积雪草酸改善MPTP诱导的帕金森病小鼠运动症状及其对抗鱼藤酮损伤SH-SY5Y细胞的机制

发布时间：2021-09-29 12:05

　　目的:研究积雪草酸对抗MPTP诱导的帕金森小鼠运动症状和鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤作用,探讨积雪草酸新的药理活性,揭示积雪草酸对帕金森病的脑保护作用及其可能的神经保护机制,为其临床应用提供基础实验依据。方法:在体实验,取健康雄性C57BL/6小鼠45只,随机分为5组:正常对照组、模型组、积雪草酸低剂量干预组、积雪草酸高剂量干预组、左旋多巴阳性对照组,每组9只。正常对照组小鼠腹腔注射生理盐水,其余小鼠连续7天腹腔注射MPTP（25mg/kg）建立帕金森病小鼠模型。造模的同时灌胃给药,正常对照组小鼠和模型组小鼠灌胃溶剂;积雪草酸低、高剂量干预组小鼠分别灌胃积雪草酸12.5mg/kg、25mg/kg;左旋多巴阳性对照组小鼠灌胃左旋多巴75mg/kg,各组小鼠连续给药11天。第12天采用爬杆实验、悬挂实验评估小鼠运动功能;随后眼球取血,ELISA检测小鼠外周血炎症因子IL-1β和TNF-α水平;断头取脑,采用Western Blot和免疫组化检测小鼠黑质TH的表达及TH阳性细胞数;Real time-PCR检测小鼠中脑i NOS、COX-2、IL-1β及TNF-α的m RNA表达水平;... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
英文缩略词中英文注释表
第一章 引言
    1.1 PD的研究概况
        1.1.1 PD的发病机制
        1.1.2 PD的治疗现状
        1.1.3 PD的神经保护研究现状
    1.2 积雪草酸的研究概况
        1.2.1 积雪草酸的药理活性
        1.2.2 积雪草酸对神经系统疾病的作用
    1.3 本课题研究思路
第二章 积雪草酸改善MPTP诱导的帕金森病模型小鼠运动功能障碍及其机制
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验试剂及药品
        2.1.3 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 小鼠帕金森病模型的造模及给药
        2.2.2 小鼠爬杆实验（pole test）
        2.2.3 小鼠悬挂实验（traction test）
        2.2.4 免疫组化检测小鼠黑质区TH阳性细胞
        2.2.5 Western Blot法检测小鼠中脑黑质区TH蛋白表达
        2.2.6 PCR检测小鼠中脑黑质区炎症因子的表达
        2.2.7 ELISA法检测小鼠血清中TNF-α和IL-1β含量
        2.2.8 检测小鼠中脑黑质区MDA含量
        2.2.9 数据统计
    2.3 实验结果
        2.3.1 积雪草酸改善MPTP诱导的PD小鼠爬杆能力
        2.3.2 积雪草酸改善MPTP诱导的PD小鼠悬挂能力
        2.3.3 积雪草酸抑制MPTP诱导的PD小鼠黑质区TH阳性细胞减少
        2.3.4 积雪草酸抑制MPTP诱导的PD小鼠黑质区TH表达下调
        2.3.5 积雪草酸抑制MPTP诱导的PD小鼠黑质区炎症反应
        2.3.6 积雪草酸抑制MPTP诱导的PD小鼠外周血炎症因子水平
        2.3.7 积雪草酸改善MPTP诱导的PD小鼠中脑黑质区氧化应激
    2.4 讨论
    2.5 本章小结
第三章 积雪草酸保护鱼藤酮诱导的神经细胞损伤作用及其相关机制
    3.1 实验材料
        3.1.1 实验细胞
        3.1.2 实验试剂及药品
        3.1.3 实验仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 SH-SY5Y细胞培养
        3.2.2 细胞计数
        3.2.3 MTT法检测细胞活性
        3.2.4 DCFH-DA探针检测细胞ROS水平
        3.2.5 JC-1 探针检测细胞线粒体膜电位
        3.2.6 Western Blot法检测细胞Bax、Bcl-2 蛋白表达
        3.2.7 数据统计
    3.3 实验结果
        3.3.1 积雪草酸对抗鱼藤酮诱导的SH-SY5Y细胞损伤
        3.3.2 积雪草酸抑制鱼藤酮诱导的细胞ROS的生成
        3.3.3 积雪草酸抑制鱼藤酮诱导的细胞线粒体膜电位下降
        3.3.4 积雪草酸抑制鱼藤酮诱导的细胞凋亡
    3.4 讨论
    3.5 本章小结
第四章 总结与展望
参考文献
致谢
在学期间发表的学术论文及其他科研成果


【参考文献】：
期刊论文
[1]积雪草酸对PC12细胞氧糖剥夺/复氧损伤的保护作用[J]. 袁菊萍,陆建明,陆媛.  药学学报. 2013(11)



本文编号：3413679