非甾体有机硒类化合物对LPS激活的小胶质细胞炎症的保护作用
发布时间：2021-11-01 11:04
神经炎症是中枢神经系统（脑和脊髓）应对病原体所进行的一种免疫应答反应,主要由神经胶质细胞发挥功能。神经胶质细胞分为大胶质细胞和小胶质细胞两类,其中小胶质细胞是最早发生免疫应答的细胞。慢性神经炎症会与多种神经退行性疾病有关,如阿尔兹海默症（AD）、帕金森病（PD）、肌萎缩性侧索硬化症（ALS）等。因此抑制神经炎症反应对于神经退行性疾病的防治具有重要意义。近年来,非甾体有机硒类化合物在精神类疾病中的探究逐渐引发关注。本文以LPS激活的小鼠小胶质细胞BV2为细胞炎症模型,从氧化应激和炎症反应两个角度,共同探究9种非甾体有机硒类化合物对于激活的小胶质细胞的炎症保护作用。研究结果如下:（1）以LPS构建激活的BV2细胞炎症模型,利用Nitrite、iNOS含量变化和BV2细胞活力变化,初步筛选出9种非甾体有机硒类化合物的最佳工作浓度为3μM和30μM。LPS激活的BV2细胞中,NO的氧化形式Nitrite含量上升,NO的来源iNOS含量上调。加入9种非甾体有机硒类化合物培养24 h后,有效降低了两者含量,同时不影响细胞活力。（2）进一步筛选9种非甾体有机硒类化合物对LPS激活的BV2细胞中氧化应...
【文章来源】：辽宁大学辽宁省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的LPS对BV2细胞Nitrite释放和细胞活力的影响。利用不同浓度的LPS溶液处理BV2细胞,检测细胞上清液Nritite水平变化(左)和细胞活力(右)。n=6,mean±SD,***P<0.001 vs.control group.
本实验通过设置LPS溶液的不同浓度梯度(0.01、0.1、1、10μg/ml LPS)探究造模的最佳浓度。如图1-1(左图)所示,与对照组比较,0.01、0.1、1、10μg/ml LPS刺激BV2细胞均可显著增加Nitrite释放水平,且随LPS浓度增大而增加。如图1-1(右图)所示4种浓度的LPS溶液对于细胞的生存活力影响不大。并且10μg/ml LPS诱导BV2细胞释放Nitrite水平较1μg/ml LPS未显著增加,因此选取较低浓度1μg/ml LPS作为造模浓度,建立BV2细胞炎症模型。在倒置荧光显微镜下观察静息状态和1μg/ml LPS处理后激活状态的BV2细胞形态上的差异。如图1-2(左图)为静息状态的BV2细胞,细胞胞体小,细胞膜紧实,少有空泡。如图1-2(右图)为1μg/ml LPS处理后激活状态的BV2细胞,细胞体膨胀,逐渐向“阿米巴样”变化。细胞内空泡较多,细胞膜松散,轮廓不清晰,由此可见1μg/ml LPS可以作为激活BV2细胞的合适浓度。
本实验共计9种非甾体有机硒类化合物,样品编号分别为1-39、1-40、1-43、1-44、1A-38、1A-39、1A-40、1A-46、1A-49。上述有机硒类化合物都是在非甾体抗炎药舒林酸的结构基础上,引入硒类药效基团进行改造合成。如图1-3所示,9种非甾体有机硒类化合物在不同的浓度梯度(3μM、10μM、30μM、100μM)下均减少了Nitrite释放量。相较于其他硒类化合物,1-39、1-44、1A-38、1A-40具有更好的作用效果。而比较4种浓度梯度之间,秉持药物筛选的微量高效原则,选取低浓度3μM和高浓度30μM为最佳作用浓度。如图1-4所示,3μM、10μM、30μM、100μM等4个浓度对于细胞活性影响不大,相较于1-44和1A-40来说,1-39和1A-38的3μM和30μM浓度具有更好的效果,无论是在减少Nitrite释放还是细胞活力等方面。诱导型一氧化氮合酶是机体活性氮产生的催化酶。当机体受到损伤时,iNOS的表达量上调,释放大量的NO。因此实验检测了9种非甾体有机硒类化合物的不同浓度对于LPS激活的BV2细胞iNOS转录水平的影响。如图1-5所示,加入非甾体有机硒类化合物处理细胞后,明显降低了LPS诱导的BV2细胞iNOS表达量,与图1-3的实验结果一致,对于1-39和1A-38来说,抑制效果更加显著。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Progress of Targeting Transforming Growth Factor-β1 Small Interfering RNA in Liver Fibrosis[J]. Xuan Zhou,Xue-feng Yang. Chinese Medical Sciences Journal. 2014(04)
[2]Liver physiology and liver diseases in the elderly[J]. Kazuto Tajiri,Yukihiro Shimizu. World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
本文编号：3470002
【文章来源】：辽宁大学辽宁省 211工程院校
【文章页数】：61 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的LPS对BV2细胞Nitrite释放和细胞活力的影响。利用不同浓度的LPS溶液处理BV2细胞,检测细胞上清液Nritite水平变化(左)和细胞活力(右)。n=6,mean±SD,***P<0.001 vs.control group.
