N-乙酰半胱氨酸抑制Notch2信号转导的机制研究及其对神经胶质瘤生长的影响

发布时间：2022-01-25 05:26

　　目的:1.研究N-乙酰半胱氨酸（NAC）对神经胶质瘤细胞Notch2信号通路的抑制作用并阐明其发生机制。2.明确NAC对Notch2信号的抑制效应对体内外神经胶质瘤生长的影响,为NAC用于神经胶质瘤的临床治疗提供了一定的实验和理论依据。方法:1.分别用Western Blotting和Real Time-PCR实验检测NAC对U87和U251细胞Notch1、Notch2、Notch3、Notch4、Hes1和Hey1蛋白水平的影响,Notch2、Hes1和Hey1 m RNA水平的影响,以及CCK8实验观察NAC、si-Notch2和si-Notch3对U87和U251细胞活力的影响。2.Western Blotting实验观察NH4Cl和MG132对NAC抑制U87细胞Notch2蛋白水平的影响,以及NAC对Itch和CRMP5,si-Itch对NAC抑制Notch2蛋白水平的影响。3.活性氧（ROS）实验检测NAC、谷胱甘肽（GSH）和依布硒啉（Ebselen）对U87和U251细胞内ROS水平的影响,Western Blotting实验检测以上药物对Notch2蛋白水平的影响,... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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WesternBlotting实验检测NAC（浓度梯度）对Notch信号的影响U87

华中科技大学博士学位论文36图1-2WesternBlotting实验检测NAC（浓度梯度）对Notch信号的影响U87和U251细胞用NAC（0，2，5，10，20mM）处理24h后，WesternBlotting检测Notch2、Notch3、Hes1和Hey1蛋白的表达，β-actin作为内参（n=3次独立实验）图1-3WesternBlotting实验检测NAC（时间梯度）对Notch信号的影响U87和U251细胞用NAC（10mM）处理0，3，6，12，24h后，WesternBlotting检测Notch2、Notch3、Hes1和Hey1蛋白的表达，β-actin作为内参（n=3次独立实验）

华中科技大学博士学位论文37图1-4WesternBlotting实验检测NAC对Notch1表达的影响U87和U251细胞用NAC（10mM）处理24h后，WesternBlotting检测Notch1蛋白的表达，β-actin作为内参（n=3次独立实验）图1-5RT-PCR实验检测NAC（浓度梯度）对Hes1（A）和Hey1（B）转录的影响U87和U251细胞用NAC（0，5，10，20mM）处理24h后，RT-PCR检测Hes1和Hey1mRNA的表达，β-actin作为内参（n=3次独立实验，*P<0.05versusControl）图1-6RT-PCR实验检测NAC（时间梯度）对Hes1（A）和Hey1（B）转录的影响U87和U251细胞用NAC（10mM）处理0，6，12，24h后，RT-PCR检


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