MRTF-A诱导自噬缓解脑缺血再灌注大鼠神经细胞损伤
发布时间：2021-07-27 10:39
目的:研究转录因子MRTF-A诱导自噬缓解脑缺血再灌注大鼠神经细胞损伤的相关分子机制。方法:1、慢病毒感染脑室最佳条件摸索:（1）35只SD大鼠随机均分为7组:对照组,高表达5、7、9天组,抑制表达5、7、9天组。按1.6×106TU/只注射剂量,对照组注射慢病毒空载体,高表达组注射高表达MRTF-A慢病毒,抑制表达组注射抑制表达MRTF-A慢病毒。注射后分别在第5、7、9天取脑组织,Western blot检测MRTF-A表达水平,确定慢病毒感染脑室的最佳时间。（2）20只SD大鼠随机均分为4组:对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。对照组注射慢病毒空载体（1.6×106TU/只）,低、中、高剂量组分别按0.8×106TU/只、1.6×106TU/只、2.4×106TU/只注射高表达MRTF-A慢病毒。7天后取脑组织做冰冻切片,观察MRTF-A的荧光表达水平,确定慢病毒注射最佳剂量。（3）20只SD大鼠随机均分为4组:对照组、P1组（前囟后1.72mm,矢状缝旁开1mm,深度...
【文章来源】：武汉科技大学湖北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MRTFs家族蛋白及主要功能区及主要结合区域[9]
慢病毒感染时间对MRTF-A蛋白表达的影响
武汉科技大学硕士学位论文12图3慢病毒注射剂量对MRTF-A的荧光表达水平的影响。N.S.P＞0.05，*P＜0.05或**P＜0.01，vsSham，n=5。3.3LV-MRTF-A注射位点效应关系SD大鼠分别在右侧大脑注射位点P1（前囟后1.72mm，矢状缝旁开1mm，深度2.6mm）、注射位点P2（前囟后1.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）、注射位点P3（前囟后0.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）注射高表达MRTF-A慢病毒（1.6×106TU/只），注射后第7天取脑进行冰冻切片，用显微镜玻片扫描仪观察MRTF-A表达水平。结果显示：慢病毒注射后逐渐扩散至全脑（图4A），MRTF-A荧光表达水平显著高于假手术组（P＜0.05）；P1、P2与P3组间MRTF-A表达水平无显著差异（P＞0.05）（图4B）。结合脑缺血再灌注模型的损伤部位，后续实验选择慢病毒的注射位点为：P2（前囟后1.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）。图4慢病毒注射位点对MRTF-A的荧光表达水平的影响。红色箭头表示注射位点，N.S.P＞0.05，**P＜0.01，vsSham，n=5。
【参考文献】：
期刊论文
[1]1990和2017年中国与全球心血管病疾病负担研究[J]. 王媛,曹新西,侯亚冰,徐晨婕,曹志,李书,王耀刚. 中国慢性病预防与控制. 2020(01)
[2]《中国心血管病报告2018》概要[J]. 胡盛寿,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,陈伟伟. 中国循环杂志. 2019(03)
[3]黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响[J]. 李媛,靳晓飞,周晓红,高维娟. 中国病理生理杂志. 2018(11)
[4]CART肽抑制缺血再灌注小鼠脑组织水通道蛋白4表达并减轻脑水肿[J]. 傅兴宁,刘丽冰,张志杰,师婷,祝世功. 中国病理生理杂志. 2018(08)
[5]黄芩苷药代动力学研究进展[J]. 周红潮,杜锐,王慧,曾范利,时坤,李建明,宗颖. 中国中药杂志. 2018(04)
[6]Baicalin protects neonatal rat brains against hypoxicischemic injury by upregulating glutamate transporter 1 via the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B signaling pathway[J]. Zhi-qing Zhou,Yong-liang Li,Zhen-bo Ao,Zhi-li Wen,Qi-wen Chen,Zheng-gang Huang,Bing Xiao,Xiao-hua Yan. Neural Regeneration Research. 2017(10)
[7]黄芩苷改善Aβ25-35诱导的小鼠学习和记忆障碍及可能机制[J]. 肖弯,曹晓璐,张容,高成志,杜晶,殷婷子,张颖,洪星,胡霞敏,任波. 中国药理学与毒理学杂志. 2017(01)
[8]Pretreatment with Baicalin Attenuates Hypoxia and Glucose Deprivation-Induced Injury in SH-SY5Y Cells[J]. 周庆博,鞠小宁,王晓云,王美红,孔峰,孙超,毕建忠. Chinese Journal of Integrative Medicine. 2016(03)
