线粒体分裂抑制剂对大鼠海马细胞氧糖剥夺/复氧模型中能量代谢的影响

发布时间：2022-01-15 22:43

　　目的：探讨线粒体分裂抑制齐（mitochondrial division inhibitor,mdivi一1）在脑缺血再灌注损伤（ischemia/reperfusion injury,IRI）中对能量代谢的影响。方法：将体外培养8d的Wistar大鼠海马神经元随机地分为4组：正常对照组（C组）、赋形剂组（V组）、mdivi-1+缺血再灌注组（M组）、缺血再灌注组（Ⅰ组）。利用海马神经元氧糖剥夺法建立缺血再灌注模型,M组建立缺血再灌注模型之前给予mdivi-1预处理40min。缺血6h,再灌注20h后应用Western blot法检测各组线粒体分裂蛋白1（dynamin-related protein1,Drp1）.B细胞淋巴癌/白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2Associated X Protein,Bax）的表达水平,酶标仪法测三磷酸腺苷（ATP）含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、线粒体呼吸链酶复合体ⅠⅡ、Ⅲ和Ⅳ的活性。结果：与C组比较,M组和Ⅰ组ATP含量及Na+-K+-ATP酶、ca2+-Mg2+-ATP酶、线粒体呼吸链酶复合... 

【文章来源】：青岛大学山东省

【文章页数】：34 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
引言
第一章 实验试剂及仪器
    1.1 实验动物
    1.2 材料与试剂
    1.3 主要仪器与设备
第二章 实验方法
    2.1 海马神经元原代培养及形态学观察
    2.2 海马神经元氧糖剥夺/复氧模型的建立
    2.3 实验分组
    2.4 蛋白质提取
    2.5 WESTERN BLOT法检测DRP1、BCL-2/BAX蛋白表达水平
    2.6 流式细胞术检测细胞膜电位(△ψM)
    2.7 线粒体分离和线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ Ⅱ Ⅲ和Ⅳ的活性检测
    2.8 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性测定
    统计学处理
第三章 实验结果
    3.1 海马神经元形态学观察
    3.2 WESTERN BLOT检测DRP1和BCL-2/BAX蛋白表达
    3.3 流式细胞术及荧光显微镜检测线粒体膜电位
    3.4 线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的活性
    3.5 ATP含量、NA~+-K~+-ATP酶和CA~(2+)-MG~(2+)-ATP酶活性
第四章 讨论
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]线粒体动力学改变在神经变性疾病中的地位[J]. 李文伟,朱敏,吕传真.  生理科学进展. 2011(05)
[2]脑缺血再灌注后神经细胞凋亡机制及药物保护作用的研究进展[J]. 汪莹,许栋明,王文,高东明,张丽,艾厚喜,李林.  中国康复理论与实践. 2010(12)
[3]细胞凋亡的线粒体通路[J]. 方敏,王晓东.  北京大学学报(医学版). 2002(01)



本文编号：3591450