诱导性多能干细胞和远期短期脑缺血预适应对动脉损伤的治疗作用及其机制

发布时间：2021-09-27 19:29

　　目前,来源于体细胞的诱导性多功能干细胞（iPS）细胞类似于胚胎干细胞,可以表达多功能性的标志物且在体内外都具有分化为三个胚层细胞的潜能,但胚胎干细胞应用于人体存在伦理学和免疫排异问题,而iPS细胞不存在伦理学问题又具备胚胎干细胞的生物特性,同时从患者自身的细胞制备而来,所以具有广泛的应用前景。我们前期研究发现,介导iPS细胞与血管内皮细胞粘附的整合素p亚基主要是整合素β1。文献提示,microRNA-217在细胞运动、血管内皮祖细胞分化和血管新生中起重要作用。因此我们以小鼠股动脉内膜损伤为模型,研究iPS细胞在血管内膜损伤中的作用及其机制。第一部分：在成功制备出诱导性多能干细胞的前提下进行体内研究。C57BL/6J8-10周龄雄性小鼠,每组动物都复制标准金属丝擦伤股动脉内膜损伤模型,然后分别于术后当天和术后第三天从尾静脉注射PBS、MEF（胚胎成纤维细胞）、iPS,细胞剂量为6*104个/次/200μl,动物的观察周期为3周,为了明确iPS细胞进入动物体内后的去向,我们采用术后从小鼠尾静脉注射带红色荧光染料PKH的iPS细胞,观察24h后留取股动脉,共聚焦荧光显微镜观察iPS细胞在血管... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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点是其在边缘区脑组织的表达量多于梗死区脑组织。高倍镜下观察HO-l蛋白主要分布于神经元细胞，胶质细胞的胞质胞膜和胞装(图2A-B);而它的相对表达量是通过Western blotting方法检测来衡量的，发现H0-1蛋白在边缘区脑组织的表达量明显高于梗死区脑组织；Znpp可使缺血预处理后H0-1的表达量明显增加，原因可能是Znpp抑制H0-1的表达活性反馈性引起其表达量地增加。而IPC 20min组用Hemin处理后HO-l的表达量相比其它组(除了用DPCPX处理过的动物组外）都明显减少，而后者发挥对脑组织的保护作用可能是Hemin大大地增加了 H0-1的生物活性以及短时间缺血预处理后引起腺苷A1受体的表达量增加共同发挥保护作用。Western bk)t结果显示DPCPX可使HO-l蛋白的表达量明显降低；Znpp可使缺血预处理后H0-1的表达量增加（图2 C-D)。除DPCPX处理过的各组外，H0-1在处理过的IPC2S表达量都相对较高，其主要原因可能缺血缺氧诱导内质网应激反应引起缺血区域脑组织HO-l的表达量明显增加有关，内质网应激反应(Endoplasmic Reticulum Stress，ERS)是机体最常见的一种自我保护的反映机制

A2a的分布情况进行检测，发现腺苷受体A2a在各组动物的边缘区脑组织的表达量明显高于其梗死区脑组织（图4A)；但根据Western blot方法检测发现各组动物的边缘区脑组织的腺苷受体A2a表达量之间无明显差异（图4 C)。同时，Westernblot结果也显示DPCPX可使梗死区脑组织腺苷受体A2a蛋白的表达量比其他组明显降低（图4B)。同样，经Hemin处理过的实验组动物的梗死区脑组织腺苷受体A2a蛋白表达量较对照组相对增加（图4B)。其原因与缺血预处理所产生腺苷受体A1发挥保护作用有关外，可能与后期MCAO模型制作中缺血缺氧因素密切相关，腺苷表达量的增加主要诱导因素是缺血缺氧。同时，内质网应激反应引起H0-1表达增加，和腺苷受体之间共同发挥保护作用。图4 A 各组动物左侧脑组织A2aR蛋白的分布、議;Ilk 晴,,,?IPC2S+PBS IPC2S+Hem丨n IPC 2S+Znpp 丨PC 2S+DPCPX一 r■.? 丨..?.? ■. - .. '二I ■ ‘ ?，--[：‘ -■ ?,：：？ ^u.1 ? . M. ? \1 ? ?? ? S ?.V . — i j /

【参考文献】：
期刊论文
[1]细胞粘附分子与心脑血管疾病研究进展[J]. 张健,张芹.  长江大学学报(自科版)医学卷. 2008(03)



本文编号：3410497