PTEN通过拮抗PI3K/Akt信号通路抑制神经干细胞增殖

发布时间：2021-08-31 03:29

　　目的探讨PTEN抑制神经干细胞增殖的作用,以阐明是否可以通过抑制PTEN蛋白表达来促进神经干细胞增殖。方法取新生24h昆明小鼠海马组织,分离培养原代神经干细胞,并采用免疫荧光检测鉴定;将所培养的传代神经干细胞随机分组:正常组、缺血模型组、低氧组（低氧+缺血模型组）、Lip2000组（低氧+缺血模型组+Lip2000空转染组）、PTEN转染组（低氧+缺血模型组+Ad5-PTEN转染组）、PTEN干扰组（低氧+缺血模型组+Lip2000+PTENsiRNA干扰组）,检测0、6、24、36、48h不同时间点各组神经干细胞的增殖情况,同时检测PTEN转染后PTEN蛋白在各组神经干细胞的表达情况,以及对PI3K-Akt信号通路上标志性蛋白表达的影响。结果免疫荧光检测Nestin以鉴定神经干细胞球,在荧光显微镜下观察到绿色明亮且典型的细胞球,球内可见清晰结构。MTT测定发现低氧组、Lip2000组培养36h时神经干细胞出现明显增殖,与模型组、PTEN转染组及PTEN干扰组相比,差异有统计学意义（P<0.05）,其中PTEN干扰组的细胞增殖又较模型组、PTEN转染组明显,差异亦有统计学意义（P... 

【文章来源】：西安交通大学学报(医学版). 2016,37(02)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1动物与试剂
    1.2小鼠神经干细胞的分离、培养及鉴定
    1.3免疫荧光鉴定海马组织原代神经干细胞
    1.4缺血缺氧细胞模型的制备[5]及实验分组
    1.5 PTEN RNA干扰(RNAi)技术及转染
    1.6 MTT法测神经干细胞增殖情况
    1.7 Western blot检测PTEN、PI3K、Akt、bad、p-Akt、p-bad蛋白表达情况
    1.8统计学分析
2 结果
    2.1神经干细胞的免疫荧光鉴定
    2.2 MTT法测定神经干细胞增殖情况
    2.3不同组别神经干细胞PTEN的表达情况
    2.4转染PTEN对细胞中PI3K、Akt、bad以及p-Akt、p-bad表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]PTEN、E-cd和MMP-9在人脑胶质瘤的表达和意义[J]. 张军普,许雯,刘向辉.  山东大学学报(医学版). 2010(02)



本文编号：3374099