AngⅡ-NOX2/SirT3信号通路在激活小胶质细胞中的表达及天麻素干预的影响

发布时间：2021-04-01 00:19

　　[目的]复制体内新生大鼠缺血缺氧性脑损伤（HIBD）模型与体外脂多糖（LPS）诱导的BV-2小胶质细胞激活模型,研究血管紧张素系统（ACE、AT1、AT2）、NADPH氧化酶2（NOX2）和沉默信息调节蛋白3（SirT3）在HIBD大鼠胼胝体区及LPS激活的小胶质细胞中的表达以及天麻素干预对AngⅡ-NOX2/SirT3信号通路的影响,从细胞、分子和蛋白层面探讨天麻素对激活小胶质细胞的抑制作用及信号机制。[方法]将新生1d的SD大鼠颈总动脉结扎后放入缺氧箱（8%02,92%N2）2h,复制HIBD模型,新生大鼠随机分为对照组、HIBD组和HIBD+天麻素干预组（100 mg/kg）。将体外培养的BV-2小胶质细胞随机分为对照组、LPS（1mg/L）组、不同浓度的天麻素（50 mg/L和100 mg/L）+LPS处理组,LPS+阿齐沙坦（10 μM）组和天麻素（50 mg/L）+LPS+阿齐沙坦共同处理组和阳性对照组。采用MTS法检测天麻素对BV-2小胶质细胞活力的影响。采用免疫荧光双标染色、蛋白质印迹分析（Western Blot）方法检测体内、外激活的小胶质细胞中血管紧张素转化酶（A... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２．?ＢＶ－２小胶质细胞活力检测：０－１?ｍｇ／ｍｌ浓度的天麻素，培养４?ｈ未见明显的??亡

表５各组ＢＶ－２小胶质细胞ｉＮＯＳ和ＴＮＦ－ａ光密度值变化（Ｚ?土?ｓ?）??Ｔａｂｌｅ?５?Ｔｈｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ｉＮＯＳ?ａｎｄ?ＴＮＦ－ａ?ｉｎ?ｅａｃｈ?ｇｒｏｕｐ?ｏｆ?ＢＶ－２?ｍｉｃｒｏｇｌｉａ??（Ｊ?±?■？）??组别?ｉＮＯＳ?ＴＮＦ－ａ??正常对照组?０．０５±０．０９?０．０１±０．０１??ＬＰＳ?组?０．９Ｕ０．０５＊?０．７６士０．０４＊??５０ｍｇ／Ｌ?天麻素组?０．６７±０．０６＃?０．５３士０．１０＃??ｌＯＯｍｇ／Ｌ?天麻素组?０．６５±０．０３＃?０．５６±０．０７＃??＊表示与正常对照组相比较有明显差异，；？＜０．０５；?＃表示与ＬＰＳ组比较有明显差??异，／？＜０．０５〇??＊Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ，／？＜０．０５；?＃Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ??ｃｏｍｐａｒｅｄ?ｗｉｔｈ?ＬＰＳ?ｇｒｏｕｐ，／？＜０．０５．??

实验通过Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ与免疫荧光双标染色共同检测了正常对照组、ＬＰＳ组??与５０ｍｇ／Ｌ和１００ｍｇ／Ｌ两个天麻素干预组的ＢＶ－２小胶质细胞中ＡＣＥ、Ａ１与??ＮＯＸ２蛋白的表达水平（见表６，图４、图５、图６）。免疫焚光双标染色结果显??示：在正常对照组中，小胶质细胞（绿色）与ＡＣＥ、ＡＴ＾?ＮＯＸ２?（红色）仅有??少量共表达；ＬＰＳ组的小胶质细胞（绿色）与ＡＣＥ、ＡＴ＾?ＮＯＸ２?（红色）共表??达较对照组明显增强；在５〇１？§＾和１００ｍｇ／Ｌ两个天麻素干预组，ＡＣＥ、ＡＴＶ??ＮＯＸ２?（红色）荧光强度较ＬＰＳ组减弱，与小胶质细胞（绿色）的共表达减少，??两个天麻素组之间无明显差异。Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔ结果显示：与正常对照组相比，ＬＰＳ??组中ＡＣＥ、八＾和ＮＯＸ２的ＯＤ值明显增加（ｐ＜０．０５），而在两个天麻素干预??组，ＡＣＥ、ＡＴ！和ＮＯＸ２的ＯＤ值相较于ＬＰＳ组有显著的降低（／？＜０．０５）。两??个天麻素干预组间无明显差异。??表６各组ＢＶ－２小胶质细胞ＡＣＥ、ＡＴ！和ＮＯＸ２光密度值变化（Ｚ?±?ｓ?）??Ｔａｂｌｅ?６?Ｔｈｅ?ｏｐｔｉｃａｌ?ｄｅｎｓｉｔｙ?ｏｆ?ＡＣＥ


本文编号：3112328