NMDA受体调节少突胶质前体细胞分化以及铜腙模型中的髄鞘再生过程

发布时间：2021-02-18 23:42

　　成熟的少突胶质细胞是中枢神经系统内形成髓鞘的细胞。少突胶质细胞是由少突胶质前体细胞（OPCs）分化形成的。在发育过程中,少突胶质前体细胞在大脑内起源于非常局限的部位即室膜区,经过增殖、迁移、到达富含轴突的白质部位,然后分化为成熟的少突胶质细胞,进而少突胶质细胞的突起包绕轴突起始髓鞘的形成。在髓鞘受损后,OPCs激活,通过增殖、迁移募集到受损部位,然后分化成为新的少突胶质细胞重新形成髓鞘实现髓鞘的再生,基本上重现发育中髓鞘形成过程。近来病理学研究显示,在多发性硬化病人的慢性病灶处存在未成髓鞘的少突胶质细胞和大量的OPCs,提示脱髓鞘病灶处的OPCs分化受阻,滞留在从未成熟到成熟的分化阶段。这可能是髓鞘再生的限制性因素。因此深入研究OPCs分化机制,有可能揭示髓鞘再生失败的原因,并对寻找治疗脱髓鞘疾病有效治疗手段具有重要意义。中枢神经系统的髓鞘形成过程是少突胶质细胞与被它包绕的轴突之间相互影响、紧密联系的复杂过程。大量研究显示,神经元以及轴突可通过释放神经递质直接影响少突胶质细胞发育的各个阶段以及髓鞘的形成,还可以通过刺激星型胶质细胞间接调控这个过程。神经元动作电位以及星型胶质细胞和白质部... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：119 页

【学位级别】：博士

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致谢
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Abstract
目次
1. 引言
2. 材料和方法
    2.1 实验材料
    2.2 实验方法
        2.2.1 OPCs的分离纯化培养以及分化实验
        2.2.2 OPC分化形态鉴定
        2.2.3 免疫细胞化学以及体外定量
        2.2.4 DRG/OPC共培
        2.2.5 电镜
        2.2.6 Western blot
        2.2.7 铜腙模型的建立
        2.2.8 Luxol-Fast Blue以及免疫组化分析
        2.2.9 慢病毒转染
        2.2.10 细胞增殖和存活实验
        2.2.11 实验动物
        2.2.12 统计分析
3. 结果
    3.1 NMDA受体在体外培养的少突胶质细胞系上都有表达
    3.2 NMDA受体在在体脑片的少突胶质细胞系上有表达
    3.3 NMDA调节少突胶质前体细胞分化
    3.4 用RNA干扰的方法下调NMDA受体的表达后NMDA刺激不影响少突胶质细胞的分化
    3.5 NMDA促进少突胶质细胞的分支生长使其形态更复杂
    3.6 NMDA不影响少突胶质前体细胞从前体阶段向未成熟阶段转化
    3.7 NMDA促进少突胶质细胞的分化主要作用在从未成熟阶段向成熟阶段的转化
    3.8 NMDA刺激不影响少突胶质细胞的增殖以及凋亡
    3.9 NMDA刺激通过增加DRG/OPC共培体系内髓鞘阶段数目的形成促进髓鞘形成
    3.10 LFA-PAS染色显示NDMA受体的特异性拮抗剂MK-801可延缓铜腙模型中的髓鞘再生过程
    3.11 NDMA受体的特异性拮抗剂MK-801可降低铜腙模型中髓鞘再生阶段胼胝体中间部位髓鞘蛋白的表达
    3.12 NDMA受体的特异性拮抗剂MK-801可降低铜腙模型中髓鞘再生阶段胼胝体中间部位髓鞘再生的轴突的数目但是不影响G-ratio值
    3.13 NDMA受体的特异性拮抗剂MK-801通过抑制少突胶质细胞的分化延缓铜腙模型中髓鞘再生过程
    3.14 NDMA受体的特异性拮抗剂MK-801不影响Iba1阳性的小胶质细胞以及GFAP阳性的星型胶质细胞的数目
    3.15 免疫组化鉴定在铜腙模型的髓鞘再生过程中胼胝体部位的NG2阳性的少突胶质前体细胞上存在NMDA受体表达
4. 讨论
    4.1 NMDA受体在少突胶质前体细胞发育中的作用
    4.2 NMDA受体在髓鞘形成中的作用
    4.3 NMDA受体在髓鞘修复过程中的作用
    4.4 少突胶质细胞上的NMDA受体的特点
参考文献
综述
    参考文献
作者简历及在学期间所取得的科研成果



本文编号：3040273