TLR7/8对神经元细胞表达GLUTs和MCTs的影响及其机制

发布时间：2021-10-16 07:33

　　现代社会人口老龄化现象越来越严重,老年性痴呆（senile dementia）、帕金森病（Parkinson’s disease, PD）、脑卒中等疾病的发病率都有所升高,此外脑部的感染性疾病如人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV）感染造成的痴呆症等,也严重危害着人类生命。脑部疾病与脑的能量代谢异常有密切关系,应用各种先进技术研究脑的能量代谢与脑部疾病的关系已成为当今脑部疾病研究的热点之一。葡萄糖是大脑供能的主要来源之一,也是大脑必需的能量底物,葡萄糖进入脑实质后,通过循环提供能量给神经元及其他多种细胞。脑部的能量代谢活动主要是通过葡萄糖的氧化代谢来实现的,葡萄糖的转运依赖于细胞膜上葡萄糖转运体（glucose transporter, GLUT）来完成。另外糖酵解产生的乳酸也可以为大脑供能,乳酸的转运依靠细胞膜上的单羧酸转运体（monocarboxylate transporter, MCT）来完成。研究发现,在血浆葡萄糖正常的时候乳酸优先被利用为大脑供应能量,与葡萄糖相比乳酸作为脑能量代谢的首选燃料,但是具体的作用机制尚未研究清楚。神... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．胎鼠皮质神经元细胞培养不同时间的形态变化??ａ、ｂ、Ｃ?分别为?０、６、９ｄ?（ｘｌＯ）??

微管相关蛋白２?（ＭＡＰ２）是神经元胞体及树突的标志物，ＷＭＡＰ２作为神经元??的标记对培养第九天的胎鼠大脑皮质神经元纯度进巧鉴定，神经元胞体及树突着绿色??（图２），随机选取视野中２００个细胞计数神经元纯度达９０％Ｗ上。??曲？曲??图２原代培养的胎鼠大脑皮质神经元的免疫焚光染色（。０）??Ｆｉｇｕｒｅ?２．?Ｐｕｒｉｔｙ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏ打?ｏｆ?ｍｏｕｓｅ?ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏｎｓ．?ＤＡＰＩ?ｓｈｏｗｅｄ??ｎｕｃｌｅａｒ?ｗｉｔｈ?ｂｌｕｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ?ａｎｄ?ＭＡＰ－２?ｓｈｏｗｅｄ?ｎｅｕｒｏｎｓ?ｗｉｔｈ?ｇｒｅｅｎ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌ??ｏ打ｌｙ?ｗｉｔｈ?ｂｌｕｅ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅ打ｔ，?ｂｕｔ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｇｒｅｅ打?ｆｌｕｏｒ巧ｃｅｎｔ?ｗａｓ?ａ?ｎｏｎ－打ｅｕｒｏｎ．??－１６?－??

（三）小ＲＮＡ干扰??免疫印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔｔｉｎｇ，ＷＢ）实验结果显示，用合成的目的片段能够使所??培养的胎鼠皮质神经元细胞中的ＴＬ民７基因被沉默（图３）。??Ｃｔｒｌ?ｒｅ?ａｇｅ?ｎｔ?ｓｉ?ＲＮＡ??雄??ＰＩ?ｎ?■??图３．?ｓｉＲＮＡ干扰胎請大脑皮质神经元的ＴＬＲ７蛋白表达??Ｆｉｇｕｒｅ?３．?Ｔｈｅ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＬ民７?ｐｒｏｔｅｉ打?ｉｎ?ｍｏｕｓｅ?ｅｍｂｒｙｏ打ｉｃ?ｃｏｒｔｉｃａｌ?ｎｅｕｒｏ打ｓ?ｗａｓ?ｉｎｔｅ－??ｒｆｅｒｅｄ?ｂｙ?ｓｉＲＮＡ．?Ｔｈｅ?ｃｅｌｌｓ?ｗｅｒｅ?ｔｒｅａｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｏｒ?ｗｉｔｈｏｕｔ?ｓｉＲＮＡ．?Ｔｈｅ?ｐｒｏｌ：ｅｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ??了Ｌ民７?ｗａｓ?ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ?ｂｙ?ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ?（ＷＢ）．??（四）ＴＬＲ７／８介导的神经元细胞活性变化??ＣＣＫ８实验数据显示，在Ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ和ＣＬＷ５?（３Ｍ－００２）分别刺激皮质神经元细胞??一定时间后，神经元细胞的活性变化如下：用Ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ刺激皮质神经元后，在化５ｄ??时细胞的活性无明显变化，从Ｉｄ到３ｄ刺激组与对照组相比活性有所减低，差异有统??计学意义（户＜０．０５，图４）。当ＣＬ０７５?（３Ｍ－００２）与皮质神经元作用之后，细胞的活性??在第Ｉｄ天就出现明显的下降（户＜０．０５，图５）。当用两种配体分别刺激ＳｉＲＮＡ干扰??后的皮质神经元细胞后，实验组同对照组相比差异无统计学意义（户＞０．０５，图６），??表明Ｌｏｘｏｒ化ｉｎｅ和ＣＬ０７５?（３Ｍ－００２）活化ＴＬＲ７／８后可引起神经元细胞的活性降低

【参考文献】：
期刊论文
[1]Toll样受体7介导的抗病毒天然免疫反应研究进展[J]. 何小兵,房永祥,贾怀杰,陈国华,曾爽,景志忠,程国锋.  中国兽医科学. 2010(06)
[2]Toll样受体7在抗感染与自身免疫疾病中的作用[J]. 邓筠,沈南,王元.  医学分子生物学杂志. 2008(01)



本文编号：3439422