丙戊酸提高小分子化合物阶段诱导神经干细胞的重编程效率和神经元分化与mTOR信号激活有关

发布时间：2021-08-25 11:25

　　研究背景神经干细胞（NSCs）的发现为许多伴有神经元丢失的神经系统疾病提供新的治疗途径。然而,NSCs来源是目前研究面临的一大难题。现对外源性神经干细胞来源的研究主要关注体细胞诱导的NSCs,因其诱导周期短,且不经过多能干细胞阶段致瘤性低,是目前安全高效的神经干细胞来源。其中用小分子化合物（SM）对特定细胞通路的抑制或激活,使体细胞诱导为神经干细胞,安全性高,是目前最具研究前景的神经干细胞来源。本研究通过文献阅读和前期预实验,筛选出7种小分子化合物,但发现其共同作用会引起细胞大量死亡。故结合体细胞重编程为NSCs的规律和SM作用通路的特点,以及预实验结果,我们在不同阶段采用不同的SM,以减少每阶段SM的使用和提高诱导效率获得阶段小分子化合物诱导的神经干细胞（SMSINS）。此外,在诱导方案探索阶段,我们发现丙戊酸（VPA）,作为诱导方案中其中一种小分子化合物,其在增强NSCs诱导效率和神经元分化方面显示出最显著的作用,可能与VPA对mTOR信号通路的激活有关。因此,我们提出研究假设:VPA明显提高诱导神经干细胞（iNSCs）诱导效率,使iNSCs能更好向神经元分化,可能与mTOR信号的... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１原代提取ＭＥＦｓ的特征

天细胞出现中心聚集现象，且细胞数逐渐增多，形成细胞巢团状聚集中心（图??ｌｂ）。诱导１０天结束后将ＳＭＳＩＮＳ细胞接种在ＰＤＬ／Ｌ孵育过的培养板上，用ＮＳＣｓ??标志蛋白Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２行免疫荧光检测（图２ｂ－ｃ）。为了更好比较ＳＭＳＩＮＳ的??神经干细胞特点，遂从胚胎小鼠脑中分离天然ＮＳＣｓ细胞，作为本实验的阳性对??照，将诱导的ＳＭＳＩＮＳ细胞的特点与其对比。为了进一步定量分析诱导ＳＭＳＩＮＳ??细胞的神经干性特征，用流氏细胞学（ＦＡＣＳ）的方法检测ＳＭＳＩＮＳ细胞和ＮＳＣｓ??的Ｎｅｓｔｉｎ和Ｓｏｘ２的表达，结果显示天然ＮＳＣｓ的Ｎｅｓｔｉｎ表达略高于ＳＭＳＩＮＳ，??但其Ｓｏｘ２表达略低于ＳＭＳＩＮＳ?（图２ｄ）。??２３??

图３?ＳＭＳＩＮＳ具有类似ＮＳＣｓ的特征

【参考文献】：
期刊论文
[1]内源性神经干细胞的调控[J]. 楼琼,王晓梅.  医学综述. 2017(18)
[2]TGF-β信号传导通路及其生物学功能[J]. 刘镕,赵琴平,董惠芬,蒋明森.  中国病原生物学杂志. 2014(01)



本文编号：3362028