化合物LX007抑制脂多糖诱导原代小胶质细胞炎症反应及其机制研究

发布时间：2021-06-06 06:40

　　目的:小胶质细胞的过度活化所引起的神经炎症反应在缺血性脑卒中、阿尔茨海默病、帕金森氏病、多发性硬化等神经系统疾病的发病过程中发挥着重要作用。为了给此类疾病提供更好的治疗方案,南京医科大学药学院药物化学系设计并合成了一系列新型化合物,它们均由一个疏水环A和一个带有羧基基团的疏水环B构成主要结构。现已证实,该系列代表化合物ZL006在体内外实验中均有显著的神经保护作用。然而,这些化合物在中枢神经系统中是否具有抗炎作用尚不清楚。4-（（5-溴-3-氯-2-羟苯基）氨）-2-羟基苯甲酸（简称LX007）,是ZL006系列化合物中的一种。在本研究中,我们探究LX007能否减轻小胶质细胞激活所介导的炎症反应及其可能的机制。方法:本研究中,我们采用脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）刺激小鼠原代小胶质细胞的炎症模型探究LX007的抗炎作用。运用实时定量PCR（real-time PCR,rt-PCR）、蛋白印迹（western blot,WB）及酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）等方法检测促炎介质的表达水平。同时,我们... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２：?ＬＸ００７对原代小胶质细胞活力的影响

用ＬＸ００７Ｃ１０，２０和３０?ｎＭ）预处理原代小胶质细胞１小时，再以ＬＰＳ（０．１?ｆｉｇ／ｍｌ）??孵育２４小时后使用ＥＬＩＳＡ试剂盒检测ＰＧＥ２的含量。ＬＰＳ刺激导致了?ＰＧＥ２的??显著增加，而ＬＸ００７能够减少ＰＧＥ２的产生（图４Ａ）。由于ＰＧＥ２是由ＣＯＸ－２??产生的，我们进一步探宄了原代小胶质细胞中ＬＸ００７对ＬＰＳ刺激后ＣＯＸ－２表??达的影响。研究结果显示，ＬＸ００７明显的抑制了?ＣＯＸ－２的ｍＲＮＡ?（图４Ｂ）与??蛋白水平的表达（图４Ｃ－Ｄ）。因此，ＬＸ００７可通过抑制ＣＯＸ－２的表达降低ＰＧＥ２??的产生。??第２２页??

中ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ的ｍＲＮＡ表达水平，结果表明，ＬＰＳ?（０．１?ｎｇ／ｍｌ）刺激??６小时后，这些促炎因子表达量显著增加，加入不同浓度ＬＸ００７（?１０，?２０和３０?ｐＭ）??处理组的促炎因子的ｍＲＮＡ水平明显降低（图５Ａ－Ｃ）。随后，我们运用蛋白??印迹技术检测ＩＬ－１［３、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ蛋白水平的表达情况，结果表明，在ＬＰＳ?（０．１??ｐｇ／ｍｌ）朿丨Ｊ激２４小时后的原代小胶质细胞中ＩＬ－１（３、ＩＬ－６、ＴＮＦ－ａ表达明显升高，??ＬＸ００７可明显降低促炎因子的表达，并呈剂量依赖性（图５Ｄ－Ｇ）。因此，在原??代小胶质细胞中，ＬＸ００７对ＬＰＳ诱导的炎症因子的表达有潜在的抑制作用。??Ｗ?ｉｉ－?Ｈ?Ｉ＊．．．．?Ｈ?｜（？??Ｐ：Ｌｉｌｉｉ?ｐ：Ｌ１ｍ??＋?＊＊?令令今?ＬＸ？０７?〇〇〇?屮办?０?爷屮?ＬＸＯＯＴ?（＾１）?口?＾?办夺＋?ＵＯＯ？?〇Ｍ）??ＬＰＳ?ＬＷ?（ｌＯＯｎｇ／ｍｌ）?｛ｌＯＯｎ＾ｎｒｒｉ）??Ｄ?Ｅｃ?Ｇｇ??ｔＰ￥?（ｉＱｔｅ＞ａｆｍｒ）?Ｉ?Ｊ?Ｉ??Ｕ（００７（ｐＭ）?Ｃｏｎ?３０?＂〇一＂＇１０￣￣２０￣￣Ｍ＊?ｇ?１５１?｜?，－Ｓ＊｜?｜?１－５＇??队．，霣「—?一灣?一?一｜?８？?＾?＾?｜｜?“?ｆ?｜?？？??ｆｃｌａＪＩｌｉ??５?ＬＭ?（１００＾０?ＬＰＳ｛１ＣＯ？＾／ｍｌ）?！?一??图５：?ＬＸ００７抑制ＬＰＳ处理小胶质细胞的ＩＬ－ｌｐ、ＩＬ－６和ＴＮＦ－ａ表达水平。（Ａ－Ｃ）??不同浓度的ＬＸ００７?（１０


本文编号：3213820