DREAM在大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用及机制研究

发布时间：2021-09-30 18:29

　　目的:探索DREAM在脑缺血再灌注损伤中的作用以及DREAM是否通过调控TRPM7参与脑缺血再灌注损伤的潜在机制。方法:1)建立SD大鼠脑缺血再灌注损伤模型;2)随机将SD成年鼠分为Normal组、缺血再灌注（I/R）0h、4h、24h、48h、72h、1w共七组,通过RT-PCR和Western blotting检测梗死核心区及周围半暗带组织中DREAM的mRNA和蛋白表达量的变化;3)随机将SD成年鼠分为Normal组、I/R组、I/R+瑞格列奈（Repaglinide,RP）0.5mg/kg组和I/R+RP 1mg/kg组,分别腹腔注射给与生理盐水、溶剂Vehicle、RP 0.5mg/kg、RP 1mg/kg治疗,于术后第1天、3天、5天、7天进行神经行为学评分,术后第7天用TTC染色进行脑梗死体积评估,用RT-PCR和Western blotting分别检测DREAM、凋亡相关因子Bcl2和Bax在mRNA和蛋白水平表达的变化;4)原代神经元培养体系中,用免疫荧光检测DREAM在神经元和星型胶质细胞中的表达及亚细胞定位;5)建立体外原代神经元氧糖剥夺再灌注（OGD/R）模型,... 

【文章来源】：电子科技大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

瑞格列奈分子结构式[29]

电子科技大学硕士学位论文61.5.4DREAM参与脑缺血再灌注损伤的可能机制DREAM发挥神经保护作用的机制的探究主要分为：1）通过免疫共沉淀来探究DREAM与TRPM7二者是否存在相互结合以及结合的位点；2）若存在相互结合，通过瑞格列奈调控DREAM的表达，TRPM7膜表达等特性是如何变化的？基于以上的拟解决目标，本研究中我们设计如图1-2所示的实验技术路线，旨在探究DREAM在脑缺血再灌注损伤的作用和机制。图1-2实验设计和技术路线

第二章DREAM在SD大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用9图2-1I/R模型线栓法示意图[41]1、术前准备：所用手术器械均清洗干净后灭菌烘干，手术台用75%医用酒精擦拭，准备好手术相关用品，手术房间紫外照射灭菌30min。生理盐水配制7.5%的水合氯醛。2、动物麻醉：麻醉前称重，按0.35mL/100g腹腔注射麻醉。3、大脑中动脉栓塞：待深度麻醉后，保持仰卧位，将其固定于手术台先用剪刀剪掉颈部多余毛。用碘伏消毒后，左手持镊子提起颈部皮肤，右手持手术剪于其颈部正中剪开皮肤约2cm。用镊子顺着肌肉进行钝性分离，直至找到右侧颈总动脉并将颈总动脉与迷走神经分离干净，在颈总动脉上备一根线。此过程中注意不要破环血管和过度刺激迷走神经。将颈总动脉的线轻轻向上提起，顺着颈总动脉往头部分离直到分叉处，依次轻轻分离颈外和颈内动脉并备线。将颈外动脉结扎，颈总动脉用动脉夹夹闭，颈内的线轻轻拉向左侧。在颈总动脉上用虹膜剪轻轻剪一个小破口，有血流溢出即可。线栓由此口进入后松开颈内的线，将线栓轻轻送入颈内直至稍稍有阻力，此时线栓上小黑点的位置大约处于血管分叉处，线


本文编号：3416422