p27kip1在施万细胞分化中的作用研究
发布时间:2021-06-20 16:57
目的1.研究p27kip1在坐骨神经夹伤过程中的表达变化及细胞定位情况,初步探讨p27kip1与坐骨神经夹伤后施万细胞分化的关系。2.研究p27kip1在施万细胞分化中的表达变化及其调控机制,明确p27kip1在施万细胞分化中的作用。方法1.构建SD大鼠坐骨神经夹伤模型,通过Western blot、免疫荧光等方法观察p27kip1在坐骨神经夹伤后的表达变化、组织分布与细胞定位,结合施万细胞生物学行为,初步明确p27kip1在施万细胞分化过程中的作用。2.分离培养施万细胞,建立环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)诱导的施万细胞分化模型,分析施万细胞分化过程中p27kip1的表达变化及其细胞定位改变。在此基础上,进一步通过干预p27kip1的表达,分析其在施万细胞分化过程中的作用,如形态学改变、分化标记表达的影响。结果1.在大体水平,Western blot结果显示在坐骨神经夹伤之后,p27kip1表达明显下调,于1d达到最低,后逐渐上调,在1W达到最高,然后下调,在4W恢复正常。分化指标P0在损伤后逐渐上调,于1w达到最高。免疫荧光双标...
【文章来源】:南通大学江苏省
【文章页数】:67 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
目录
摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 课题来源、研究的目的和意义
1.2 国内外研究概况
1.2.1 国外研究概况
1.2.2 国内研究概况
1.3 论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
2.1 研究资料及仪器设备
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要仪器与试剂
主要仪器
主要试剂
2.2 实验流程与方法
2.2.1 建立大鼠坐骨神经夹伤模型
2.2.2 标本处理及冰冻切片
2.2.3 Western blot
2.2.4 免疫组织荧光
2.2.5 大鼠原代施万细胞的培养及纯化
2.2.6 p27kip1基因RNA干扰质粒的构建与鉴定
2.2.7 细胞增殖分析
2.2.8 利用脂质体转染施万细胞
2.2.9 细胞免疫荧光
2.2.10 统计学处理
第三章 结果
3.1 p27kip1在夹伤后坐骨神经中的表达变化
3.2 p27kip1在大鼠坐骨神经中细胞的定位
3.3 施万细胞体外分化过程中p27kip1的表达变化
3.4 p27kip1在cAMP诱导的施万细胞的变化中的作用
3.5 p27kip1在施万细胞分化过程中的亚细胞定位
3.6 p27Klp1在施万细胞分化过程中量的调节
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
英文缩写词表
综述
综述参考文献
在攻读硕士学位期间公开发表的论文
致谢
附文一
附文二
本文编号:3239583
【文章来源】:南通大学江苏省
【文章页数】:67 页
【学位级别】:硕士
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摘要
Abstract
第一章 绪论
1.1 课题来源、研究的目的和意义
1.2 国内外研究概况
1.2.1 国外研究概况
1.2.2 国内研究概况
1.3 论文的主要研究内容
第二章 材料与方法
2.1 研究资料及仪器设备
2.1.1 研究对象
2.1.2 主要仪器与试剂
主要仪器
主要试剂
2.2 实验流程与方法
2.2.1 建立大鼠坐骨神经夹伤模型
2.2.2 标本处理及冰冻切片
2.2.3 Western blot
2.2.4 免疫组织荧光
2.2.5 大鼠原代施万细胞的培养及纯化
2.2.6 p27kip1基因RNA干扰质粒的构建与鉴定
2.2.7 细胞增殖分析
2.2.8 利用脂质体转染施万细胞
2.2.9 细胞免疫荧光
2.2.10 统计学处理
第三章 结果
3.1 p27kip1在夹伤后坐骨神经中的表达变化
3.2 p27kip1在大鼠坐骨神经中细胞的定位
3.3 施万细胞体外分化过程中p27kip1的表达变化
3.4 p27kip1在cAMP诱导的施万细胞的变化中的作用
3.5 p27kip1在施万细胞分化过程中的亚细胞定位
3.6 p27Klp1在施万细胞分化过程中量的调节
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
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综述
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在攻读硕士学位期间公开发表的论文
致谢
附文一
附文二
本文编号:3239583
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