ER-α36在雌激素对缺血损伤的PC12细胞保护中的作用
发布时间：2021-07-29 10:39
众所周知,雌激素（β-estradiol,E2β）在中枢神经系统中具有神经营养和神经保护作用。近年来发现,雌激素能够降低神经元兴奋性,减少超氧化物歧化酶的产生,维持血脑屏障功能,从而保护缺血再灌注损伤以及改善学习记忆功能等。通常雌激素与雌激素受体（estrogen receptor,ER）结合发挥生物学效应。雌激素受体是类固醇激素受体超家族的成员之一,能够与雌激素特异性结合,通过基因组或非基因组作用模式调控靶基因的转录或激活细胞内信号转导,从而改变细胞内蛋白功能和调控基因表达,但其类固醇信号转导机制（MISS）不详。流行病学研究显示,绝经前女性缺血性脑卒中发病率低于男性,而绝经后女性的脑卒中发病率与男性相同,但是给予雌激素治疗效果不明显,其原因不详[1,39]。新近发现,雌激素受体新亚型ER-α36可以介导膜起始的雌激素信号转导,在乳腺、子宫内膜、卵巢等雌激素靶组织以及肝、淋巴细胞等非经典的雌激素靶组织中发挥重要作用。我们前期发现,ER-α36在神经细胞中也有表达,但是作用尚不清楚。本文以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12细胞）为研究对象,利用shRNA干扰技术敲...
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺糖对细胞存活和凋亡的影响（A.缺糖损伤不同时间细胞的相对存活率；B.缺糖不同时间对葡萄糖转运蛋白Glut-4表达的影响；C.流式细胞仪检测不同时间缺糖损伤对细胞凋亡的影响
PC12 细胞的 ER-α36 表达水平较高，而 ER-α66 的表达水平则较低（图2.2A）；细胞缺糖 3 h 时，ER-α36 明显减少低于对照，随后又逐渐升高，9 h 时与对照组比无明显差异（图 2.2B）；抗凋亡蛋白 Akt 在 3 h 时被激活，6 h 以后磷酸化水平开始降低；缺糖处理 6 h，加入 PI3K 通路抑制剂 LY 294002，ER-α36 表达水平降低（图 2.2C），Akt激活被抑制（图 2.2D）。图 2.2 缺糖损伤对 ER-α36、p-Akt 表达的影响（A. PC12 细胞和 MCF-7 细胞中 ER-α 和 ER-α36 的表达；B. 缺糖损伤对 ER-α36 表达的影响；C. 缺糖损伤 6 h 加入 LY 294002 对 ER-α36 和 p-Akt 表达的影响。MEM:glucose deprivation 6 h；LY: LY 294002，Means ± SD
敲低 ER-α36 降低了 PC12 细胞缺糖耐受性，促进细胞凋亡。Western blot 结果显示（图2.3B），PC12 细胞缺糖处理 3 h 时 Akt 被激活，并能持续到 6 h；而敲低 ER-α36 后，同样在 3 h 激活 Akt，6 h 后 p-Akt 的表达较野生型细胞相比却明显降低（图 2.3B,C）（p<0.05）。此外，敲低 ER-α36 较野生型细胞相比，Caspase-3 在 6 h 时表达增加（p<0.05）（图 2.3D）。以上结果显示，敲低 ER-α36 与 Akt 激活细胞缺糖损伤中具有相关性。A
【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素受体ERα36基因敲低影响PC12细胞分化相关蛋白的表达[J]. 马依妮,韩丹女,徐祎慧,韩朝,梁小峰,刘晶,嵇志红,邹萍,王兆一,邹伟. 生理学报. 2012(03)
[2]Effect of aminoguanidine on caspase-3 expression in rat retina after ischemia-reperfusion injury[J]. Yang Yang 1,Jing-Zhu Duan 2,Dong-Mei Gui 1,Hong-Wei Yang 1,Dian-Wen Gao1 1Department of Ophthalmology,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110021,Liaoning Province,China 2Department of Orthopaedics,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110021,Liaoning Province,China. International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2011(03)
[3]SHIP基因诱导白血病细胞株K562凋亡及其机制[J]. 杨琳,罗建民,刘小军,温树鹏,杜行严,姚丽,杨敬慈. 生理学报. 2009(02)
本文编号：3309175
【文章来源】：辽宁师范大学辽宁省
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
缺糖对细胞存活和凋亡的影响（A.缺糖损伤不同时间细胞的相对存活率；B.缺糖不同时间对葡萄糖转运蛋白Glut-4表达的影响；C.流式细胞仪检测不同时间缺糖损伤对细胞凋亡的影响
PC12 细胞的 ER-α36 表达水平较高，而 ER-α66 的表达水平则较低（图2.2A）；细胞缺糖 3 h 时，ER-α36 明显减少低于对照，随后又逐渐升高，9 h 时与对照组比无明显差异（图 2.2B）；抗凋亡蛋白 Akt 在 3 h 时被激活，6 h 以后磷酸化水平开始降低；缺糖处理 6 h，加入 PI3K 通路抑制剂 LY 294002，ER-α36 表达水平降低（图 2.2C），Akt激活被抑制（图 2.2D）。图 2.2 缺糖损伤对 ER-α36、p-Akt 表达的影响（A. PC12 细胞和 MCF-7 细胞中 ER-α 和 ER-α36 的表达；B. 缺糖损伤对 ER-α36 表达的影响；C. 缺糖损伤 6 h 加入 LY 294002 对 ER-α36 和 p-Akt 表达的影响。MEM:glucose deprivation 6 h；LY: LY 294002，Means ± SD
敲低 ER-α36 降低了 PC12 细胞缺糖耐受性，促进细胞凋亡。Western blot 结果显示（图2.3B），PC12 细胞缺糖处理 3 h 时 Akt 被激活，并能持续到 6 h；而敲低 ER-α36 后，同样在 3 h 激活 Akt，6 h 后 p-Akt 的表达较野生型细胞相比却明显降低（图 2.3B,C）（p<0.05）。此外，敲低 ER-α36 较野生型细胞相比，Caspase-3 在 6 h 时表达增加（p<0.05）（图 2.3D）。以上结果显示，敲低 ER-α36 与 Akt 激活细胞缺糖损伤中具有相关性。A
【参考文献】：
期刊论文
[1]雌激素受体ERα36基因敲低影响PC12细胞分化相关蛋白的表达[J]. 马依妮,韩丹女,徐祎慧,韩朝,梁小峰,刘晶,嵇志红,邹萍,王兆一,邹伟. 生理学报. 2012(03)
[2]Effect of aminoguanidine on caspase-3 expression in rat retina after ischemia-reperfusion injury[J]. Yang Yang 1,Jing-Zhu Duan 2,Dong-Mei Gui 1,Hong-Wei Yang 1,Dian-Wen Gao1 1Department of Ophthalmology,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110021,Liaoning Province,China 2Department of Orthopaedics,Shengjing Hospital,China Medical University,Shenyang 110021,Liaoning Province,China. International Journal of Ophthalmology（English Edition）. 2011(03)
[3]SHIP基因诱导白血病细胞株K562凋亡及其机制[J]. 杨琳,罗建民,刘小军,温树鹏,杜行严,姚丽,杨敬慈. 生理学报. 2009(02)
本文编号：3309175
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/shenjingyixue/3309175.html
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