γ-tocotrienol（GT3）对DMD小鼠肌肉干细胞的保护作用

发布时间：2022-02-22 03:44

　　目的:γ-tocotrienol（GT3）是一种天然维生素E亚型,具有强的抗氧化能力。本研究将用Dystrophin基因敲除（DMD）小鼠为模型,应用GT3作用于DMD小鼠后,对肌肉干细胞的表型和功能进行评估,并分析GT3对杜氏进行性肌营养不良症（DMD）的作用及其机制。方法:首先,我们用40周龄的C57BL/6J雄鼠（n=6）和DMD雄鼠（n=6）,观察肌肉干细胞的基本生理特性。然后,分别将40周龄的C57BL/6J雄鼠和DMD雄鼠分为4组:WT+PBS（n=6）、DMD+PBS（n=6）、WT+GT3（n=6）和DMD+GT3（n=6）。通过HE染色观察肌细胞形态,基本病理改变;通过免疫组化检测Dystrophin,PAX7,PCNA等相关蛋白的表达;通过流式细胞术对肌肉干细胞的氧化自由基（ROS）、老化、凋亡和DNA损伤进行分析;通过荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因的表达。结果:1.与正常对照组小鼠比较,DMD基因敲除小鼠肌束周长增加;DMD基因敲除小鼠肌肉干细胞数量减少;2.与正常对照组小鼠比较,DMD基因敲除小鼠胫骨前肌PCNA阳性细胞数增加;3.与正常对照组小鼠比较,DM... 

【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
中英文缩略词表
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 实验仪器设备
        2.1.3 主要实验试剂
        2.1.4 主要实验试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 实验分组
        2.2.2 动物模型制备
        2.2.3 肌肉组织单细胞悬液的制备
        2.2.4 活性氧测定
        2.2.5 老化测定
        2.2.6 细胞凋亡测定
        2.2.7 细胞周期分析
        2.2.8 DNA损伤检测
        2.2.9 胫骨前肌横截面HE染色和免疫组化
        2.2.10 qRT-PCR法检测凋亡相关基因表达
        2.2.11 数据统计分析
第3章 实验结果
    3.1 DMD基因敲除鼠的构建
    3.2 Dystrophin蛋白的表达
    3.3 DMD基因敲除小鼠肌束周长增加
    3.4 肌肉干细胞数量变化
    3.5 PCNA阳性增殖细胞数量变化
    3.6 肌肉干细胞凋亡细胞数量变化
    3.7 肌肉干细胞氧自由基水平变化
    3.8 肌肉干细胞老化水平变化
    3.9 肌肉干细胞DNA损伤水平变化
    3.10 GT3能增加DMD基因敲除小鼠胫骨前肌周长
    3.11 GT3影响了小鼠胫骨前肌肌肉干细胞数量变化
    3.12 GT3影响了小鼠胫骨前肌PCNA阳性增殖细胞数量变化
    3.13 GT3处理对DMD基因敲除小鼠肌肉干细胞的影响
    3.14 GT3处理对小鼠胫骨前肌干细胞凋亡的影响
    3.15 GT3处理对小鼠胫骨前肌干细胞氧化自由基的影响
    3.16 GT3对小鼠胫骨前肌干细胞老化的影响
    3.17 GT3对小鼠胫骨前肌干细胞DNA损伤的影响
第4章 讨论
第5章 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3638627