糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖抗痫作用机制研究
发布时间：2021-02-01 10:40
2-DG抗痫作用的评价目的：探讨2-DG抗痫作用的疗效。方法：6-8周成年雄性C57BL/6小鼠进行随机分配为对照组、致痫组、2-DG干预组,建立匹罗卡品致痫模型。对不同组行为学的变化进行监测,观察其自发性痫性发作的癫痫潜伏期、癫痫评分、痫性发作持续时间,同时观察不同组脑电图的变化。结果：1.对不同组（对照组、致痫组、2-DG干预组）行为学监测显示：与对照组相比,匹罗卡品致痫后,致痫组、2-DG干预组41.5%的C57BL/6小鼠存在自发性痫性发作。相对于致痫组,中、高剂量2-DG干预组小鼠潜伏期增加,癫痫发作评分、痫性发作持续时间降低（癫痫潜伏期：15±4分钟VS35±4、33±5分钟；癫痫评分为5.1±0.5VS3.9±0.4、3.8±0.5；痫性发作持续时间为122±7分钟VS35±6分钟、42±7分钟）,而且有统计学意义。2.对不同组（对照组、致痫组、2-DG干预组）脑电图监测显示：对照组脑电图是以α、β波为主且波幅较小；匹罗卡品致痫模型组可见大量的尖波、棘波和尖慢波：2-DG干预组脑电图是也主要是以α、β波为主且波幅较小。结论：2-DG在匹罗卡品癫痫模型中具有抗痫作用。2-D...
【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
2 2-DG抗痫作用的评价
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 材料
2.2.2 实验方法
2.3 结果
2.3.1 匹罗卡品痫性发作模型小鼠行为学监测
2.3.2 不同组小鼠癫痫潜伏期、痫性发作持续时间、癫痫评分结果
2.3.3 不同组小鼠小鼠癫痫持续状态的脑电图记录结果
2.4 讨论
2.4.1 匹罗卡品致痫小鼠模型
2.4.2 2-DG的抗痫作用
2.5 结论
ATP亚基KIR6.1、KIR6.2发挥抗痫作用">3 2-DG上调KATP亚基KIR6.1、KIR6.2发挥抗痫作用
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 材料
3.2.2 实验方法
3.3 结果
3.3.1 采用RT-PCR技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后海马组织4小时,1、7、30、60天mRNA的变化
3.3.2 采用western-blot技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后海马组织4小时,1、7、30、60天蛋白的变化
3.4 讨论
ATP通道在抗痫作用中的作用与机制"> 3.4.1 KATP通道在抗痫作用中的作用与机制
3.4.2 2-DG通过上调Kir6.1和Kir6.2 mRNAs和蛋白表达发挥抗痫作用
3.5 结论
ATP通道抗痫作用机制体外实验研究">4 2-DG经KATP通道抗痫作用机制体外实验研究
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料
4.2.2 实验方法
4.2.3 统计学处理
4.2.4 常见故障和解决方法
4.3 结果
4.3.1 在体外海马脑片CA3区,给予10uM荷包牡丹碱、7.5mM高钾模拟痫性发作,诱发动作电位频率增加,应用盲法膜片钳技术监测使用10mM 2-DG前后神经元细胞动作电位频率的变化
Glu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,记录给予2DG后海马CA3区神经元LTPGlu（谷氨酸介导突触传递的长时程增强）的变化；给予KATP通道激活剂Diazoxide（300nM）后LTPGlu的变化以及在KATP通道抑制剂Gliben（20uM）预处?@@#54-58"> 4.3.2 在体外海马脑片上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,记录给予2DG后海马CA3区神经元LTPGlu（谷氨酸介导突触传递的长时程增强）的变化；给予KATP通道激活剂Diazoxide（300nM）后LTPGlu的变化以及在KATP通道抑制剂Gliben（20uM）预处?@@#54-58
4.4 讨论
4.4.1 体外海马脑片痫性模型
ATP通道在抗痫作用中的作用与机制"> 4.4.2 KATP通道在抗痫作用中的作用与机制
ATP通道激活发挥抗痫作用"> 4.4.3 2-DG介导KATP通道激活发挥抗痫作用
4.5 结论
5 2-DG抗痫作用的信号通路研究
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 材料
5.2.2 实验方法
5.2.3 统计学处理
5.3 结果
5.3.1 采用Elisa技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后1、7、30、60天DAG的变化
Glu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,给予PKC激动剂phorbol预处理后,应用盲法膜片钳技术记录给予2-DG后海马CA3区神经元LTPGlu的变化"> 5.3.2 在体外海马脑片上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,给予PKC激动剂phorbol预处理后,应用盲法膜片钳技术记录给予2-DG后海马CA3区神经元LTPGlu的变化
5.4 讨论
5.4.1. PLCγ1作为2-DG介导BDNF和trkB信号通路发挥抗痫作用的下游信号通路
