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cxcl12基因修饰的内皮祖细胞进一步促进少突胶质前体细胞的功能作用研究

发布时间:2021-02-18 17:20
  缺血性卒中不仅会导致脑灰质的损伤,同时也会导致脑白质的损伤。因此在脑损伤修复过程中需要新的少突胶质细胞的参与来促进白质的修复,而缺血性卒中后诱导少突胶质前体细胞(OPC)增殖和分化为少突胶质细胞的能力十分有限。研究发现,趋化因子CXCL12和内皮祖细胞(EPC)可通过向脱髓鞘部位招募OPC或促进OPC增殖和分化为少突胶质细胞来促进髓鞘再生。基于前期实验结果,我们假设内皮祖细胞和CXCL12的积极作用可以叠加,从而协同提升OPC的生理功能。在本研究中,我们通过慢病毒载体在内皮祖细胞中过表达cxcl12基因来获得CXCL12-EPC细胞。收集CXCL12-EPC的条件培液(conditioned media,CM)用于处理OPC,探究CXCL12-EPC的CM对OPC增殖、迁移、分化和存活能力的影响,进一步探究CM对OPC下游因子CXCR4、CXCR7、PDGFRα和MBP表达的影响。在本实验中以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)、EPC和GFP-EPC的CM作为实验对照。为了探究CXCL12在OPC中所介导的信号通路,我们采用重组蛋白CXCL12处理OPC,并分别阻断或下调了CXCL12两个... 

【文章来源】:上海交通大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:84 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

cxcl12基因修饰的内皮祖细胞进一步促进少突胶质前体细胞的功能作用研究


EPC培养及鉴定结果

照片,慢病毒,转染


上海交通大学硕士学位论文ture of EPC and immunofluorescence identification results. B: Flidentification of EPC. Scale bar=50 μm.功转染 EPC慢病毒滴度分别是 LV-GFP:5x108个病毒颗粒/ml颗粒/ml。根据要转染的 EPC 细胞数计算出需要的病毒光显微镜下拍摄同 视野的明场和荧光照片,计算病2-2 所示,90%以上的 EPC 能表达绿色荧光,说明染 EPC 细胞,满足后续实验需要。

cxcl12基因修饰的内皮祖细胞进一步促进少突胶质前体细胞的功能作用研究


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本文编号:3039854

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