PDTC增强脑胶质瘤U251细胞系对TMZ敏感性的研究

发布时间：2017-05-14 16:23

  本文关键词：PDTC增强脑胶质瘤U251细胞系对TMZ敏感性的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景脑胶质瘤是人类最常见的颅内原发性肿瘤,也是中枢神经系统恶性肿瘤患者最重要的死亡原因。尽管临床上积极采用包括手术切除、放射和化疗等的综合治疗方案,恶性胶质瘤患者的总生存率仍然很低。替莫唑胺(temozolomide,TMZ)是一种新型烷化剂,它对治疗脑胶质瘤有确切的临床疗效。采用“手术+放疗同步TMZ化疗+辅助TMZ化疗”的综合治疗策略,对患者的无进展生存期(PFS)和五年生存率有显著的改善,但对总生存率无明显提高。然而,很多因素影响了TMZ的临床疗效,其中脑胶质瘤耐药现象的产生是主要原因之一。包括O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O-6-methylguanine DNA-methyltransferase,MGMT)的内源性和诱导性高表达等原因促进了脑胶质瘤对TMZ治疗的抵抗。MGMT能专门去除TMZ添加的鸟嘌呤残基O6位置的甲基,从而逆转TMZ的细胞毒性效果。因此TMZ化疗效果可能通过抑制MGMT的活性得到明显的改善。NF-κB通路的异常激活促进了多种实体瘤(包括胶质母细胞瘤)的发生、进展和放疗或化疗抵抗密切相关。更深入的分子实验发现,MGMT的表达在一定程度上受NF-κB通路的调控,同时NF-κB通路本身,MGMT,以及BCL-XL、Bcl-2、Survivin等NF-κB通路的靶基因,可被放、化疗刺激表达,在细胞存活、抗凋亡和抵抗治疗方面发挥关键作用。本实验以脑胶质瘤U251细胞系为实验对象,利用二硫代氨基甲酸吡咯烷(ammonium pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC),一种NF-κB特异抑制剂,单独或与TMZ一起处理U251细胞系,观察抑制NF-κB的功能对TMZ化疗效果的改变;同时检测TMZ处理条件下,PDTC如何改变MGMT和BCL-XL、Survivin等抗凋亡蛋白的表达水平。目的观察NF-κB抑制剂PDTC对脑胶质瘤U251细胞生物性状的改变;探究PDTC是否能增强U251细胞对TMZ化疗的敏感性;探讨PDTC改变TMZ效果可能涉及的分子机制。方法1.根据不同处理将细胞分为对照组(control)、TMZ组、PDTC组和TMZ+PDTC组,后两组又根据PDTC浓度的改变设立不同亚组。2.细胞增殖抑制用MTT实验检测,细胞周期分布和细胞凋亡比例的改变应用流式细胞术检测。3.q RT-PCR和Western blot分别检测基因MGMT、BCL-XL和survivin的mRNA和蛋白表达改变。结果1.联合使用PDTC时,TMZ对U251细胞的增殖抑制,凋亡诱导和周期阻滞作用显著增强(P0.05);2.PDTC处理后MGMT、BCL-XL和survivin的mRNA和蛋白表达水平明显下降。3.TMZ联合PDTC组MGMT和BCL-XL的mRNA和蛋白表达水平显著低于TMZ组(P0.05)。结论1.NF-κB抑制剂PDTC能显著提高U251对TMZ的敏感性2.PDTC提高TMZ的化疗效果的作用机制很可能与抑制DNA损伤修复基因MGMT和抗凋亡基因BCL-XL的表达相关。
【关键词】：二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) 脑胶质瘤 NF-κB O~6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT) 替莫唑胺(TMZ)
【学位授予单位】：第三军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 缩略语表4-6
• 英文摘要6-8
• 中文摘要8-10
• 第一章 前言10-11
• 第二章 PDTC对胶质瘤U251细胞生物性状的改变11-23
• 2.1 材料与方法11-16
• 2.2 实验结果16-20
• 2.3 讨论20-22
• 2.4 小结22-23
• 第三章 PDTC对U251细胞MGMT、BCL-XL和survivin表达的改变23-42
• 3.1 材料与方法23-37
• 3.2 实验结果37-39
• 3.3 讨论39-41
• 3.4 小结41-42
• 全文总结42-43
• 参考文献43-46
• 文献综述 脑胶质瘤治疗现状及其药物抵抗的产生机制46-58
• 参考文献54-58
• 硕士期间主要发表论文58-59
• 致谢59-60

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 高云;唐霓;余崇林;;PDTC对实验性重症急性胰腺炎肺损伤的保护作用[J];中国医疗前沿;2012年15期

2 胡军,李贵刚,陈建斌,张虹;Expression of NF-κB in hRPE Cells Stimulated by PDTC and IL-1β[J];华中科技大学学报(医学英德文版);2005年03期

3 胡军;李贵刚;;Effects of PDTC on the Proliferation and PCNA Expression of Human Retinal Pigment Epithelial Cells[J];华中科技大学学报(医学英德文版);2006年02期

4 蒋明;王昌明;刘晓黎;梁荣感;;PDTC对大鼠慢性阻塞性肺疾病血流动力学的影响[J];临床肺科杂志;2010年10期

5 吴静;闫亚妮;张颖;徐丹;刘变利;潘荣;;抗氧化剂PDTC对卡铂诱导宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响[J];肿瘤;2010年11期

6 马瑞卿;刘立民;闫文貌;程石;;PDTC对急性坏死性胰腺炎大鼠急性肺损伤的影响[J];中国普通外科杂志;2012年03期

7 阚氏海;高云;余崇林;;PDTC抑制大鼠重症急性胰腺炎肺损伤NF-κB的激活[J];解剖科学进展;2009年01期

8 王敏莲;李竞;陈进;;PDTC对高糖培养大鼠肾成纤维细胞中MCP-1表达的影响[J];微循环学杂志;2009年03期

9 翟金霞;叶冬青;;PDTC对LPS诱导雌性MRL/lpr小鼠狼疮样症状的作用及其部分机制研究[J];安徽医科大学学报;2012年11期

10 李肖春;马建民;王宁利;;PDTC对大鼠Tenon’s囊成纤维细胞增生及凋亡的影响[J];眼科研究;2008年06期

中国重要会议论文全文数据库 前1条

1 郭然然;王阳;郑梦莹;李君;王红Z，

本文编号：365681