多巴胺对细胞能量代谢途径的毒性作用机理研究

发布时间：2021-05-16 13:53

　　帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种常见的神经退行性疾病。患者的病理特征是中脑黑质区域的多巴胺能神经元（Dopaminergic neuron,DN）出现特异性损伤和死亡,但其病理发生的原因至今不明;一般认为这种损伤和死亡可能与多巴胺（dopamine,DA）的代谢有紧密联系。已知DA极易被氧化形成多巴胺醌（dopamine quinone,DAQ）,而DAQ可与蛋白质的巯基结合,形成醌蛋白,造成蛋白质活性下降甚至失活,从而导致细胞毒性。这是否是PD患者DN持续死亡的原因目前众说不一。在前期研究中,我们课题组发现随着年龄增加老龄鼠黑质DN逐渐减少的同时,在老龄大鼠黑质区,乳酸脱氢酶B（Lactate dehydrogenase B,LDHB）、α-烯醇化酶（Enolase 1,ENO1）及苹果酸脱氢酶-1（Malate dehydrogenase-1,MDH1）中DAQ的修饰显著增多;由于这些蛋白质是能量代谢过程中的关键酶,研究它们的醌化是否为DN大量死亡的直接因素,有助于阐明PD的发病机制,为PD发病的有效干预和治疗提供新的思路。首先,我们以人神经母细胞瘤细... 

【文章来源】：华东师范大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：85 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩略词
前言
第一章 多巴胺对细胞的毒性作用
    第一节 材料与方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验方法
    第二节 实验结果
        1.2.1 DA对 SH-SY5Y细胞存活率的影响
        1.2.2 DA作用SH-SY5Y细胞后醌蛋白含量的变化
        1.2.3 DA对细胞内能量代谢关键酶LDHB、ENO1、MDH1 含量的影响
    第三节 讨论与分析
第二章 多巴胺导致细胞死亡的途径研究
    第一节 材料与方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
    第二节 实验结果
        2.2.1 质粒转染效率检测
        2.2.2 RNAi敲低细胞内能量代谢关键酶的效果检测
        2.2.3 能量代谢关键酶表达量下调时细胞的存活率检测
        2.2.4 能量代谢关键酶表达量下调时细胞内ATP含量检测
        2.2.5 能量代谢关键酶表达量下调时细胞内线粒体膜电位检测
        2.2.6 能量代谢关键酶表达量下调时细胞内NADPH/NADP+检测
        2.2.7 DA及 L-DOPA对能量代谢关键酶表达量下调的细胞存活率的影响
    第三节 讨论与分析
第三章 结论、不足与展望
    第一节 结论
    第二节 不足与展望
综述
参考文献
致谢



本文编号：3189809