文静,李世英,张晋霞,贺永贵,余红,刘斌. 中国康复理论与实践. 2016(01)
[8]大鼠脑缺血再灌注后自噬的变化及灯盏生脉胶囊干预的影响[J]. 陈兴泳,汪银洲,雷惠新,张旭. 中国康复理论与实践. 2015(07)
[9]制作线栓法大鼠脑缺血再灌注模型的要点及体会[J]. 何芳雁,韩春妮,李艳,林青. 实验动物科学. 2013(04)
[10]脑卒中动物模型的建立与比较[J]. 陈茉弦,敖丽娟,李琦,潘芳. 中国康复医学杂志. 2011(08)
本文编号：2984492
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