[9]液质联用法测定不同贮存期黄芩中6种黄酮类化合物含量[J]. 徐杨璐,赵胜男,刘素丽,李守拙. 医药导报. 2015(07)
[10]Bcl-2/Beclin-1复合体在自噬中的调节作用[J]. 叶挺,邵增务. 中国生物化学与分子生物学报. 2013(06)
硕士论文
[1]黄芩苷后处理调控AKT-自噬途径保护脑缺血/再灌注损伤的实验研究[D]. 石瑶.重庆医科大学 2015
本文编号：3305624
【文章来源】：武汉科技大学湖北省
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
MRTFs家族蛋白及主要功能区及主要结合区域[9]
慢病毒感染时间对MRTF-A蛋白表达的影响
武汉科技大学硕士学位论文12图3慢病毒注射剂量对MRTF-A的荧光表达水平的影响。N.S.P＞0.05，*P＜0.05或**P＜0.01，vsSham，n=5。3.3LV-MRTF-A注射位点效应关系SD大鼠分别在右侧大脑注射位点P1（前囟后1.72mm，矢状缝旁开1mm，深度2.6mm）、注射位点P2（前囟后1.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）、注射位点P3（前囟后0.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）注射高表达MRTF-A慢病毒（1.6×106TU/只），注射后第7天取脑进行冰冻切片，用显微镜玻片扫描仪观察MRTF-A表达水平。结果显示：慢病毒注射后逐渐扩散至全脑（图4A），MRTF-A荧光表达水平显著高于假手术组（P＜0.05）；P1、P2与P3组间MRTF-A表达水平无显著差异（P＞0.05）（图4B）。结合脑缺血再灌注模型的损伤部位，后续实验选择慢病毒的注射位点为：P2（前囟后1.72mm，矢状缝旁开2mm，深度2.6mm）。图4慢病毒注射位点对MRTF-A的荧光表达水平的影响。红色箭头表示注射位点，N.S.P＞0.05，**P＜0.01，vsSham，n=5。
【参考文献】：
期刊论文
[1]1990和2017年中国与全球心血管病疾病负担研究[J]. 王媛,曹新西,侯亚冰,徐晨婕,曹志,李书,王耀刚. 中国慢性病预防与控制. 2020(01)
[2]《中国心血管病报告2018》概要[J]. 胡盛寿,高润霖,刘力生,朱曼璐,王文,王拥军,吴兆苏,李惠君,顾东风,杨跃进,郑哲,陈伟伟. 中国循环杂志. 2019(03)
[3]黄芪甲苷对脑缺血/再灌注损伤大鼠细胞自噬的影响[J]. 李媛,靳晓飞,周晓红,高维娟. 中国病理生理杂志. 2018(11)
[4]CART肽抑制缺血再灌注小鼠脑组织水通道蛋白4表达并减轻脑水肿[J]. 傅兴宁,刘丽冰,张志杰,师婷,祝世功. 中国病理生理杂志. 2018(08)
[5]黄芩苷药代动力学研究进展[J]. 周红潮,杜锐,王慧,曾范利,时坤,李建明,宗颖. 中国中药杂志. 2018(04)
[6]Baicalin protects neonatal rat brains against hypoxicischemic injury by upregulating glutamate transporter 1 via the phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B signaling pathway[J]. Zhi-qing Zhou,Yong-liang Li,Zhen-bo Ao,Zhi-li Wen,Qi-wen Chen,Zheng-gang Huang,Bing Xiao,Xiao-hua Yan. Neural Regeneration Research. 2017(10)
[7]黄芩苷改善Aβ25-35诱导的小鼠学习和记忆障碍及可能机制[J]. 肖弯,曹晓璐,张容,高成志,杜晶,殷婷子,张颖,洪星,胡霞敏,任波. 中国药理学与毒理学杂志. 2017(01)
[8]Pretreatment with Baicalin Attenuates Hypoxia and Glucose Deprivation-Induced Injury in SH-SY5Y Cells[J]. 周庆博,鞠小宁,王晓云,王美红,孔峰,孙超,毕建忠. Chinese Journal of Integrative Medicine. 2016(03)
[9]液质联用法测定不同贮存期黄芩中6种黄酮类化合物含量[J]. 徐杨璐,赵胜男,刘素丽,李守拙. 医药导报. 2015(07)
[10]Bcl-2/Beclin-1复合体在自噬中的调节作用[J]. 叶挺,邵增务. 中国生物化学与分子生物学报. 2013(06)
硕士论文
[1]黄芩苷后处理调控AKT-自噬途径保护脑缺血/再灌注损伤的实验研究[D]. 石瑶.重庆医科大学 2015
本文编号：3305624
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