盐酸戊乙奎醚对缺血再灌注大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响
发布时间：2021-03-05 20:32
目的:探索脑缺血再灌注时自噬的作用及给予盐酸戊乙奎醚对其的影响方法:清洁级SD大鼠54只,体重250-280g（兰州大学基础医学院动物实验中心提供）。随机数字表法分为3组（n=18）:假手术组（Sham组）;缺血再灌注组（I/R组）;盐酸戊乙奎醚组（PHC组）。I/R组与PHC组均使用线栓制作右脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,按照Zea Longa神经功能缺失评分法1-3分界定为模型成功。缺血1.5 h后抽出线栓,Sham组在模型成功后1h从尾静脉推注0.9%NS1ml;I/R组于脑血管再通前30分钟从尾静脉推注0.9%NS 1ml;PHC组同样的时间点推注盐酸戊乙奎醚0.2mg/kg稀释到1ml。于再灌注后24h后分别再进行神经功能评分;2%TTC染色脑组织测定含水率及梗死率;Western Blot法测自噬表达Beclinl、Atg5、LC3II/I;免疫荧光双染色观察海马CA1区组织学变化,收集数据并进行统计学分析。结果:1、大鼠神经功能缺损评分:缺血1.5h后,I/R和PHC两组神经功能缺损评分均降低,与Sham组...
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
再灌注24h脑缺血区域自噬相关产物的表达注：Beclin1、Atg5、LC3II/I均为自噬表达产物，aP表示与Sham组比较P<0.01，bP表示与I/R组比较P<0.01
兰州大学硕士学位论文盐酸戊乙奎醚对缺血再灌注大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响24表5再灌注24h各组WB比较（n=3,X±SD）组别Sham组I/R组PHC组P-valueBeclin11.00±0.001.68±0.01a5.54±0.22ab<0.001Atg51.00±0.001.63±0.0612.49±0.68ab<0.001LC3II/I1.00±0.001.89±0.08a2.20±0.08ab<0.001注：aP表示与Sham组比较P<0.01，bP表示与I/R组比较P<0.014.4自噬相关蛋白的免疫荧光染色结果4.4.1再灌注24h后海马CA1区Beclin1、Atg5表达的免疫荧光结果显微镜下观察各组大鼠海马CA1区自噬表达产物的分布情况。Sham组Beclin1、Atg5均有低剂量表达（见图5A-B）；与Sham组相比，I/R组Beclin1、Atg5表达增多（见图5C-D），而PHC组较I/R组又增多（见图5E-F）。图5大鼠大脑海马CA1区自噬相关产物Beclin1、Atg5的表达注：Beclin1(A、C、E)、Atg5(B、D、F)均由AlexaFluor488标记，呈绿色。图中Bar=100μm.4.4.2再灌注24h后海马CA1区细胞结构、核形态及数量Sham组可以看到CA1区锥体细胞核排列致密整齐,胞核饱满、边界清晰，ABCDEF
兰州大学硕士学位论文盐酸戊乙奎醚对缺血再灌注大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响25有两到三层细胞排列（见图6）；I/R组细胞排列松散，大部分细胞核崩解，核形态异常，单位面积内细胞核数锐减，与Sham组比较差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）；PHC组细胞层次尚完整，部分细胞崩解，单位面积内细胞核数有减少，与Sham组比较差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）；但正常形态的细胞数多于I/R组，差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）。图6大鼠大脑海马CA1区细胞核形态注：各组DAPI染色细胞核，呈蓝色。图中Bar=10μm。
【参考文献】：
期刊论文
[1]氯喹对大鼠脑缺血再灌注自噬相关蛋白的影响[J]. 肖学进,李丹丹,梁佳,李霞,秦书俭,包翠芬. 中国临床解剖学杂志. 2017(04)
[2]颈总动脉穿刺法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型[J]. 刘华,刘月美,关芮,徐昭,朱文增. 中国实验动物学报. 2016(04)
[3]Neuroprotection and antioxidants[J]. Maria Lalkovi?ová,Viera Danielisová. Neural Regeneration Research. 2016(06)
[4]盐酸戊乙奎醚对大鼠横纹肌溶解致急性肾损伤肾脏细胞凋亡的作用研究[J]. 周婷,吴广礼,黄旭东,赵维,张静敏,吴超然. 中国中西医结合肾病杂志. 2016(03)
[5]Autophagy in cerebral ischemia and the effects of traditional Chinese medicine[J]. Xiao-ping Huang,Huang Ding,Jin-dong Lu,Ying-hong Tang,Bing-xiang Deng,Chang-qing Deng. Journal of Integrative Medicine. 2015(05)
[6]盐酸戊乙奎醚对大鼠小肠组织自噬的影响[J]. 康于庆,李跃兵,黄再青,古妙宁,林春水. 中国现代医学杂志. 2015(09)
[7]盐酸戊乙奎醚后处理对肢体缺血-再灌注大鼠肝损伤的影响[J]. 冷玉芳,张悦,薛兴,张艳,汪涛,康于庆. 临床麻醉学杂志. 2012(09)
