PABPC5介导HCG15通过SMD途径降解ZNF331 mRNA调节胶质瘤血管生成拟态的分子机制研究

发布时间：2021-09-30 16:30

　　目的:胶质瘤是颅内最常见的原发性恶性肿瘤,其主要治疗方式主要是通过手术治疗,在手术后再联合进行放疗及化疗等多种方式进行综合治疗,但是经过系统治疗后恶性胶质瘤患者平均中位生存期仅有12-18个月。胶质瘤组织主要是通过血管新生和血管形成来维持自身营养供应,但是目前应用抗血管生成的靶向药物治疗胶质瘤的效果并不满意。在1999年对黑色素瘤研究中发现一种不依赖血管而是通过细胞外基质变形为肿瘤供血的形式,即血管生成拟态。这样为针对胶质瘤抗血管生成拟态靶向治疗的研究提供新的目标。RNA结合蛋白（RNA binding proteins,RBPs）伴随着RNA形成与代谢的始终,调控RNA的稳定性,并参与介导RNA转运和翻译等。细胞溶质聚（A）结合蛋白家族成员PABPC5（poly（A）binding protein cytoplasmic 5）,PABPC5在线粒体中参与DNA和RNA的代谢过程。PABPC5基因是由至少两个外显子和一个内含子以及不间断的ORF（open reading frame）组成。在卵巢疾病的研究中表明,PABPC5位于与卵巢早衰相关基因的易位断点DX214上,且PABPC5的... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：69 页

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PABPC5的内源性表达和PABPC5对胶质瘤细胞生物学行为的影响.

中国医科大学博士学位论文17图2.HCG15的内源性表达和HCG15对胶质瘤细胞生物学行为的影响.(A)HCG15在NBTs、LGGTs和HGGT中的表达。数据以平均值±标准差表示(n=12)。与NBTs组相比，**P<0.01，与NBTs组相比，*P<0.05，与LGGTs组相比，#P<0.05。(B)HCG15在NHA，U87和U251细胞中的表达。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与NHA组相比，**P<0.01，与NHA组相比，*P<0.05。(C)检测沉默HCG15对U87和U251细胞增殖能力的影响。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与HCG15(-)-NC组相比，**P<0.01。(D)检测沉默HCG15分别对U87和U251细胞迁移和侵袭能力的影响。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与HCG15(-)-NC组相比，**P<0.01，比例尺表示50μm。(E)沉默HCG15分别对U87和U251细胞的VM形成能力的影响。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与HCG15(-)-NC组相比，**P<0.01，比例尺表示50μm。(F)检测沉默HCG15分别在U87和U251细胞中调节LAMC2的蛋白水平。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与HCG15(-)-NC组相比，**P<0.01。3.3PABPC5通过增加HCG15的稳定性促进胶质瘤细胞的VM形成检测发现沉默PABPC5后可以对HCG15产生影响，结果如图3A所示，与Control组相比，PABPC5(-)-NC组HCG15的表达无明显差异；与PABPC5(-)-NC组相比，PABPC5(-)组HCG15的表达水平显著降低(P<0.01)。为了研究PABPC5和HCG15之间的作用关系，应用RNA-IP实验检测PABPC5是否与HCG15之间存在直接结合作用。如图3B所示，抗PABPC5组中HCG15的富集显著高于抗IgG组(P<0.01和

中国医科大学博士学位论文19图3.PABPC5通过增加HCG15稳定性增强了胶质瘤细胞的生物学行为.(A)沉默PABPC5对HCG15影响。数据以平均值±标准差表示(n=3)，与PABPC5(-)-NC组相比，**P<0.01。(B)验证PABPC5和HCG15之间的结合相互作用。数据以平均值±标准差表示(n=3)。与各自抗正常IgG组相比，**P<0.01。(C)沉默PABPC5的U87和U251细胞中新生的HCG15；数


本文编号：3416248