WD携带者基因分型与实验室指标相关性研究

发布时间：2017-04-17 16:35

  本文关键词：WD携带者基因分型与实验室指标相关性研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景:肝豆状核变性(Hepatolenticular Degeneration,HLD),又称Wilson病(Wilson’s Disease,WD),是一种ATP7B基因突变致病的常染色体隐性遗传疾病,临床主要表现为全身性铜异常沉积引起的肝脏、大脑基底节乃至肾脏、心脏、骨骼等各系统的功能和器质性损伤。WD基因具有高度的遗传特异性,虽然突变位点众多,但以少数几个热点突变为主,且大多为复合杂合突变,不同国家和地区的基因突变高频位点有所差异。研究指出:目前尚未发现WD携带者存在神经系统症状,但可能存在部分铜代谢异常,包括给予驱铜药物后尿铜增高及脑脊液铜稍高于正常健康人群等。推测可能由于WD携带者存在ATP7B杂合突变,导致铜代谢过程轻度异常,从而引起体内铜轻度积累,即WD携带者有亚临床铜潴留的发生,但尚未到达出现临床症状的水平。目前已有许多学者在进行WD基因型---表型方面的研究,而WD携带者的基因型与临床实验室指标之间的关系尚未有相关研究及报道,需进一步研究。目的:通过对WD患者、WD携带者(明确诊断为WD患者的父母)及健康对照组行ATP7B基因21个外显子直接测序,并进行肝功能、肝纤维化及铜生化指标检测,分析WD携带者及患者ATP7B基因突变的特征和差异并分析其与临床生化指标之间的相关性和相异性,探讨ATP7B基因突变检查对WD携带者与患者的鉴别诊断及WD发病机制的意义,进一步研究携带者和患者的基因型、携带基因频率与临床表型相关性。方法:以2013年~2015年在我院住院确诊的WD患者的父亲或(和)母亲为实验组,WD患者及普通健康人分别为对照组,留取外周血样本,并记录其姓名、性别、年龄、病程、首发症状等临床资料,留取并检测入组者肝功能、铜生化、肝纤维化指标,收集并提取基因标本,应用DNA测序方法对上述三组进行ATP7B基因突变检测,并统计基因突变情况,采用统计软件分析高频突变位点与年龄、性别及生化指标等临床表型的相关性。结果:1.剔除271例携带者组入组检测后属复合杂合及纯合突变的23例,余248例中未检测出致病突变位点共68例,检测出杂合突变22种共178例(其中4例检测出意义不明确突变点),染色体突变频率为35.89%;高频突变外显子为8号、13号、11号外显子,高频突变位点为2333GT、2975CT及2621CT突变,突变频率分别是16.73%、7.46%、2.62%。2.240例WD患者对照组检测出致病突变共36种,其中10例检测出意义不明确的突变位点,12例未检测出致病突变,90例仅检测出一个位点杂合突变,高频突变外显子为8号、13号、11号、16号外显子。3.132例健康对照组检测出杂合突变共4例。4.WD携带者组中检测出突变位点与未检测出突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出两个突变位点与非两个突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2333GT突变位点与非2333GT突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2975CT突变位点与非2975CT突变位点者在性别上无明显差异性;WD携带者组中检测出2333GT突变位点与2975CT突变位点者在性别上无明显差异性。5.WD携带者组中检测出2333GT突变、C2975T突变与未检测出突变位点者肝功能各项指标、铜生化各项指标、肝纤维化各项指标两两比较时均无显著差异性。6.WD携带者组中未检测出突变位点、检测出一个突变位点与检测出两个及以上突变位点者铜蓝蛋白指标两两比较均无显著差异性。7.总胆汁酸在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性;总胆红素、直接胆红素、白蛋白在WD患者组与WD携带者组之间无显著差异性,而在健康人组与WD患者组及WD携带者组之间均有显著差异性;谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白在WD携带者组与健康人组之间无显著差异性,而在WD患者组与携带者组及健康人组之间均有显著差异性。8.血清铜、铜蓝蛋白在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性,铜氧化酶在携带者组与健康人组之间无显著差异性,而在WD患者组与携带者组及健康人组之间有均显著差异性。9.层粘连蛋白、Ⅳ型胶原在WD患者组、携带者组与健康人组之间两两比较均有显著差异性,透明质酸在WD患者组与携带者组之间无显著差异性,而在健康人组与WD患者组及携带者组之间有显著差异性。结论:WD患者组与WD携带者组主要基因突变位点都位于8号、13号、11号外显子上;WD携带者与WD患者,WD携带者与健康人之间肝功能、铜生化、肝纤维化指标存在显著差异性,此生化指标可考虑作为WD携带者诊断、与患者及正常人鉴别诊断辅助标准;携带高频突变基因的WD携带者的临床表型无显著差异性。
【关键词】：Wilson 病杂合子 ATP7B 基因 基因突变 基因型 临床表型
【学位授予单位】：安徽中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R742.4
【目录】：

