GDNF及dbcAMP对神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元作用的实验研究

发布时间：2021-05-10 15:45

　　目的利用GDNF及dbcAMP对大鼠胚胎神经干细胞进行定向分化,从而获得相当数量的多巴胺能细胞,为下一步的细胞移植打下基础。方法分离培养孕14¹6 d Wistar大鼠大脑神经干细胞,通过传代培养来检测其自我更新能力,并对其进行Nestin及Brdu蛋白鉴定,利用GDNF及dbcAMP对大鼠神经干细胞进行定向分化,通过免疫细胞化学及免疫荧光等方法检测TH阳性细胞表达。结果培养的神经干细胞均表达Nestin及Brdu,体外培养1 w后神经球的数量显著增加,体积增大;GDNF及dbcAMP均能提高TH表达,与血清对照组比较有显著差异（P<0.05）。结论在神经营养因子的作用下,分离的神经干细胞能够快速增殖并形成神经球,GDNF及dbcAMP均有诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的作用,其中GDNF在20μg/L时诱导效能最高,dbcAMP在200μmol/L时诱导效能最高,二者均存在剂量依赖性,二者联合诱导可明显提高各自单独诱导TH细胞的阳性率。 

【文章来源】：中风与神经疾病杂志. 2014,31(07)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物
    1.2 试剂
    1.3 神经干细胞的体外分离及原代培养
    1.4 神经干细胞的鉴定
    1.5 NSC的诱导分化
    1.6 免疫细胞化学染色
    1.7 统计学分析
2 结果
    2.1 孕14~16 d Wistar大鼠无血清培养
    2.2 Nestin鉴定
    2.3 Brdu鉴定
    2.4 神经干细胞向多巴胺能神经元分化的鉴定
        2.4.1 血清分化组
        2.4.2 实验组A (不同剂量组GDNF诱导神经干细胞分化)
        2.4.3 实验组B (不同剂量组dbc AMP诱导神经干细胞分化)
        2.4.4 实验组C (GDNF20μg/L联合db-c AMP200μmol/L诱导分化)
3 讨论
    3.1 NSCs定向分化中多巴胺能相关诱导剂应用机制的探讨
    3.2 GDNF和dbc AMP在NSCs向多巴胺能神经元定向分化中的诱导效应及有效剂量的探讨
    3.3 NSCs向多巴胺能定向分化研究应用于临床存在的问题
    3.4 神经干细胞移植治疗PD的展望


【参考文献】：
期刊论文
[1]EGF和FGF-2促神经干细胞增殖与分化研究[J]. 张文治,苏心,秦进喜,孔繁明,王新平,只达石.  现代神经疾病杂志. 2002(06)
[2]神经营养因子家族及其受体的研究进展[J]. 郭雨霁,李盛芳.  神经解剖学杂志. 2001(03)



本文编号：3179627