RNA干扰介导肌肉环指蛋白-1（MuRF1）基因下调延缓失神经骨骼肌萎缩的基础研究

发布时间：2021-04-28 17:00

　　目的应用RNA干扰技术体外抑制大鼠MuRF1基因表达的效果，以期筛选出针对MuRF1基因抑制效果最佳的siRNA重组质粒。方法根据大鼠MuRF1基因的mRNA序列，设计四组干扰序列，即siRNAMuRF1-Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，利用lipofactamine2000转染试剂将siRNA重组质粒转染大鼠成肌细胞系L6，于转染后48h与72h，采用实时定量PCR和Westernblot或免疫印迹检测其对MuRF1表达的抑制效果。结果1.实时定量PCR显示四组干扰质粒MuRF1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对基因MuRF1的mRNA的抑制率在转染后48h分别为67﹪、31﹪、11﹪，20﹪,不同干扰序列的抑制效果有差异（F=4.527，P=0.024）；72h分别为79﹪、59﹪、50﹪和61﹪，不同干扰序列的抑制效果有差异（F=19.088，P<0.001）,与48h相比，抑制效应更为明显，但以siRNAMuRF1-Ⅰ的抑制效果最为明显（t=8.201,P<0.001）。2.使用Western印迹灰度分析显示四组干扰序列对基因MuRF1的蛋白的抑制率在转染后48h分别为61﹪、40﹪、9﹪，15﹪，... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

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期刊论文
[1]失神经骨骼肌萎缩中泛素蛋白连接酶Murf1和核转录因子NF-κB表达与被动运动干预[J]. 韩利军,梁炳生,王乐,张磊.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(24)
[2]失神经骨骼肌萎缩与氯沙坦通过核因子κ B/MuRF1通路的延缓作用[J]. 王乐,梁炳生,李文斌,张磊,韩利军,吴启平.  中国组织工程研究与临床康复. 2010(15)
[3]核转录因子-κB与肌环状指蛋白1在失神经肌萎缩中的表达及意义[J]. 李文斌,梁炳生,梁绪.  中华实验外科杂志. 2010 (04)
[4]失神经骨骼肌萎缩防治研究进展[J]. 李永平,梁炳生.  国际骨科学杂志. 2006(06)
[5]被动活动对失神经支配骨骼肌萎缩的影响[J]. 徐建广,顾玉东,屠永全,李继峰.  中华显微外科杂志. 2003(03)
[6]功能性电刺激对脊髓损伤后功能恢复的治疗作用[J]. 李民,邵阳,伍亚民,廖维宏.  中国康复医学杂志. 2001(02)
[7]被动活动对小鼠失神经支配肌肉萎缩的影响[J]. 陈德松,顾玉东,满富强,刘国庆.  中国康复医学杂志. 1992(05)



本文编号：3165839