电针联合BMSCs移植治疗对脑出血大鼠脑组织内Glu及其受体GluR2、NMDAR2A表达的影响

发布时间：2017-05-04 01:00

  本文关键词：电针联合BMSCs移植治疗对脑出血大鼠脑组织内Glu及其受体GluR2、NMDAR2A表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:观察脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)大鼠在电针(electro-acupuncture,Ea)联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗下,血清中髓磷脂碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的含量和血肿周边脑组织兴奋性神经递质谷氨酸(glutamate,Glu)及其受体N-甲基-D-天门冬氨酸受体-2A(N-methyl-D-aspartate receptor-2A,NMDAR2A)、谷氨酸受体-2(glutamate receptor-2,Glu R2)的表达,探讨联合治疗方案的可能机制。方法:(1)培养BMSCs:将冻存的BMSCs通过常规复苏、传代及诱导后,调整细胞浓度至2.5×107个/m L待移植使用。(2)构建ICH大鼠模型:选用SD大鼠,向其右侧尾壳核注射胶原酶和肝素以构建ICH模型。术后分3次(2h、24h、48h时)行神经损害程度评分(neurological severity score,NSS评分),任意1次得分在9分以上者视为造模成功。(3)动物分组:将造模成功的大鼠随机分成BMSCs移植组(BMSCs组)、生理盐水组(NS组)、电针联合BMSCs细胞移植组(Ea-BMSCs组)、电针治疗组(Ea组)4组,于造模成功后第3d分别采用注入20μl BMSCs、20μl生理盐水、20μl BMSCs并辅以电针刺激(百会穴和大椎穴)及单纯电针刺激予以治疗。各组继分为治疗后1d、3d、5d、7d和14d共5个亚组,于相应时间点对大鼠NSS评分后再采血收集血清,处死大鼠取脑备用。(4)酶联免疫吸附测定血清中MBP的含量。(5)免疫组织化学检测Glu及其受体Glu R2、NMDAR2A的表达。结果:(1)NSS评分结果(造模成功第3d,对各组分别实施干预后):Ea-BMSCs组在第3d、5d、7d、14d与同时间点NS组、Ea组、BMSCs组比较,NSS评分显著下降(P0.05);BMSCs组在第3d、5d、7d、14d与同时间点NS组比较,NSS评分显著下降(P0.05);Ea组在第3d、5d、7d和14d与同时间点NS组比较,NSS评分明显下降(P0.05)。(2)出血灶周围表达的Glu积分光密度值(integral optical density,IOD):各组Glu表达在1d时均快速上升,3d时达峰值,随后缓慢下降。Ea-BMSCs组Glu的表达,在各时间点与同一时间NS组、Ea组、BMSCs组比较,明显下降,差异显著(P0.05)。BMSCs组、Ea组Glu的表达,在3d、5d、7d时与同时间点NS组比较,明显下降,差异显著(P0.05)。(3)出血灶周围表达的NMDAR2A的IOD:各组NMDAR2A表达均在第1d时开始升高,第3d时达到峰值;然后回落。Ea-BMSCs组NMDAR2A的表达在各时间点与同时间点NS组相比较,表达下降,差异显著(P0.05);在第3d、5d、7d与同时间点Ea组比较,表达下降,差异显著(P0.05);在第3d、5d与同时间点BMSCs组比较,表达下降,差异显著(P0.05)。BMSCs组NMDAR2A的表达在第1d、3d、5d、7d时与同时间点NS组相比较,表达下降,差异显著(P0.05);Ea组NMDAR2A的表达在第3d、5d、7d时与同时间点NS组相比较,表达下降,差异显著(P0.05)。(4)出血灶周围表达的Glu R2的IOD:各组Glu R2表达在第1d时轻微升高,呈弱阳性表达。随时间推移,阳性表达逐渐增强,第7d时达最高,以Ea-BMSCs组的升高最为显著。Ea-BMSCs组Glu R2的表达在各时间点与同时间点BMSCs组、Ea组、NS组相比较,均表达增高,差异显著(P0.05)。BMSCs组、Ea组Glu R2的表达在各时间点与同时间点NS组相比较,表达增高,差异显著(P0.05)。(5)各组血清MBP含量的检测结果:BMSCs组MBP表达第5d、7d、14d高于Ea-BMSCs组(P0.05);Ea组第1d、3 d时MBP表达低于Ea-BMSCs组(P0.05),第14 d高于Ea-BMSCs组(P0.05)。与NS组比较:Ea-BMSCs组第5d、7d、14d MBP表达明显低于NS组(P0.01);BMSCs组第14d低于NS组(P0.05);Ea组第5d、7d、14 d低于NS组(P0.05)。结论:(1)电针联合BMSCs移植治疗ICH大鼠较单纯电针刺激或BMSCs移植更能降低出血灶周边区Glu、NMDAR2A的表达,减轻其介导的兴奋毒性作用对脑的损伤;(2)电针联合BMSCs移植治疗ICH大鼠较单纯电针刺激或BMSCs移植更能促进出血灶周边区Glu R2的表达,减少Ca2+内流,减轻钙超载所致脑组织的损伤;(3)电针联合BMSCs移植治疗ICH大鼠较单纯电针刺激或BMSCs移植更能降低血清MBP的含量,减轻其脱髓鞘反应。
【关键词】：脑出血 骨髓间充质干细胞 电针 Glu Glu R2 NMDAR2A MBP
【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R743.34
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-14
• 材料与方法14-28
• 结果28-44
• 讨论44-59
• 结论59-60
• 参考文献60-64
• 英汉缩略词对照表64-66
• 致谢66-68
• 综述68-78
• 参考文献76-78
• 发表论文78-81

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 蒋晓江,董为伟,许志强,李书林,杨海棠;脑出血血肿周边脑区谷氨酸及受体的变化[J];第三军医大学学报;2000年12期

2 李宁,吴建中,蒋京生;脑缺血时海马细胞外液中兴奋性氨基酸的变化[J];中国病理生理杂志;1993年06期

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本文编号：344045