[8]盐酸戊乙奎醚（长托宁）抑制脑缺血/再灌注时谷氨酸的释放及受体机制研究[J]. 尚游,顾佩菲,尚宇,李悦. 中国应用生理学杂志. 2011(03)
[9]改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的实验研究[J]. 武强,武文元,王涛. 中国临床神经外科杂志. 2009(03)
[10]内皮素在过度训练致大鼠急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应[J]. 吴广礼,张丽霞,张文玉,黄旭东. 中国中西医结合肾病杂志. 2009(02)
本文编号：3065824
【文章来源】：兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
再灌注24h脑缺血区域自噬相关产物的表达注：Beclin1、Atg5、LC3II/I均为自噬表达产物，aP表示与Sham组比较P<0.01，bP表示与I/R组比较P<0.01
兰州大学硕士学位论文盐酸戊乙奎醚对缺血再灌注大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响24表5再灌注24h各组WB比较（n=3,X±SD）组别Sham组I/R组PHC组P-valueBeclin11.00±0.001.68±0.01a5.54±0.22ab<0.001Atg51.00±0.001.63±0.0612.49±0.68ab<0.001LC3II/I1.00±0.001.89±0.08a2.20±0.08ab<0.001注：aP表示与Sham组比较P<0.01，bP表示与I/R组比较P<0.014.4自噬相关蛋白的免疫荧光染色结果4.4.1再灌注24h后海马CA1区Beclin1、Atg5表达的免疫荧光结果显微镜下观察各组大鼠海马CA1区自噬表达产物的分布情况。Sham组Beclin1、Atg5均有低剂量表达（见图5A-B）；与Sham组相比，I/R组Beclin1、Atg5表达增多（见图5C-D），而PHC组较I/R组又增多（见图5E-F）。图5大鼠大脑海马CA1区自噬相关产物Beclin1、Atg5的表达注：Beclin1(A、C、E)、Atg5(B、D、F)均由AlexaFluor488标记，呈绿色。图中Bar=100μm.4.4.2再灌注24h后海马CA1区细胞结构、核形态及数量Sham组可以看到CA1区锥体细胞核排列致密整齐,胞核饱满、边界清晰，ABCDEF
兰州大学硕士学位论文盐酸戊乙奎醚对缺血再灌注大鼠脑组织自噬相关蛋白表达的影响25有两到三层细胞排列（见图6）；I/R组细胞排列松散，大部分细胞核崩解，核形态异常，单位面积内细胞核数锐减，与Sham组比较差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）；PHC组细胞层次尚完整，部分细胞崩解，单位面积内细胞核数有减少，与Sham组比较差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）；但正常形态的细胞数多于I/R组，差异有统计学意义（P<0.01，见表6，图6）。图6大鼠大脑海马CA1区细胞核形态注：各组DAPI染色细胞核，呈蓝色。图中Bar=10μm。
【参考文献】：
期刊论文
[1]氯喹对大鼠脑缺血再灌注自噬相关蛋白的影响[J]. 肖学进,李丹丹,梁佳,李霞,秦书俭,包翠芬. 中国临床解剖学杂志. 2017(04)
[2]颈总动脉穿刺法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型[J]. 刘华,刘月美,关芮,徐昭,朱文增. 中国实验动物学报. 2016(04)
[3]Neuroprotection and antioxidants[J]. Maria Lalkovi?ová,Viera Danielisová. Neural Regeneration Research. 2016(06)
[4]盐酸戊乙奎醚对大鼠横纹肌溶解致急性肾损伤肾脏细胞凋亡的作用研究[J]. 周婷,吴广礼,黄旭东,赵维,张静敏,吴超然. 中国中西医结合肾病杂志. 2016(03)
[5]Autophagy in cerebral ischemia and the effects of traditional Chinese medicine[J]. Xiao-ping Huang,Huang Ding,Jin-dong Lu,Ying-hong Tang,Bing-xiang Deng,Chang-qing Deng. Journal of Integrative Medicine. 2015(05)
[6]盐酸戊乙奎醚对大鼠小肠组织自噬的影响[J]. 康于庆,李跃兵,黄再青,古妙宁,林春水. 中国现代医学杂志. 2015(09)
[7]盐酸戊乙奎醚后处理对肢体缺血-再灌注大鼠肝损伤的影响[J]. 冷玉芳,张悦,薛兴,张艳,汪涛,康于庆. 临床麻醉学杂志. 2012(09)
[8]盐酸戊乙奎醚（长托宁）抑制脑缺血/再灌注时谷氨酸的释放及受体机制研究[J]. 尚游,顾佩菲,尚宇,李悦. 中国应用生理学杂志. 2011(03)
[9]改良线栓法制备大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型的实验研究[J]. 武强,武文元,王涛. 中国临床神经外科杂志. 2009(03)
[10]内皮素在过度训练致大鼠急性肾损伤中的作用及山莨菪碱的干预效应[J]. 吴广礼,张丽霞,张文玉,黄旭东. 中国中西医结合肾病杂志. 2009(02)
本文编号：3065824
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3065824.html
最近更新
教材专著
