PTP1B在神经胶质瘤中的表达及对神经胶质瘤的治疗意义

发布时间：2021-12-10 23:53

　　研究目的:探讨PTP1B的敲低是否抑制胶质瘤细胞的增殖,迁移和侵袭,以及潜在的机制。研究方法:体外培养神经胶质瘤细胞系U87。设计并合成PTP1B干扰质粒,以慢病毒为载体转染到U87细胞中,同时用空质粒转染到U87细胞中作为对照组,记为空载组（shNC组）。通过蛋白质印迹法测定空载组和PTP1B基因特异性shPTP1B组的U87细胞中PTP1B的蛋白表达水平,验证基因敲低PTP1B表达的效率。证实shPTP1B组中PTP1B表达水平降低后,通过MTT增殖试验和集落形成试验检测PTP1B对U87细胞增殖的影响。采用流式细胞仪检测PTP1B敲低后U87细胞的细胞周期变化。采用western blot检测细胞周期蛋白CDK、E2F、CyclinD1、P21蛋白表达强度。进行细胞划痕试验以检测shNC组和PTP1B基因特异性shPTP1B组U87细胞的迁移能力。用Transwell小室实验检测shNC组和shPTP1B组U87细胞侵袭能力。最后通过Western blot法检测Src/Ras、PI3K/AKT、p62DOK/RasGAP相关信号（Src,pSrc418,AKT,P-AKT,ER... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
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引言
实验材料
实验方法
    1 细胞培养
    2 构建ShPTP1B1 慢病毒载体
    3 MTT实验检测PTP1B敲除后对U87 细胞增殖的影响
    4 克隆形成实验检测PTP1B敲除后对单个细胞增殖的影响
    5 细胞划痕实验检测PTP1B对细胞迁移的影响
    6 Transwell小室实验检测PTP1B对人神经胶质瘤U87 细胞侵袭的影响
    7 流式细胞仪检测PTP1B对人神经胶质瘤U87 细胞周期的影响
    8 Western-blot检测PTP1B对人神经胶质瘤U87 细胞相关蛋白的影响
    9 统计学分析
实验结果
    1 PTP1B基因干扰效率
    2 MTT法检测感染携带有shPTP1B1 的慢病毒后对U87 细胞增殖能力的影响
    3 流式细胞仪western blot检测PTP1B对人神经胶质瘤U87 细胞周期影响
    4 Transwell小室实验和细胞划痕实验检测PTP1B对胶质瘤细胞侵袭及迁移能力的影响
    5 PTP1B影响胶质瘤细胞生长和迁移的分子机制
讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
英文缩略词表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]蛋白酪氨酸磷酸酶1B在乳腺癌进展中的作用（英文）[J]. Shi-chong LIAO,Jin-xin LI,Li YU,Sheng-rong SUN.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2017(04)
[2]2016WHO中枢神经系统肿瘤分类第4版修订版概述及胶质瘤部分介绍[J].   中华病理学杂志. 2016 (11)
[3]蛋白酪氨酸磷酸酶1B对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 王禹,高佳音,郭静,邵学成,石琨.  生殖与避孕. 2016(07)



本文编号：3533624