小分子化合物诱导骨髓间充质干细胞类神经分化的实验研究

发布时间：2021-07-22 23:27

　　目的探讨小分子化合物组合（Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021）诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）类神经分化的可行性。方法全骨髓贴壁法分离大鼠BMSCs,流式细胞仪鉴定细胞。培养细胞至第3代,以含有Forskolin的神经元培养基预诱导1d,再以含有Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021的神经元培养基正式诱导3d。以神经元培养基为对照组。通过观察细胞形态、免疫荧光检测、Western blotting技术对类神经分化细胞进行鉴定。结果大鼠BMSCs以梭形细胞为主,可见长短不一的突起;经流式细胞仪鉴定,CD90、CD105表达呈阳性,而CD34和CD45表达呈阴性。诱导后,细胞有神经样形态改变,免疫荧光检测到神经元特异性烯醇化酶（NSE）、巢蛋白（Nestin）阳性表达,诱导3d后Western blotting显示实验诱导组与对照组比较,NSE、Nestin和SOX1表达增多（P<0.05）。结论小分子化合物组合（Forskolin、SB431542、DMH1、CHIR99021）可诱导BMSCs类神经分化。 

【文章来源】：中国现代医学杂志. 2020,30(19)

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

诱导后细胞神经特异性蛋白表达水平比较

诱导第1天,可见少数细胞折光性变强,有较长突起;诱导第2天,细胞形态变化更加明显,突触伸长,形成分支,并交织成网,呈神经细胞样形态,折光性更加明显;诱导第3天,突起增多,相互连接成网。见图3。2.3 免疫荧光鉴定BMSCs诱导后蛋白表达

Western blotting检测细胞神经特异性蛋白的表达水平,结果显示:NSE表达水平从对照组(0.463±0.154)上调至实验诱导组(0.918±0.232),Nestin表达水平从对照组(0.602±0.207)上调至实验诱导组(1.616±0.337),SOX1表达水平从对照组(0.510±0.187)上调至实验诱导组(1.272±0.328),组间比较,差异有统计学意义(t=2.822、4.443和3.503,P=0.048、0.011和0.025)。见图5。图3 BMSCs诱导过程中细胞形态变化

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3298113