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基于干细胞巢调控的人参皂苷对缺血/再灌注神经干细胞增殖、分化的作用及其机制

发布时间:2021-07-13 17:17
  目的研究人参皂苷通过作用于神经干细胞巢(NSCs niche)内的神经干细胞(NSCs)、星形胶质细胞(AC)和脑微血管内皮细胞(EC),对缺血/再灌注(OGD/R)后的NSCs增殖、分化的影响以及HIF-1α-VEGF信号通路的调节机制。方法1孕15-17d的SD大鼠,体外分离培养胎鼠海马NSCs,采用免疫荧光染色法对NSCs特异性标志物Nestin进行鉴定,NSCs增殖标记物BrdU进行增殖鉴定,神经元祖细胞特异性标记物Tuj-1及星形胶质细胞的祖细胞特异性标记物Vimentin对NSCs进行分化鉴定。新生1-3d SD大鼠,体外分离培养星形胶质细胞,采用免疫荧光染色法对星形胶质细胞的特异性标志物GFAP进行鉴定。新生1-3d SD大鼠,体外分离培养脑微血管内皮细胞,采用免疫荧光染色法对脑微血管内皮细胞的特异性标志物Factor Ⅷ进行鉴定。2 MTS法测定人参皂苷促进NSCs、星形胶质细胞及脑微血管内皮细胞增殖的最佳剂量及最佳给药时间点。3携带GFP基因的慢病毒转染NSCs,观察GPF的阳性表达率来确定NSCs的转染率,筛选出慢病毒转染NSCs的最佳转染指数MOI值及最佳转染时间... 

【文章来源】:北京中医药大学北京市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:247 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

基于干细胞巢调控的人参皂苷对缺血/再灌注神经干细胞增殖、分化的作用及其机制


图1人参皂昔在不同浓度时对培养3d的NSCs吸光值的影响(苗s,n=8?)??

吸光值,浓度,对照组,吸光


基于千细胞巢调控的人参皂昔对缺血/再灌注神经干细胞增殖、分化的作用及其机制2人参皂巧在不同时间点、同一浓度(l.OO^t^iL)?对NSCs吸光值的影响(;±s,n=8?)??组? ̄?时间(h)?对照组吸光值?人参皂脊组吸光 ̄?'??1?0.204±0.006?0.209±0.005??3?0.220±0.009?0.233±0.009??6?0.23化0.007?0.26紅?0,006??12?0.381±0.009?0.421±0.006**??24?〇.420±〇.〇〇6?0.468±0.007**??48?0.468±0.005?0.482±〇.〇〇9??72?0.462±0.005?0.476±0.006??%?0.476^0.007?0.483±0,008???与对照组相比:戶<0.01??-人参皂样‘组??

星形胶质细胞,吸光值,增殖作用,对照组


3实验结果??3.1人参皂昔对星形胶质细胞增殖的影响??3丄1由表1、图1可看出人参皂巧在12.5(Hig/mL的浓度时,所须!1得的吸光值最高,对??星形胶质细胞增殖作用最强,与对照组相比,差异具有统计学意义(戶<0.05,尸<0.00,??浓度从lOO.OOng/mL开始,人参皂昔促进星形胶质细胞的増殖作用随浓度的升高而减弱。??表1人参皂巧在不同浓度时对培养3d星形胶质细胞吸光值的影响(苗S,?n=8?)??(ngfaL)?吸光值??0?(对照组)?0.64虹0.0884??0.25?0倘3±0.口78??0.50?0乂?84±0.0780??1.00?0.724±0.1032??2.50?0.747±0.0760*??6.25?0.755±0.1194*??12.50?0.799±0.0845**??25.00?0.731±0.0%6??50.00?0.740±0.0625??100.00?0.716±0.0803??200.00

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本文编号:3282472

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