5.4.2 DAG作为2-DG介导BDNF→trkB→PLCγ1信号通路的第二信使
5.4.3 PKC作为2-DG介导BDNF→trkB→PLCγ1→DAG信号通路的功能蛋白
ATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信号通路的离子通道受体"> 5.4.4 KATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信号通路的离子通道受体
5.5 结论
5.5.1 DAG的下降与2-DG的抗痫作用有关；PKC激动剂能抑制2-DG的抗痫作用
参考文献
综述
糖酵解在痫性发作中的能量代谢特点
参考文献
糖酵解抑制剂2脱氧葡萄糖抗痫机制
参考文献
攻读博士学位期间论文发表和参与课题
致谢
本文编号：3012644
【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
2 2-DG抗痫作用的评价
2.1 前言
2.2 材料与方法
2.2.1 材料
2.2.2 实验方法
2.3 结果
2.3.1 匹罗卡品痫性发作模型小鼠行为学监测
2.3.2 不同组小鼠癫痫潜伏期、痫性发作持续时间、癫痫评分结果
2.3.3 不同组小鼠小鼠癫痫持续状态的脑电图记录结果
2.4 讨论
2.4.1 匹罗卡品致痫小鼠模型
2.4.2 2-DG的抗痫作用
2.5 结论
ATP亚基KIR6.1、KIR6.2发挥抗痫作用">3 2-DG上调KATP亚基KIR6.1、KIR6.2发挥抗痫作用
3.1 前言
3.2 材料与方法
3.2.1 材料
3.2.2 实验方法
3.3 结果
3.3.1 采用RT-PCR技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后海马组织4小时,1、7、30、60天mRNA的变化
3.3.2 采用western-blot技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后海马组织4小时,1、7、30、60天蛋白的变化
3.4 讨论
ATP通道在抗痫作用中的作用与机制"> 3.4.1 KATP通道在抗痫作用中的作用与机制
3.4.2 2-DG通过上调Kir6.1和Kir6.2 mRNAs和蛋白表达发挥抗痫作用
3.5 结论
ATP通道抗痫作用机制体外实验研究">4 2-DG经KATP通道抗痫作用机制体外实验研究
4.1 前言
4.2 材料与方法
4.2.1 材料
4.2.2 实验方法
4.2.3 统计学处理
4.2.4 常见故障和解决方法
4.3 结果
4.3.1 在体外海马脑片CA3区,给予10uM荷包牡丹碱、7.5mM高钾模拟痫性发作,诱发动作电位频率增加,应用盲法膜片钳技术监测使用10mM 2-DG前后神经元细胞动作电位频率的变化
Glu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,记录给予2DG后海马CA3区神经元LTPGlu（谷氨酸介导突触传递的长时程增强）的变化；给予KATP通道激活剂Diazoxide（300nM）后LTPGlu的变化以及在KATP通道抑制剂Gliben（20uM）预处?@@#54-58"> 4.3.2 在体外海马脑片上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,记录给予2DG后海马CA3区神经元LTPGlu（谷氨酸介导突触传递的长时程增强）的变化；给予KATP通道激活剂Diazoxide（300nM）后LTPGlu的变化以及在KATP通道抑制剂Gliben（20uM）预处?@@#54-58
4.4 讨论
4.4.1 体外海马脑片痫性模型
ATP通道在抗痫作用中的作用与机制"> 4.4.2 KATP通道在抗痫作用中的作用与机制
ATP通道激活发挥抗痫作用"> 4.4.3 2-DG介导KATP通道激活发挥抗痫作用
4.5 结论
5 2-DG抗痫作用的信号通路研究
5.1 前言
5.2 材料与方法
5.2.1 材料
5.2.2 实验方法
5.2.3 统计学处理
5.3 结果
5.3.1 采用Elisa技术测定正常对照组、匹罗卡品致痫组、不同剂量2-DG干预组小鼠致痫后1、7、30、60天DAG的变化
Glu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,给予PKC激动剂phorbol预处理后,应用盲法膜片钳技术记录给予2-DG后海马CA3区神经元LTPGlu的变化"> 5.3.2 在体外海马脑片上,高频电刺激诱发LTPGlu模拟致痫模型（每10s刺激3次,每次刺激频率100HZ）,给予PKC激动剂phorbol预处理后,应用盲法膜片钳技术记录给予2-DG后海马CA3区神经元LTPGlu的变化
5.4 讨论
5.4.1. PLCγ1作为2-DG介导BDNF和trkB信号通路发挥抗痫作用的下游信号通路
5.4.2 DAG作为2-DG介导BDNF→trkB→PLCγ1信号通路的第二信使
5.4.3 PKC作为2-DG介导BDNF→trkB→PLCγ1→DAG信号通路的功能蛋白
ATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信号通路的离子通道受体"> 5.4.4 KATP通道可能是BDNF→trkB→PLCγ1-DAG-PKC信号通路的离子通道受体
5.5 结论
5.5.1 DAG的下降与2-DG的抗痫作用有关；PKC激动剂能抑制2-DG的抗痫作用
参考文献
综述
糖酵解在痫性发作中的能量代谢特点
参考文献
糖酵解抑制剂2脱氧葡萄糖抗痫机制
参考文献
攻读博士学位期间论文发表和参与课题
致谢
本文编号：3012644
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