小鼠脑缺血再灌注模型的建立及C3aR、C5aR拮抗剂对于小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

发布时间：2022-01-11 01:42

　　第一部分小鼠脑缺血再灌注模型的建立目的：建立一种稳定的、可重复的局灶性脑缺血再灌注动物模型。方法：采用插线法建立小鼠局灶性脑缺血再灌注动物模型。栓塞时间为60分钟。手术后24小时分别对各组小鼠进行神经功能评分。观察模型的可靠性。结果：模型组出现神经功能障碍，脑组织缺血梗死。结论：成功建立了小鼠脑缺血再灌注模型，适合用于脑缺再灌注损伤的研究。第二部分C3aR、C5aR拮抗剂对于小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究目的：我们通过抑制C3a、C5a在受体水平的活性，调查C3a、C5a受体在缺血再灌注损伤中的作用。探究C3aR、C5aR抑制剂在脑缺血再灌注中对损伤的治疗作用。方法：使用C3aR、C5aR拮抗剂及制造梗死模型对小鼠大脑中动脉进行临时闭塞。24小时后评估缺血再灌注损伤的结果，完整大脑2mm冠状厚片行2％氯化-2,3,5-三苯基四氮唑（TTC）染色，计算梗死体积。结果：使用C3aR、C5aR拮抗剂治疗的动物神经功能有所改善、梗死体积显著减少。结论：研究结果证明，C3aR、C5aR拮抗剂显著改变缺血再灌注损伤程度。第三部分C3a、C5a受体缺陷对于小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用研究目的：... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

栓线制备

carotidartery，ECA）、颈内动脉（Internal carotid artery，ICA）。分离ICA 至近颅底，结扎ICA 颅外段的唯一分支翼腭动脉（Pterygopalatine artery，PPA）。在ECA 的近心端设置活结，结扎ECA、CCA远心端，夹闭和ICA(血管分离及结扎见图1-2)。图1-2 结扎颈外动脉2.1.2.4 插线：在颈总动脉结扎部位远心端剪口，插入制备好的线段，送入栓线至CCA分叉处，然后翻转方向，使ECA与ICA尽量成为平角，以利于栓线通过；将栓线向内上方缓慢推进。适当调整栓线插入方向，插入长度为10～12mm（从CCA分叉处计算），微遇阻力时即停止。松开CCA上的微动脉夹，缝合皮肤，将栓线尾部略露出皮肤，并固定。上述过程一般10～15 min。术后让小鼠自然清醒

解放军医学院硕士学位论文16图1-3 颈总动脉插线2.1.2.5 记录插线成功时间点（不包括缝合皮肤的时间）2.1.2.6 模型组术前45分钟，按照150mg/kg注射PBS、C3aR抑制剂、C5aR抑制剂。2.1.3 完成再灌注：在栓线置入60min后再次麻醉小鼠，切开皮肤。将略路出皮肤的栓线抽出，抽出过程需缓慢进行，使大脑中动脉血供恢复。当栓线经处理过的头端，因其头端在栓线拔出过程中，经过在ECA上的结扎线时，会遇到阻力，此时，停止拔线，剪掉栓线露出皮肤的末端。小鼠清醒后可以自由进食、进水。假手术组小鼠除不用插线外，其他处理同实验组。2.1.4 MCAO模型剔除标准：术后无明显脑梗死症状（无明显神经功能缺损症状）

【参考文献】：
期刊论文
[1]脑缺血动物模型的研究进展[J]. 邹永杰,崔高宇,冯华.  国际神经病学神经外科学杂志. 2012(05)
[2]补体级联反应在脑缺血/再灌注炎症损伤中的作用[J]. 鲜尽红,何莉,汪正清.  创伤外科杂志. 2011(06)
[3]过敏毒素C3a与前列腺增生症合并组织炎症的关系[J]. 谢亮,程树林,李一竹,柳良仁,韩平,陈妮,魏强,周桥.  四川大学学报(医学版). 2011(05)
[4]补体C5a、C5a受体及其拮抗剂的研究进展[J]. 王会会,陈国江,黎燕,石艳春.  国际药学研究杂志. 2010(03)
[5]局灶性脑缺血动物模型的制备[J]. 马宁,蔡继福,姜卫剑.  神经损伤与功能重建. 2010(01)
[6]分子佐剂小鼠补体C3d基因的克隆与序列分析[J]. 孙梅芹,赵连三,陈守春,王松,周陶友,唐红,陈毅荣,闫娟.  四川大学学报(医学版). 2003(02)
[7]C3d及荷C3d免疫复合物的测定与意义[J]. 虞伟,俞小忠,武建国.  免疫学杂志. 1997(04)
[8]实验性局灶性脑缺血再灌注动物模型的改进及评价[J]. 刘亢丁,苏志强,李毅平,饶明俐.  中风与神经疾病杂志. 1997(02)
[9]大鼠局灶脑缺血再灌注模型的研究[J]. 杨世方,闵宝珍,周锡英.  中风与神经疾病杂志. 1996(01)
[10]栓线法大鼠局灶性脑缺血模型的研究[J]. 陈春富,李劲松.  中风与神经疾病杂志. 1996(01)

硕士论文
[1]抗补体C5a单克隆抗体对炎症性肠病的治疗作用研究[D]. 高旭东.天津大学 2009



本文编号：3581828