DCX和SPAPC共表达对胶质瘤细胞生长、侵袭和放射敏感性的影响及其机制研究

发布时间：2021-11-19 11:25

　　目的构建DCX和SPARC双基因共表达腺病毒载体（Ad-DCX-SPARC），研究其对胶质瘤细胞生长、侵袭和放射敏感性的影响及其机制研究。方法1. PCR扩增获得DCX和SPARC目的基因，构建针对DCX和SPARC的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC双基因共表达重组转移质粒；2.将构建正确的pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC重组转移质粒经PmeI酶切后与pAdEasy-1腺病毒骨架质粒在BJ5183大肠杆菌中同源重组；3.同源重组质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter-SPARC（简称为pAd-DCX-polyA+promoter-SPARC）经PacI酶切后再用脂质体转染QBI-293A细胞，经多轮感染和扩增后获得Ad-DCX-polyA+promoter-SPARC（简称Ad-DCX-SPARC）双基因共表达重组腺病毒载体；4.将Ad-DCX-SPARC重组腺病毒体外感染胶质瘤细胞U251和A172，筛选出Ad-DCX-SPARC的最佳感染剂量；5.通过... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：84 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

腺病毒表达载体构建流程示意图

目的基因的鉴定

pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter质粒的鉴定A:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter质粒PCR鉴定B:pAdTrack-CMV-DCX-polyA+promoter质粒双酶切鉴定

【参考文献】：
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本文编号：3504937