本实验通过设置LPS溶液的不同浓度梯度(0.01、0.1、1、10μg/ml LPS)探究造模的最佳浓度。如图1-1(左图)所示,与对照组比较,0.01、0.1、1、10μg/ml LPS刺激BV2细胞均可显著增加Nitrite释放水平,且随LPS浓度增大而增加。如图1-1(右图)所示4种浓度的LPS溶液对于细胞的生存活力影响不大。并且10μg/ml LPS诱导BV2细胞释放Nitrite水平较1μg/ml LPS未显著增加,因此选取较低浓度1μg/ml LPS作为造模浓度,建立BV2细胞炎症模型。在倒置荧光显微镜下观察静息状态和1μg/ml LPS处理后激活状态的BV2细胞形态上的差异。如图1-2(左图)为静息状态的BV2细胞,细胞胞体小,细胞膜紧实,少有空泡。如图1-2(右图)为1μg/ml LPS处理后激活状态的BV2细胞,细胞体膨胀,逐渐向“阿米巴样”变化。细胞内空泡较多,细胞膜松散,轮廓不清晰,由此可见1μg/ml LPS可以作为激活BV2细胞的合适浓度。
本实验共计9种非甾体有机硒类化合物,样品编号分别为1-39、1-40、1-43、1-44、1A-38、1A-39、1A-40、1A-46、1A-49。上述有机硒类化合物都是在非甾体抗炎药舒林酸的结构基础上,引入硒类药效基团进行改造合成。如图1-3所示,9种非甾体有机硒类化合物在不同的浓度梯度(3μM、10μM、30μM、100μM)下均减少了Nitrite释放量。相较于其他硒类化合物,1-39、1-44、1A-38、1A-40具有更好的作用效果。而比较4种浓度梯度之间,秉持药物筛选的微量高效原则,选取低浓度3μM和高浓度30μM为最佳作用浓度。如图1-4所示,3μM、10μM、30μM、100μM等4个浓度对于细胞活性影响不大,相较于1-44和1A-40来说,1-39和1A-38的3μM和30μM浓度具有更好的效果,无论是在减少Nitrite释放还是细胞活力等方面。诱导型一氧化氮合酶是机体活性氮产生的催化酶。当机体受到损伤时,iNOS的表达量上调,释放大量的NO。因此实验检测了9种非甾体有机硒类化合物的不同浓度对于LPS激活的BV2细胞iNOS转录水平的影响。如图1-5所示,加入非甾体有机硒类化合物处理细胞后,明显降低了LPS诱导的BV2细胞iNOS表达量,与图1-3的实验结果一致,对于1-39和1A-38来说,抑制效果更加显著。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Progress of Targeting Transforming Growth Factor-β1 Small Interfering RNA in Liver Fibrosis[J]. Xuan Zhou,Xue-feng Yang. Chinese Medical Sciences Journal. 2014(04)
[2]Liver physiology and liver diseases in the elderly[J]. Kazuto Tajiri,Yukihiro Shimizu. World Journal of Gastroenterology. 2013(46)
本文编号：3470002
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