• 中文摘要6-9
• Abstract9-12
• 中英文缩略词12-13
• 第一部分 WD中西医理论研究13-18
• 第二部分 实验研究18-66
• 前言18-21
• WD携带者及患者、健康人基因突变位点的检测与分析21-35
• 1.研究方法21-26
• 1.1 研究对象21
• 1.2 主要实验仪器21-22
• 1.3 主要实验试剂22-23
• 1.4 实验方法23-26
• 1.4.1 血液标本留取23
• 1.4.2 标本处理23-26
• 1.5 数据统计及处理26
• 2 实验结果26-32
• 2.1 WD携带者ATP7B基因突变测序结果及突变分析26-29
• 2.2 WD患者ATP7B基因突变测序结果及突变分析29-31
• 2.3 正常人基因测序结果及突变分析31-32
• 3 讨论32-35
• WD携带者基因分型与实验室指标研究35-54
• 1 研究方法35-40
• 1.1 研究对象35
• 1.2 实验仪器35
• 1.3 实验试剂35-36
• 1.4 实验方法36-39
• 1.5 数据统计及处理39-40
• 2 实验结果40-49
• 2.1 三组生化指标比较40-44
• 2.1.1 肝功能生化指标比较40-42
• 2.1.2 铜生化指标比较42-43
• 2.1.3 肝纤维化指标比较43-44
• 2.2 WD携带者基因突变与生化关系44-47
• 2.2.1 WD携带者基因突变与肝功能的关系44-45
• 2.2.2 WD携带者基因突变与铜生化的关系45-46
• 2.2.3 WD携带者基因突变与肝纤维化的关系46-47
• 2.3 WD携带者基因突变与性别关系47-48
• 2.4 突变位点数与铜蓝蛋白比较48-49
• 3.讨论49-54
• 结论54-55
• 参考文献55-66
• 第三部分 综述66-74
• 参考文献70-74
• 致谢74-75
• 个人简介75
• 在读期间发表文章75

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王共强;王伟;薛本春;胡文彬;胡纪源;韩咏竹;;Wilson病中医证候文献分析[J];安徽中医学院学报;2011年04期

2 贾绮宾;李笠;阴英;黄聪;肖彬;蓝宇;;前白蛋白、总胆汁酸、凝血酶原活动度及胆固醇检测对肝功能分期及判断预后的临床意义[J];北京医学;2009年01期

3 吴瑞宗;王艳;史春明;;血清总胆汁酸测定在肝病诊断中的应用研究[J];当代医学;2014年34期

4 程楠;陆兵勋;杜益刚;王训;胡纪源;韩咏竹;潘速跃;杨任民;;华中和华东地区肝豆状核变性患者ATP7B基因第13号外显子突变的研究[J];临床神经病学杂志;2010年01期

5 韩咏竹,王训,胡纪原,洪铭范,杨任民;二巯基丁二酸钠冲击治疗肝豆状核变性临床疗效及对体液微量元素的影响[J];临床神经病学杂志;1998年03期

6 杨任民;Wilson病的肝症状[J];临床荟萃;1987年04期

7 崔贵祥,赵庆文;中西医结合治疗肝豆状核变性33例临床观察[J];山东中医杂志;2001年05期

8 程楠;陆兵勋;杜益刚;王训;胡纪源;胡文彬;李凯;韩咏竹;潘速跃;杨任民;;中国人Wilson病患者基因高频突变位点的快速检测[J];中风与神经疾病杂志;2009年04期

9 刘晓青,张雅芬,刘孜孜,顾学范,萧广仁,鲍克容,俞丽华;肝豆状核变性基因类型与临床表型关系研究[J];中华儿科杂志;2003年01期

10 韩咏竹,王训,胡纪原,胡文彬,杨任民;肝豆片治疗32例肝豆状核变性的临床观察及其对体液微量元素的影响[J];中医药研究;1998年04期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 万波;中国汉族人肝豆状核变性患者的ATP7B突变基因型与临床表型关联研究[D];复旦大学;2010年

  本文关键词：WD携带者基因分型与实验室指标相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：313849