蛋白酶体抑制剂对胶质瘤细胞诱导凋亡作用及机制研究

发布时间：2022-09-29 15:14

　　胶质瘤是最常见的颅内恶性肿瘤，约占40％-50％，肿瘤呈浸润性生长，手术往往难以彻底切除，术后复发率高。其中胶质母细胞瘤恶性度最高，预后最差，平均生存期不超过1年。胶质瘤现在的治疗方案，仍然是手术治疗为主，不能够手术的，采取放射治疗和化学治疗；或者术后结合放、化疗。随着神经外科的发展，特别是神经导航及术中MRI的应用，使得手术切除更彻底、更安全，但仍未解决复发问题。化学治疗是治疗胶质瘤的重要手段，但疗效不能令人满意，这也提示胶质瘤的化疗还有很大提升空间，值得去努力探索，寻找更好、更有效的化疗药物就成了胶质瘤治疗研究的重要方向。 泛素-蛋白酶体系统是细胞内重要的蛋白质水解系统，主要选择性降解细胞内的异常蛋白质和许多细胞调节蛋白，广泛参与调控细胞代谢、分化和增殖，与肿瘤发生发展密切相关。因此，抑制蛋白酶体活性已成为一种新的恶性肿瘤治疗策略。蛋白酶体抑制剂能够与20S蛋白酶体的酶解活性位点相结合，阻断蛋白酶体对靶蛋白的降解。抑制蛋白酶体的活性能够抑制多种肿瘤细胞的增殖，包括黑色素瘤、前列腺癌细胞和神经胶质瘤细胞，但其基本机制还未完全阐明。基于此，我们通过实验来探讨蛋白酶体抑制剂MG-... 

【文章页数】：107 页

【学位级别】：博士

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中文摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 文献综述
    2.1 泛素-蛋白酶体系统
        2.1.1 底物的泛素化
        2.1.2 蛋白酶体
    2.2 UPP 与氧化应激
        2.2.1 UPP 在蛋白质质量控制中的作用
        2.2.2 UPP 对氧化应激的反应以及氧化应激对 UPP 的影响
        2.2.3 UPP 在降解氧化损害蛋白中的作用及对氧化应激反应
        2.2.4 UPP 活性受细胞氧化还原状态的控制
        2.2.5 UPP 和细胞内抗氧化系统的相互作用
        2.2.6 泛素结合物水平的升高是慢性温和氧化应激的指示剂
        2.2.7 UPP 相关的氧化应激反应的生理意义
    2.3 UPP 与肿瘤
        2.3.1 UPP 与细胞周期调控
        2.3.2 UPP 对细胞凋亡的调节
        2.3.3 UPP 对关键蛋白和其他信号传导途径的调节
        2.3.4 非降解作用的泛素化修饰与 DNA 修复
        2.3.5 UPP 与肿瘤的诊断与预后
        2.3.6 针对 UPP 的抗肿瘤治疗
第3章 实验材料和方法
    3.1 实验材料
        3.1.1 主要试剂
        3.1.2 主要仪器
        3.1.3 细胞株
        3.1.4 主要试剂的配制
    3.2 实验方法
        3.2.1 细胞培养
        3.2.2 MTT 检测法
        3.2.3 Hoechst 33342 染色法
        3.2.4 锇铀铅染色透射电镜观察
        3.2.5 蛋白酶体活性测定
        3.2.6 细胞内 ROS 的测定
        3.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期
        3.2.8 Western Blot 检测 Bax、bcl-2、Caspase-3、XIAP 和 PARP 蛋白的表达
第4章 实验结果
    4.1 MG-132 对 C6 胶质瘤细胞增殖抑制作用结果
    4.2 蛋白酶体的糜蛋白酶样活性检测结果
    4.3 细胞内活性氧的检测结果
    4.4 HOECHST 33342 染色结果
    4.5 透射电镜检查结果
    4.6 钛试剂抑制 MG-132 诱导的细胞凋亡和细胞周期阻滞
    4.7 抗氧化钛试剂改变细胞凋亡相关蛋白的表达
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
攻读博士学位期间发表的论文及科研成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]泛素连接酶E3和肿瘤关系的研究进展[J]. 程翌,郑国荣.  实用医学杂志. 2009(08)



本文编号：3682822