白藜芦醇对复发缺血性卒中大鼠的神经保护作用研究

发布时间：2021-01-27 11:50

　　研究目的缺血性卒中反复发作导致患者死亡率增加和残疾程度加重,而在第一次短暂性脑缺血发作或小卒中发作后给予神经保护剂可为反复卒中发作的治疗提供机会。白藜芦醇（resveratrol, RSV）对缺血性卒中是有效的神经保护剂,但其作用机制尚不清楚。RSV与沉默信息调节因子2相关酶1（silent information regulator T1,SIRT1）和腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPK）代谢应激元件有关,且参与细胞内能量代谢反应。本研究先制作两次发作大脑中动脉缺血大鼠模型（Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO）,再通过氧-葡萄糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）原代皮层神经元培养模型,建立体外反复缺血模型,观察RSV预处理大鼠体内、外脑缺血模型对SIRT1蛋白表达、AMPK表达和ATP含量的影响,研究白藜芦醇对大鼠体内、外反复缺血模型的神经保护作用,探讨其作用机制,从而为治疗反复发作缺血性卒中开发新的脑保护剂治疗提供帮助。方法成年18-20月龄雄性Wist... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：100 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
    本研究的主要方法
一、白藜芦醇对复发大鼠MCAO的神经保护作用
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验动物和分组
        1.1.2 主要仪器和设备
        1.1.3 主要试剂和耗材
        1.1.4 实验方法
        1.1.5 统计学方法
    1.2 结果
        1.2.1 大鼠体内白藜芦醇的生物利用度测定
        1.2.2 大鼠脑缺血模型血流量监测
        1.2.3 白藜芦醇对复发脑缺血大鼠行为学影响
        1.2.4 白藜芦醇对复发脑缺血大鼠脑梗死体积影响
        1.2.5 白藜芦醇对复发脑缺血大鼠脑组织SIRT1蛋白表达影响
        1.2.6 白藜芦醇对复发脑缺血大鼠脑组织AMPK磷酸化影响
        1.2.7 白藜芦醇对复发脑缺血大鼠脑组织ATP水平影响
    1.3 讨论
        1.3.1 大鼠复发MCAO模型
        1.3.2 白藜芦醇对复发MCAO脑缺血大鼠行为学和脑梗死体积影响
        1.3.3 白藜芦醇对复发MCAO大鼠缺血脑组织SIRT1表达影响
        1.3.4 白藜芦醇对复发MCAO大鼠缺血脑组织AMPK和ATP表达影响
    1.4 小结
二、白藜芦醇对复发OGD处理皮层神经元的保护作用
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要仪器设备
        2.1.3 主要试剂盒耗材
        2.1.4 主要实验方法
            2.1.4.1 主要试剂配制
            2.1.4.2 原代皮层神经元的培养
            2.1.4.3 原代皮层神经元的鉴定
            2.1.4.4 体外OGD皮层神经元的建立及分组干预
            2.1.4.5 细胞活性测定
            2.1.4.6 SIRT1去乙酰化活性测定和SIRT1蛋白的表达测定
            2.1.4.7 AMPK磷酸化和AMPK表达的测定
            2.1.4.8 ATP水平测定
            2.1.4.9 SIRT1和AMPK抑制剂对白藜芦醇的干扰
        2.1.5 统计学处理
    2.2 结果
        2.2.1 正常原代皮层神经元形态和NSE鉴定
        2.2.2 白藜芦醇对OGD神经元的保护作用
        2.2.3 白藜芦醇对OGD诱导神经元SIRT1活性和SIRT1蛋白表达影响
        2.2.4 白藜芦醇对OGD诱导神经元AMPK磷酸化和活性影响
        2.2.5 白藜芦醇对OGD诱导神经元ATP影响
        2.2.6 SIRT1和AMPK抑制剂对白藜芦醇神经保护作用的影响
    2.3 讨论
        2.3.1 白藜芦醇对OGD诱导神经元SIRT1活性和SIRTl蛋白表达影响
        2.3.2 白藜芦醇对OGD诱导神经元AMPK磷酸化和活性影响
        2.3.3 白藜芦醇对SIRTl和AMPK的相互影响
    2.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
    白藜芦醇对脑缺血保护作用实验研究进展
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]白藜芦醇新剂型研究进展[J]. 李万忠,田景振.  中国医药生物技术. 2011(02)
[2]白藜芦醇减轻脑缺血再灌注损伤及其机制[J]. 任俊伟,杨琴,范层层,陈娜.  第三军医大学学报. 2010(24)
[3]大鼠皮层神经元原代培养、鉴定及氧糖剥夺模型的建立[J]. 莽靖,李昕华,阎世军,何金婷,邢影,邵延坤,徐忠信.  中国老年学杂志. 2010(06)
[4]大鼠脑缺血再灌注模型的建立[J]. 先雄斌,杨朝鲜.  中国老年学杂志. 2009(19)
[5]一种改进的高密度大鼠皮层神经元培养方法[J]. 康国创,刘文博,尹丽鹤,费舟.  中华神经外科疾病研究杂志. 2009(05)
[6]脑卒中患者复发及其影响因素研究[J]. 冯社军,刘鸣,李卫征,李伟,张世洪.  南方医科大学学报. 2009(05)
[7]白藜芦醇对大鼠腔隙性脑梗死模型急性期的脑保护作用[J]. 刘茅茅,王拥军,李小玲,梁宪红,梁德军.  郑州大学学报(医学版). 2003(05)
[8]白藜芦醇对实验性脑缺血的保护作用[J]. 王拥军,何芳,李小玲.  中华医学杂志. 2003(07)



本文编号：3002999