胶质瘤干细胞诱导神经胶质细胞癌变及相关机制研究

发布时间：2021-09-29 10:58

　　第一部分胶质瘤干细胞诱导宿主脑胶质细胞癌变的实验研究目的：探讨人胶质瘤干细胞在裸鼠脑内组织重构过程中，肿瘤干细胞与宿主神经细胞的相互作用。方法：将红色荧光蛋白（RFP）基因稳定转染到已建株的人胶质瘤干细胞SU3，再将转染RFP的SU3细胞（SU3-RFP）接种于表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠脑内。获取移植瘤组织，筛选增殖能力强的GFP细胞，单克隆化后，鉴定细胞类型，测定细胞DNA含量，行染色体显带分析。并将建系的GFP细胞H1和H9分别接种于裸小鼠腋下和颅内，观察这两株细胞的致瘤率和相关癌性表型。结果：在接种30天后的移植瘤组织中，RFP、GFP、RFP/GFP细胞的比例分别为（88.99±1.46）%、（5.59±0.68）%和（4.11±1.02）%。经二次单克隆化的宿主GFP细胞株H1、H9，在体外表现出无限增殖、接触抑制消失、超四倍体等癌细胞特征，并且表达少突胶质细胞特异性标志物2′，3′-环腺苷酸-3′-磷酸二酯酶（CNP）。H1和H9细胞在裸鼠体内致瘤率均为100%，且肿瘤细胞均向临近组织广泛浸润性生长。结论在可移植性胶质瘤模型中的肿瘤细胞，并非像传统观点那样均来源于移... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：53 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

SU3-RFP细胞稳定高表达红色荧光蛋白

（a） （b）3-RFP/GFP 裸小鼠原位移植瘤，a：多模式小动物活体成像系统显示，移植瘤可见，发红色荧光的肿瘤位于小鼠大脑右侧半球；b：共聚焦显微镜下可见，肿瘤细胞与宿主细胞因发出不同荧光而清晰可辨 ×200。再培养细胞的荧光示踪效果：移植瘤细胞经过再培养，具有增殖能长。在荧光相差显微镜下，发出不同荧光的 3 类细胞清晰可辨：（1SU3-RFP 子代细胞，简称 RFP 细胞；（2）发绿色荧光的宿主细胞，3）少量共表达红色荧光和绿色荧光的融合细胞，显示为黄色荧光细P 细胞（图 3）。在流式细胞仪上测得这 3 类细胞的比例依次为（88.959±0.68）%和（4.11±1.02）%。

（a） （b原位移植瘤，a：多模式小动物活体成的肿瘤位于小鼠大脑右侧半球；b：共胞因发出不同荧光而清晰可辨 ×200。光示踪效果：移植瘤细胞经过再培显微镜下，发出不同荧光的 3 类细，简称 RFP 细胞；（2）发绿色荧色荧光和绿色荧光的融合细胞，显流式细胞仪上测得这 3 类细胞的4.11±1.02）%。

【参考文献】：
期刊论文
[1]Differentiation profile of brain tumor stem cells:a comparative study with neural stem cells[J]. Quan Bin Zhang~1 Xiao Yan Ji~1 Qiang Huang~1 Jun Dong~1 Yu De Zhu~1 Qing Lan~1 Neurosurgical Department and Brain Tumor Research Laboratory,Second Affiliated Hospital of Suzhou Universiry,Suzhou 215004,China.  Cell Research. 2006(12)
[2]人脑胶质瘤干细胞移植于表达绿色荧光蛋白裸小鼠的研究[J]. 吴自成,黄强,邵义祥,薛智谋,董军,刁艺,王爱东,兰青.  中华医学杂志. 2008 (33)



本文编号：3413592